|
|
Vliv vybraných látek ovlivňujících centrální nervový systém na kostní metabolismus
Fekete, Soňa ; Živný, Pavel (vedoucí práce) ; Horák, Pavel (oponent) ; Nobilis, Milan (oponent)
Zvýšení průměrné délky života světové populace je spojeno se zdravotními problémy. Jedním z těchto problémů, který se často vyskytuje obzvláště u starších lidí je snížení kvantity a kvality kostní hmoty nebo-li osteoporóza. Je to systémové skeletální onemocnění způsobené úbytkem kostní hmoty a u žen i mužů představuje významný zdravotní problém. Je charakterizována nízkou kostní hmotou, poškozením mikroarchitrektury kostní tkáně a zvýšením křehkosti kostí s náchylností ke zlomeninám. Osteoporotické fraktury významně zvyšují morbiditu a mortalitu pacientů. Mezi rizikové faktory, které mohou mít vliv na vznik osteoporózy patří dlouhodobé užívání léků, jako jsou např. antiepileptika a antidepresiva. Cílem této práce bylo zhodnotit účinek orchidektomie a vliv novějších antiepileptik (levetiracetam, lacosamid, topiramat, lamotriginu) a antidepresiv (mirtazapin, venlafaxinu a trazodonem) na kostní metabolismus u zdravých samců potkanů kmene wistar. Prvním cílem bylo zjistit vliv orchidektomie na metabolismus kostí u potkanů. Zjistili jsme, že orchidektomie měla negativní vliv na kostní metabolismus u potkanů. Tyto výsledky potvrzují, že tato zvířata jako vhodné modely pro zkoumání androgenní modulace složení těla. Druhým cílem bylo zjistit vliv vybraných antiepileptik (levetiracetamu, lacosamid,...
|
|
|
Hodnocení biologicky aktivních látek pomocí HPLC IV.
Seidlová, Martina ; Pilařová, Pavla (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Diplomová práce: Hodnocení biologicky aktivních látek pomocí HPLC IV. Vypracoval(a): Martina Seidlová Školitel(ka): PharmDr.Pavla Pilařová, Ph.D. V této diplomové práci byla prováděna studie retenčního chování léčiv v extrémních podmínkách pro kolonu schopnou měřit pH v rozmezí 1-12 na koloně Kinetex EVO C18 (150 x 3 mm). Pro vyšší pH se studovala tyto léčiva: kvetiapin a jeho dva metabolity - norkvetiapin a 7-hydroxykvetiapin, bromhexin, kodein, zolpidem a jeho nečistota, fluoxetin a aciklovir. Nejlepších výsledků dosahoval kvetiapin s jeho metabolity, proto byly vybrány pro další testování a možnost separace z plazmy. Jako mobilní fáze byl použit octanový pufr o pH 10 v poměru 70:30 k organické fázi, která byla tvořena acetonitrilem a methanolem (55:5). Pro nízké pH byla studována tyto léčiva: kyselina salicylová, kyselina acetylsalicylová, aciklovir, bromhexin a fluoxetin. Nejlepších výsledků dosahovala kyselina salicylová a acetylsalicylová, proto byly použity pro další testování a možnost separace v léčivém přípravku. Jako mobilní fáze byl použit fosfátový pufr o pH 2,2 s acetonitrilem v poměru 80:20. Průtok byl nastaven na 1,0 ml/min, teplota na koloně byla 25řC. Detekce probíhala...
