|
|
HPMC-based liposomal mucoadhesive films with model peptide as target API
Belcáková, Hedviga ; Nobilis, Milan (vedoucí práce) ; Doležal, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Kandidát: Hedviga Belcáková Školiteľ: Prof. Milan Nobilis, CSc; Vernika Fidelj (Heidelberg Universität, Institut für Pharmazie und Molekulare Biotechnologie) Názov diplomovej práce: Lipozomální mukoadhezivní filmy na bázi HPMC s modelovým peptidem jako cílovým API Predmetom diplomovej práce je preliminárna formulačná fáza mukoadhezívnych bukálnych filmov určených k transmukozálnemu podaniu peptidových liečiv. Skúšobné metódy zahŕňajú hodnotenie hrúbky, pevnosti v ťahu, elongácie, reziduálnej vlhkosti, in vitro 'swelling' parametru a podisolučnej integrity lipozómov. Zvolený polymér (hydroxypropyl methylcelulóza) preukázala optimálne vlastnosti v koncentrácii 10 % v kombinácii s polyethylenglykolom (5 %) ako plasticizérom. Použitá koncentrácia lipozómov bola 2 %. Vyvinutá metóda prípravy vykazovala uspokojivú reprodukovateľnosť s priestorom pre optimalizáciu v oblasti homogenizácie. Výber solventu (H2O vs. PBS) preukázal silný vplyv na mechanické vlastnosti formulácie vedúce k značnej strate elasticity a mukoadhezívnej sily. Prídavok lipozómov v tretej fáze bol úspešný. Následná disolúcia mala len mierny vplyv na ich integritu.
|
|
|
Analytické hodnocení léčiv s využitím HPLC II.
Hanková, Eva ; Mokrý, Milan (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Kandidát: Eva Hanková Školitel: RNDr. Milan Mokrý, CSc. Název diplomové práce: Analytické hodnocení léčiv s využitím HPLC II. Abstrakt Tato diplomová práce se zabývala analytickým hodnocením kyseliny tiaprofenové pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Pro stanovení kyseliny tiaprofenové byla použita kolona LiChroCART® 250-4 LiChrospher® 100 RP-18 (5 µm) a mobilní fáze složená z acetonitrilu a vodného pufru KH2PO4 0,01 mol/l v poměru 40 : 60 (v/v). pH pufru bylo upraveno kyselinou fosforečnou na hodnotu 3,0; průtoková rychlost byla nastavena na 1 ml/min a teplota na 22 řC. Jako vnitřní standard byl zvolen naproxen a k detekci byla použita vlnová délka 263 nm. Protože je kyselina tiaprofenová chirální látka vyskytující se ve formě racemátu, následoval výběr chromatografických podmínek pro separaci jejích enantiomerů. Byly zkoušeny dvě chirální kolony v normálním i reverzním módu. Jako nejvhodnější byla vybrána kolona Chiralcel OD-R, 250 × 4,6 mm, (10 µm) na bázi celulózy za použití mobilní fáze o složení n-hexan : propan-2-ol : kyselina octová v poměru 94 : 6 : 0,1 (v/v/v) při průtoku 0,5 ml/min a teplotě 22 žC. Enantiomery byly eluovány v retenčních časech 28,3 a 30,7 minut s rozlišením...
|
|
|
Využití HPLC v chirálních separacích III.
Janetková, Monika ; Kučera, Radim (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent)
Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Univerzita Karlova Kandidát: Monika Janetková Školiteľ: doc. PharmDr. Radim Kučera, Ph.D. Konzultant: doc. Ing. Radim Vespalec, DrSc. Názov práce: Využití HPLC v chirálních separacích III. Bórové klastre sú kompletne syntetické anorganické štruktúry jedinečných vlastností, ktoré si razia cestu medzi organickými molekulami zvyčajne používanými v medicíne. Základná štruktúra je tvorená atómami bóru a vodíka, ktoré v priestore vytvárajú mnohosten s trojuholníkovými plochami. Väzba medzi atómami B-H-B je trojstredová a atómy spája len jeden elektrónový pár. Zdieľaný mrak elektrónov je príčinou pseudoaromatického charakteru a delokalizovaného negatívneho náboja štruktúry. Bóry neutrálnych klastrov majú tendenciu uvoľňovať protón vodíka za vzniku aniontu, a to v protických aj aprotických rozpúšťadlách. Typická je vysoká lipofilita, stabilita voči metabolickým pochodom v organizme a tepelná odolnosť. V praxi sú najvyužívanejšími closo-, nido- a arachno-karborány líšiace sa priestorovým usporiadaním s 11-12 vrcholmi. Bórové klastre sú vysoko symetrické molekuly, u ktorých endo- aj exoskeletálna substitúcia narušuje symetriu klastru za vzniku enantiomérov. V súčastnosti sú využívané ako stereoselektívne...
|
|
|
Moderní separační techniky pro analýzu biologického materiálu v klinickém výzkumu
Kasalová, Eva ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent) ; Friedecký, David (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Eva Kasalová Školitel: prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Školitel specialista: doc. RNDr. Dagmar Solichová, Ph.D. Název disertačni práce: Moderní separační techniky pro analýzu biologického materiálu v klinickém výzkumu Předkládaná disertační práce se zabývá vývojem chromatografického stanovení lipofilních vitaminů a úpravou vzorku biologického materiálu před vlastní analýzou. Klinické monitorování hladin těchto vitaminů, zvláště pak vitaminu D, v různých biologických matricích je v posledním desetiletí velmi diskutovaným tématem. V teoretické části této disertační práce jsou charakterizovány cílové analyty - vitaminy A, E, D s jejich biologickou aktivitou - dále pak biologický materiál používaný ve Výzkumné laboratoři, zvláště pak podrobný popis složení mateřského mléka, jeho nezastupitelná role ve výživě novorozenců a zpracování mateřského mléka v mléčné bance. Na tuto část navazuje obsáhlá kapitola věnující se úpravě biologické matrice před analýzou. Jsou zde popsány nejčastěji používané techniky úpravy vzorku, jako jsou extrakční metody, velká pozornost je věnována novým trendům v těchto metodách, které se rozvíjejí v posledních letech. Teoretickou část uzavírá problematika analytického stanovení...
|
|
|
Využití HPLC v chirálních separacích III.
