|
|
Degradace kyseliny hyaluronové v kůži a perkutánní absorpce exogenní kyseliny hyaluronové kůží
Exnerová, Andrea ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Andrea Exnerová Školitel: Mgr. Petra Žádníková, Ph.D. prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Degradace kyseliny hyaluronové v kůži a perkutánní absorpce exogenní kyseliny hyaluronové kůží V kůži se nachází až polovina celkového tělesného obsahu kyseliny hyaluronové (HA). HA funguje jako organizátor extracelulární matrix a podílí se na udržení hydratace a elasticity kůže. V poslední dekádě přibylo v oblasti degradace HA v kůži několik významných poznatků a jedním z cílů této diplomové práce bylo utvořit jejich ucelený přehled. Degradace HA v dermis byla objasněna objevením esenciální role, kterou hraje protein KIAA1199 při degradaci HA v dermálních fibroblastech. V epidermis ve stratum granulosum těsně pod stratum corneum (SC) byla prokázaná nadměrná exprese lyzosomálního enzymu hyaluronidázy 1. Není jisté, jakým způsobem je HA do keratinocytů internalizována nebo jestli je tímto způsobem degradována pouze intracelulární HA. Epidermální degradace HA tak zůstává téměř neobjasněna. HA je součástí řady topicky aplikovaných produktů na kůži zejména kvůli svým unikátním hydratačním vlastnostem, avšak není zcela objasněno, jestli je HA vůbec schopna pronikat do hlubších vrstev kůže. Na...
|
|
|
Změny v expresi biotransformačních enzymů v hlísticích ovlivněných albendazolem
Štěrbová, Karolína ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Trejtnar, František (oponent)
4 ABSTRAKT Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Karolína Štěrbová Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová Ph.D. Název diplomové práce: Změny v expresi biotransformačních enzymů v hlísticích ovlivněných albendazolem Vlasovka slézová (Haemonchus contortus) je vysoce patogenní parazitární hlístice, napadající gastrointestinální systém přežvýkavců. Nemoc, kterou způsobuje, se nazývá dle svého původce hemonchóza. Při dlouhodobé infekci dochází k rozvoji anémie, ztrátě hmotnosti hostitele a mnohdy i k úhynu. K léčbě se používají syntetická antiparazitická léčiva, tzv. anthelmintika. Celosvětovým problémem je rozvoj rezistence vůči všem dosud dostupným anthelmintikům. Důvodem je nejspíše časté a neopodstatněné podávání anthelmintik hospodářským zvířatům a expozice parazitů sub- letálním dávkám. Předkládaná práce je zaměřena na studium mechanismu vývoje resistence u vlasovek vůči albendazolu, anthelmintiku ze skupiny benzimidazolů. Mechanismem přispívajícím ke vzniku rezistence by mohla být zvýšená exprese některých biotransformačních enzymů. V této práci byl sledován vliv albendazolu na expresi vybraných genů u dospělců H. contortus z kmene ISE (Inbread Susceptible Edinburgh). Červi byli izolováni ze slezu jehňat a vystaveni třem různým koncentracím...
|
|
|
Metabolismus flubendazolu v lidských jaterních subcelulárních frakcích
Holubová, Jana ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Vokřál, Ivan (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Jana Holubová Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Metabolismus flubendazolu v lidských jaterních subcelulárních frakcích Flubendazol (FLU), benzimidazolové anthelmintikum s širokým spektrem účinku a nízkou toxicitou, se již dlouho používá ve veterinární i humánní medicíně. Vzhledem k jeho mechanismu účinku, který je založen na specifické vazbě na tubulin, je nyní FLU považován za slibné protinádorové léčivo. Nemáme však dostatek informací o jeho biotransformaci u člověka. V této práci byly použity jaterní subcelulární frakce 12 pacientů (6 mužů a 6 žen) ke studiu stereospecificity, buněčné lokalizace, preference koenzymu a možných inter- individuálních nebo pohlavních rozdílů při redukci FLU. Dále bylo hodnoceno riziko interakce FLU s jinými léčivy. Výsledky ukázaly, že FLU je redukován zejména v cytosolu a preferovaným koenzymem je NADPH. Redukce karbonylu FLU byla prokázána jako striktně stereospecifická a karbonylreduktasa 1 byla identifikována jako hlavní enzym redukce FLU v lidských játrech. Vyšší redukce FLU a vyšší hodnota relativní exprese karbonylreduktasy 1 byla prokázána u mužů než u žen, ale celková inter- individuální variabilita byla relativně nízká. Jaterní...