|
|
|
Vývoj postupu extrakce pro izolaci pravastatinu a jeho metabolitu z biologického materiálu pomocí SPE
Rabatinová, Martina ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Martina Rabatinová Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název rigorózní práce: Vývoj postupu extrakce pro izolaci pravastatinu a jeho metabolitu z biologického materiálu pomocí SPE Statiny jsou skupinou léčiv používaných ke snižování hladin cholesterolu. Jde o inhibitory 3-hydroxy-3-metylglutaryl-koenzym A reduktázy. Tato práce se zabývá vývojem metody pro kvalitativní a kvantitativní analýzu pravastatinu a pravastatinu laktonu v potkaní moči. Metoda byla využita pro farmakokinetickou studii. Extrakce z biologického materiálu byla provedena na SPE kolonce Discovery DSC-18. Promývací i eluční činidla byla složena z vhodných poměrů acetonitrilu a 10 mM pufru octanu amonného, pH 4,5. Množství extrakčních kroků bylo optimalizováno tak, aby došlo k eliminaci většiny matricových nečistot. Jako separační a detekční technika byla využita ultravysokoúčinná kapalinová chro- matografie ve spojení s hmotnostně spektrometrickým detektorem typu trojitého kva- drupólu. Separace byla provedena na koloně BEH C18 2, 1 × 100 mm s částicemi o ve- likosti 1, 7 µm. Jako mobilní fáze byla vybrána směs acetonitrilu a 0, 5 mM roztoku octanu amonného o pH 4,0. Analýza probíhala při podmínkách gradientové eluce...
|
|
|
Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení endogenních a exogenních látek pro transportní a metabolické studie
Hroch, Miloš ; Nobilis, Milan (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent) ; Šišpera, Luděk (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát Ing. Miloš Hroch Konzultant Doc. PharmDr. Milan Nobilis, CSc. Název rigorózní práce Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení endogenních a exogenních látek pro transportní a metabolické studie Předkládaná disertační práce se zabývá vývojem a validací chromatografických metod v bioanalýze léčiv a jejich metabolitů. Práce přináší v teoretické části seznámení se základy problematiky bioanalýzy s využitím kapalinové chromatografie. Zvláštní zřetel je kladen na novější trendy, zejména v oblasti stacionárních fází. V praktické části je čtenář podrobněji seznámen s vývojem a validací několika bioanalytických metod s využitím vysokoúčinné kapalinové chromatografie. První metoda se týká stanovení 5 fluorouracilu a jeho metabolitů. Využito je separace na koloně Luna PFP(2) s gradientovou elucí a UV/VIS detekcí. Diskutována jsou zejména specifika stanovení těchto velmi polárních špatně detekovatelných látek. Vyvinutá a validovaná metoda je používána pro TDM onkologických pacientů léčených s karcinomem rekta. Další diskutovaná metoda se zabývá stanovením polyglutamátů metotrexátu v erytrocytech s využitím isokratické eluce na hybridní koloně Gemini C18 a fluorescenční detekcí po...
|
|
|
Analýza statinů v biologickém materiálu
Vlčková, Hana ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent) ; Šimek, Petr (oponent)
4 ABSTRAKT Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Hana Vlčková Školitel: Prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Školitel specialista: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název disertační práce: Analýza statinů v biologickém materiálu Disertační práce se zabývá analýzou statinů v biologickém materiálu. Statiny patří do skupiny léčiv snižující hladinu cholesterolu a jedná se o nejpoužívanější léčiva v léčbě Familiární hypercholesterolémie. Z důvodu velmi nízkých koncentrací statinů (ng/ml) v krevní plazmě je výběr vhodné analytické metody značně omezen. Díky své citlivosti a selektivitě se ukázalo spojení kapalinové chromatografie s hmotnostně spektrometrickou detekcí jako nejvhodnější technika. V případě analýzy složitých matricí, jako jsou biologické vzorky, musí chromatografické separaci vždy předcházet úprava vzorku. Teoretická část disertační práce nejprve shrnuje jednotlivé farmakologické vlastnosti a účinky statinů. Dále je věnována teoretickým poznatkům z oblasti UHPLC a hmotnostní spektrometrie. Nejrozsáhlejší díl teoretické části je věnován popisu jednotlivých technik úpravy vzorků. Praktická část se zabývá nejen vývojem UHPLC-MS/MS metodiky pro stanovení statinů v biologickém materiálu, ale i volbou a vývojem vhodné extrakční techniky....