|
|
|
Změny v expresi vybraných enzymů metabolizujících léčiva u parazita po kontaktu se subletálními dávkami léčiv
Pasák, Michael ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Trejtnar, František (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Michael Pasák Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Změny v expresi vybraných enzymů metabolizujících léčiva u parazita po kontaktu se subletálními dávkami léčiv Parazitem, který způsobuje významné ztráty v chovu hospodářských zvířat skrze onemocnění zvané hemonchóza, je vlasovka slézová (Haemonchus contortus). Jedním z anthelmintik používaným ve veterinární medicíně v boji proti hemochóze je i ivermektin (IVM). Příčinou problémů s tímto parazitem je častý výskyt rezistence na IVM i další podávaná anthelmintika. Předpokládá se, že určitou roli v rezistenci u vlasovky mohou hrát enzymy z rodiny cytochromů P450 (CYP) a efluxní transportéry P-glykoproteiny (P-gp). Tato diplomová práce se věnuje vlivu sub-letálních koncentrací IVM na změnu exprese genů pro jednotlivé CYP a P-gp. Před vlastním experimentem se dospělci kmene ISE H. contortus rozdělili na samce a samice. Po inkubaci dospělců se 3 různými koncentracemi IVM, byla izolována RNA a změna exprese vybraných genů se stanovila metodou qPCR. Byly zjištěny výrazné rozdíly v expresi testovaných genů u samců a samic. Kontaktem vlasovek s IVM došlo k signifikantním změnám v expresi testovaných genů jak pro CYP tak i P-gp....
|
|
|
Studium exprese glutathionperoxidas u myší s navozenou obezitou
Zemanová, Kateřina ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Skálová, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Kateřina Zemanová Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, PhD. Název diplomové práce: Studium exprese glutathionperoxidas u myší s navozenou obezitou Obezita je závažným celosvětovým zdravotním problémem. Nejčastěji vzniká v důsledku nerovnováhy mezi příjmem a výdejem energie. Pojí se s ní zvýšené množství reaktivních forem kyslíku (ROS) v organismu, které zvyšují riziko vzniku komplikací spojených s obezitou. Mezi tyto komplikace se řadí kardiovaskulární onemocnění, metabolický syndrom nebo diabetes mellitus 2. typu. Cílem mnoha studií zaměřených na obezitu je zjišťování nových biomarkerů, hledání cílových struktur pro léčbu obezity a potenciálně vývoj nového léčiva. Glutathion peroxidázy (GPx) jsou enzymy s antioxidační aktivitou. Zatím je popsáno osm GPx. Jsou schopny snižovat množství reaktivních forem kyslíku (ROS), které se tvoří v těle a v případě jejich akumulace poškozují okolní tkáně a mají spojitost s mnoha onemocněními. Z těchto zjištění vychází snaha odhalit, jak je regulována exprese genů pro GPx a jaké je jejich spojení s microRNA (miRNA). MiRNA jsou malé nekódující jednořetězčové molekuly RNA. Nejčastěji jsou dlouhé 22 nukleotidů a jsou zapojeny do negativní posttranskripční regulace...
|
|
|
Změny v expresi vybraných enzymů metabolizujících léčiva u parazita po kontaktu se subletálními dávkami léčiv
Pasák, Michael ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Trejtnar, František (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Michael Pasák Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Změny v expresi vybraných enzymů metabolizujících léčiva u parazita po kontaktu se subletálními dávkami léčiv Parazitem, který způsobuje významné ztráty v chovu hospodářských zvířat skrze onemocnění zvané hemonchóza, je vlasovka slézová (Haemonchus contortus). Jedním z anthelmintik používaným ve veterinární medicíně v boji proti hemochóze je i ivermektin (IVM). Příčinou problémů s tímto parazitem je častý výskyt rezistence na IVM i další podávaná anthelmintika. Předpokládá se, že určitou roli v rezistenci u vlasovky mohou hrát enzymy z rodiny cytochromů P450 (CYP) a efluxní transportéry P-glykoproteiny (P-gp). Tato diplomová práce se věnuje vlivu sub-letálních koncentrací IVM na změnu exprese genů pro jednotlivé CYP a P-gp. Před vlastním experimentem se dospělci kmene ISE H. contortus rozdělili na samce a samice. Po inkubaci dospělců se 3 různými koncentracemi IVM, byla izolována RNA a změna exprese vybraných genů se stanovila metodou qPCR. Byly zjištěny výrazné rozdíly v expresi testovaných genů u samců a samic. Kontaktem vlasovek s IVM došlo k signifikantním změnám v expresi testovaných genů jak pro CYP tak i P-gp....
|
|
|
Study of activation properties of insulin, IGF-1 and IGF-2 analogs towards the receptors for insulin and IGF-1
Chrudinová, Martina ; Selicharová, Irena (vedoucí práce) ; Šulc, Miroslav (oponent) ; Skálová, Lenka (oponent)
Systém insulinu a insulinu podobných růstových faktorů (IGF) je velmi komplexní soustava podílející se na regulaci metabolismu a buněčného a tělesného růstu. Součástí tohoto systému jsou tři strukturně příbuzné peptidové hormony: insulin a dva insulinu podobné růstové faktory (IGF-1 a IGF-2) a jejich membránové receptory: dvě isoformy insulinového receptoru (IR-A a IR-B) a IGF-1R receptor (IGF-1R). Zatímco insulin se podílí převážně na regulaci metabolismu, IGF-1 a IGF-2 se účastní hlavně regulace buněčného růstu, proliferace a diferenciace. Vzhledem ke strukturní podobnosti jak hormonů, tak jejich receptorů, mají všechny hormony schopnost vázat se ke všem třem receptorům a aktivovat je, i když v různé míře. Jak dochází k odlišení "metabolických" a "mitogenních" buněčných odpovědí po stimulaci receptorů jednotlivými ligandy nebylo stále zcela objasněno, stejně jako klíčové strukturní faktory podílející se na rozdílných afinitách jednotlivých ligandů k IR-A, IR-B a IGF-1R. Nerovnováha v celém systému vede k řadě patologických stavů, z nichž nejvýznamnější jsou diabetes mellitus a rakovina. Porozumění celému systému na strukturní úrovni je tedy zásadní pro vývoj analogů se žáoucími vlastnostmi, uplatnitelných v klinické praxi. V rámci této práce byla nejprve optimalizována metodologie vhodná pro...