|
|
|
Kvantitativní analýza léčiv v biologických materiálech separačními metodami
Maláková, Jana ; Nobilis, Milan (vedoucí práce) ; Polášek, Miroslav (oponent) ; Chládek, Jaroslav (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát: PharmDr. Jana Maláková Školitel: Doc. PharmDr. Milan Nobilis, CSc. Název dizertační práce: Kvantitativní analýza léčiv v biologických materiálech separačními metodami Disertační práce uvádí instrumentální analytické metody určené k analýze léčiv a jejich metabolitů v biologických vzorcích za využití kapalinové a plynové chromatografie. Ve fázi optimalizace analytických podmínek byly testovány různé postupy přípravy vzorků. Od běžné precipitace bílkovin acetonitrilem (tento přístup byl aplikován např. při kvantitativní analýze cefuroximu), přes extrakci kapalina-kapalina (osvědčil se u metody analýzy topiramátu, 8-methoxypsoralenu) a konečně extrakty vhodné k separaci byly získány i extrakcí na pevné fázi s využitím sorbentů ve směsném módu (na principu reverzní fáze v kombinaci s iontovou výměnou) při analýze galantaminu a jeho metabolitů. Ultrafiltrace vzorků plazmy na na filtrech Microcon YM 10 umožnila oddělení volného a vázaného podílu léčiva a určení vazebnosti (u metody na stanovení cefuroximu). Vlastní chromatografické podmínky tj. volba plynové nebo kapalinové chromatografie, závisela na fyzikálně chemických vlastostech stanovovaného léčiva. A pokud tyto vlastnosti...
|
|
|
Analýza biologicky aktivních látek s využitím kapilární elektroforézy
Petrů, Klára ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent) ; Urbánek, Marek (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát Mgr. Klára Petrů Školitel Doc. RNDr. Miroslav Polášek, CSc. Název disertační práce Analýza biologicky aktivních látek s využitím kapilární elektroforézy Předložená práce se zabývá analýzou farmaceuticky významných kvartérních amoniových bází metodou kapilární elektroforézy (CE). V teoretické části jsou popsány principy kapilární elektroforézy a možné způsoby detekce spojené s touto technikou s důrazem na bezkontaktní vodivostní detekci (C4D) a spojení kapilární elektroforézy s hmotnostním spektrometrem (CE-MS). Dále jsou charakterizovány kvarterní amoniové sloučeniny, které byly předmětem studie - carbethopendecinium bromid, pankuronium bromid (PM), vekuronium bromid (VM) a rokuronium bromid (RM). Experimentální část popisuje vývoj a validaci nových CE metod, které nebyly v souvislosti s těmito látkami dříve popsány. Metody byly použity k analýze reálných farmaceutických přípravků. Ve všech případech byla C4D metodou volby pro detekci těchto látek málo absorbujících v UV oblasti. I. První část se zabývá analýzou antiseptické látky povahy tenzidu - septonexu. Základní elektrolyt (BGE) 30 mM MES o pH 7 s přídavkem 12,5 mg/ml 2-hydroxypropyl-β-cyklodextrinu a obsahem 20 % (v/v) ACN eliminoval adsopci...
|
|
|
Moderní trendy v úpravě vzorků biologického materiálu k analýze vybraných biologicky aktivních látek
Sadílek, Petr ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent) ; Barták, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Petr Sadílek Školitel: Prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Školitel specialista: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název disertační práce: Moderní trendy v úpravě vzorků biologického materiálu k analýze vybraných biologicky aktivních látek Disertační práce se zabývá stanovením vybraných léčiv, jejich metabolitů a dalších biologicky aktivních látek v biologickém materiálu. Tato oblast instrumentální analýzy se dostává v posledních letech do popředí zájmu, zejména z důvodu monitorování a optimalizace léčby s cílem dosáhnout individuálně co nejefektivnější terapie s minimem nežádoucích vedlejších účinků, či z důvodů toxikologických. Práce se soustředila na celou analytickou fázi laboratorního vyšetření, tzn. nejen na vývoj a validaci chromatografických metod pro stanovení cílových analytů, ale zejména na přípravu vzorku biologického materiálu před vlastní analýzou. Tato fáze je pro samotné stanovení analytů z biologického materiálu naprosto nezbytná, neboť určuje nejen správnost výsledku laboratorního vyšetření, ale také životnost analytické instrumentace, zvláště chromatografických kolon. V současné době se stále nejvíce používají k přípravě vzorku k analýze tradiční extrakční techniky LLE a SPE,...