|
|
|
Metabolismus flubendazolu v lidských jaterních subcelulárních frakcích
Holubová, Jana ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Vokřál, Ivan (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Jana Holubová Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Metabolismus flubendazolu v lidských jaterních subcelulárních frakcích Flubendazol (FLU), benzimidazolové anthelmintikum s širokým spektrem účinku a nízkou toxicitou, se již dlouho používá ve veterinární i humánní medicíně. Vzhledem k jeho mechanismu účinku, který je založen na specifické vazbě na tubulin, je nyní FLU považován za slibné protinádorové léčivo. Nemáme však dostatek informací o jeho biotransformaci u člověka. V této práci byly použity jaterní subcelulární frakce 12 pacientů (6 mužů a 6 žen) ke studiu stereospecificity, buněčné lokalizace, preference koenzymu a možných inter- individuálních nebo pohlavních rozdílů při redukci FLU. Dále bylo hodnoceno riziko interakce FLU s jinými léčivy. Výsledky ukázaly, že FLU je redukován zejména v cytosolu a preferovaným koenzymem je NADPH. Redukce karbonylu FLU byla prokázána jako striktně stereospecifická a karbonylreduktasa 1 byla identifikována jako hlavní enzym redukce FLU v lidských játrech. Vyšší redukce FLU a vyšší hodnota relativní exprese karbonylreduktasy 1 byla prokázána u mužů než u žen, ale celková inter- individuální variabilita byla relativně nízká. Jaterní...
|
|
|
Modulační účinky borůvkového extraktu na aktivitu a expresi vybraných biotransformačních enzymů potkana
Láníčková, Tereza ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Tereza Láníčková Školitel: Prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Modulační účinky borůvkového extraktu na aktivitu a expresi vybraných biotransformačních enzymů potkana Brusnice borůvka (Vaccinium myrtillus L., Ericaceae) je jedním z nejbohatších zdrojů antokyanů. Tyto bioaktivní sekundární metabolity polyfenolového charakteru dávají borůvkám nejenom charakteristickou modročernou barvu, ale také jsou zodpovědné za jejich mnohé zdravotní přínosy. Borůvky tak mají potenciální hodnotu v léčbě a prevenci stavů spojených s poškozením zraku, zánětem, dyslipidemií, hyperglykémií nebo zvýšeným oxidačním stresem. V mé diplomové práci byl sledován vliv podávání borůvkového extraktu po dobu 29 a 58 dnů na aktivitu a expresi vybraných enzymů I. a II. fáze biotransformace v játrech potkanů. Enzymatická aktivita a exprese mRNA byla stanovována v cytosolických nebo mikrosomálních frakcích jaterní tkáně skupin potkanů skupin kontrolních a ovlivněných borůvkovým extraktem. Ke stanovení aktivit aldehydreduktasy (AKR1A1), hydroxysteroiddehydrogenasy (AKR1C), glutathion-S- transferasy (GST), chinonoxidoreduktasy (NQO1), karbonylreduktasy (CBR), katechol-O- methyltransferasy (COMT),...
|
|
|
Nové aspekty funkce a regulace pregnanového X receptoru
Hyršová, Lucie ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Skálová, Lenka (oponent) ; Vondráček, Jan (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Lucie Hyršová Školitel: doc. PharmDr. František Trejtnar, CSc. Konzultant: prof. PharmDr. Petr Pávek, PhD. Název disertační práce: Nové aspekty funkce a regulace pregnanového X receptoru Pregnanový X receptor je receptor náležející do nadrodiny nukleárních receptorů, které působí jako na ligandu závislé transkripční faktory řídící expresi cílových genů. PXR je v posledních dvou desetiletích extenzivně studován jakožto tzv. xenosenzor, tj. receptor schopný vázat xenobiotika včetně řady léčiv, a regulovat jejich metabolismus indukcí biotransformačních enzymů I. i II. fáze biotransformace. Indukce, tj. transkripční stimulace exprese nejvýznamnějších enzymů cytochromu P450 ligandy PXR byla detailně popsána na mnoha úrovních. V této disertační práci se věnuji aspektům regulace prostřednictvím PXR, které rozšiřují naše klasické chápání PXR jakožto receptoru, jehož výlučnou funkcí je indukovat biotransformační enzymy prostřednictvím svých agonistů. V první projektu jsem studovala regulaci transportéru OCT1 v hepatálních buňkách a ukázala, že PXR nikoli indukuje, ale potlačuje expresi tohoto významného transportéru léčiv i endogenních látek. Tato práce je první detailní studie ukazující mechanismus...
|
host ::
RSS.