|
|
|
Akceleranty transdermální permeace: Studie vlivu struktury na akcelerační účinek.
Novotný, Michal ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent) ; Rabišková, Miloslava (oponent)
Permeační akceleranty slouží k usnadnění prostupu léčiv přes kůži do systémové cirkulace či přilehlých tkání. Tato doktorská práce přímo navazuje na výsledky předchozích studií naší pracovní skupiny a věnuje se potenciálním permeačním akcelerantům dvou odlišných chemických skupin: derivátům dikarboxylových kyselin a Transkarbamu 12 a jeho analogům. Hlavním cílem bylo studovat vztahy mezi strukturou a účinkem těchto akcelerantů a přispět k objasnění mechanismu jejich účinku. Nejprve jsem se zabýval studiem strukturních vztahů u derivátů dikarboxylových kyselin. Připravil jsem sérii látek odvozených od kyseliny maleinové, fumarové, jantarové, (2R,3R)-vinné a meso-vinné. Schopnost těchto sloučenin urychlit prostup modelového léčiva theofylinu přes prasečí kůži plné tloušťky byla studována pomocí in vitro permeačních experimentů ve Franzových difuzních celách. Bylo zjištěno, že jednořetězcové amfifilní molekuly jsou mnohem účinnějšími akceleranty než odpovídající dvouřetězcové sloučeniny. Nejaktivnější látka celé série - monododecylester kyseliny maleinové (derivát s cis-dvojnou vazbou), vykázal významně větší schopnost urychlit přestup theofylinu přes kůži v porovnání s příslušným trans-derivátem. Dále bylo zjištěno, že aktivita látek s jednoduchou vazbou (derivátů kyseliny jantarové) je silně závislá...
|
|
|
Studium chirálních aspektů biotransformace léčiv instrumentálními analytickými metodami
Holmanová, Veronika ; Nobilis, Milan (vedoucí práce) ; Kovaříková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát: Bc. Veronika Holmanová Školitel: Doc. PharmDr. Milan Nobilis, CSc. Název diplomové práce: Studium chirálních aspektů biotransformace léčiv instrumentálními analytickými metodami Byla vyvinuta nová chirální chromatografická metoda pro zhodnocení stereospecifity lidských a potkaních cytosolických karbonylreduktas a mikrosomálních oxidas zapojených do biotransformace nabumetonu. Vzniklá LLE-HPLC-PDA metoda umožňovala extrakci, separaci a UV detekci prochirálního nabumetonu a jeho metabolitů I.fáze biotransformace, včetně enantiomerů dvou chirálních produktů karbonylové redukce. Jako vnitřní standard sloužil methylester naproxenu. Pro liquid-liquid extrakci byl použit diethylether. Dostatečnou separaci 9 analytů zajišťovala za isokratických podmínek mobilní fáze o složení MeOH 1M NaClO4 pH 3 (75:25, v/v) ve spojení s Chiralcel OD-R 250mm×4.6 mm kolonou. Při průtoku 0,5 ml/min trvala jedna analýza 60 min. Efluent z kolony byl monitorován photodiode-array detektorem (zaznamenávající celé spektrum nebo vybrané vlnové délky - 225 a 265 nm). Výsledky biotransformace nabumetonu in vitro s cytosolickými a mikrosomálními frakcemi hepatocytů byly porovnány u dvou živočišných druhů (potkan,...
|
host ::
RSS.