Janetková, Monika ; Kučera, Radim (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent)
Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Univerzita Karlova Kandidát: Monika Janetková Školiteľ: doc. PharmDr. Radim Kučera, Ph.D. Konzultant: doc. Ing. Radim Vespalec, DrSc. Názov práce: Využití HPLC v chirálních separacích III. Bórové klastre sú kompletne syntetické anorganické štruktúry jedinečných vlastností, ktoré si razia cestu medzi organickými molekulami zvyčajne používanými v medicíne. Základná štruktúra je tvorená atómami bóru a vodíka, ktoré v priestore vytvárajú mnohosten s trojuholníkovými plochami. Väzba medzi atómami B-H-B je trojstredová a atómy spája len jeden elektrónový pár. Zdieľaný mrak elektrónov je príčinou pseudoaromatického charakteru a delokalizovaného negatívneho náboja štruktúry. Bóry neutrálnych klastrov majú tendenciu uvoľňovať protón vodíka za vzniku aniontu, a to v protických aj aprotických rozpúšťadlách. Typická je vysoká lipofilita, stabilita voči metabolickým pochodom v organizme a tepelná odolnosť. V praxi sú najvyužívanejšími closo-, nido- a arachno-karborány líšiace sa priestorovým usporiadaním s 11-12 vrcholmi. Bórové klastre sú vysoko symetrické molekuly, u ktorých endo- aj exoskeletálna substitúcia narušuje symetriu klastru za vzniku enantiomérov. V súčastnosti sú využívané ako stereoselektívne...
|
|
|
Analytické hodnocení léčiv s využitím HPLC I.
Dobrá, Hana ; Mokrý, Milan (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Studentka: Hana Dobrá Školitel: RNDr. Milan Mokrý, CSc. Téma diplomové práce: Analytické hodnocení léčiv s využitím HPLC I. Pro vývoj chromatografických podmínek separace suprofenu na klasických C18 kolonách, byly použity čtyři různé kolony. Nejvhodnější se ukázala kolona LiChroCART R 125-4 HPLC Cartridge, LiChrospher® 100 RP - 18, 5 µm. Bylo též vyzkoušeno mnoho různých mobilních fází, jako nejvhodnější byla vybrána mobilní fáze složená z ACN a dihydrogenfosforečnan-draselného vodného pufru v poměru 35:65 o pH 3,03. Při tomto poměru byl výsledný retenční čas suprofenu 7,8 minuty. Také byl hledán vhodný vnitřní standard. Z několika zkoušených látek byl vybrán jako nejvhodnější naproxen, který se eluoval za píkem suprofenu a poskytoval separovaný pík. Dále následovalo dlouhé hledání vhodných podmínek pro separaci enantiomerů suprofenu. Nakonec byl suprofen separován za normálního módu na koloně Chiralcel OD-R, 0,46 cm x 25cm, od firmy Daicel chemical industries s použitou mobilní fází hexan a propan-2-ol v poměru 98 : 2 s přídavkem 0,6 ml kyseliny octové. Při průtoku 0,5 ml/min byly získány retenční časy okolo 60 minut. Zvýšením rychlosti průtoku se dobu analýzy podařilo zkrátit až na 25 minut....
|
|
|
Vliv vybraných látek ovlivňujících centrální nervový systém na kostní metabolismus
Fekete, Soňa ; Živný, Pavel (vedoucí práce) ; Horák, Pavel (oponent) ; Nobilis, Milan (oponent)
Zvýšení průměrné délky života světové populace je spojeno se zdravotními problémy. Jedním z těchto problémů, který se často vyskytuje obzvláště u starších lidí je snížení kvantity a kvality kostní hmoty nebo-li osteoporóza. Je to systémové skeletální onemocnění způsobené úbytkem kostní hmoty a u žen i mužů představuje významný zdravotní problém. Je charakterizována nízkou kostní hmotou, poškozením mikroarchitrektury kostní tkáně a zvýšením křehkosti kostí s náchylností ke zlomeninám. Osteoporotické fraktury významně zvyšují morbiditu a mortalitu pacientů. Mezi rizikové faktory, které mohou mít vliv na vznik osteoporózy patří dlouhodobé užívání léků, jako jsou např. antiepileptika a antidepresiva. Cílem této práce bylo zhodnotit účinek orchidektomie a vliv novějších antiepileptik (levetiracetam, lacosamid, topiramat, lamotriginu) a antidepresiv (mirtazapin, venlafaxinu a trazodonem) na kostní metabolismus u zdravých samců potkanů kmene wistar. Prvním cílem bylo zjistit vliv orchidektomie na metabolismus kostí u potkanů. Zjistili jsme, že orchidektomie měla negativní vliv na kostní metabolismus u potkanů. Tyto výsledky potvrzují, že tato zvířata jako vhodné modely pro zkoumání androgenní modulace složení těla. Druhým cílem bylo zjistit vliv vybraných antiepileptik (levetiracetamu, lacosamid,...
|
|
|
Hodnocení biologicky aktivních látek pomocí HPLC IV.
Seidlová, Martina ; Pilařová, Pavla (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Diplomová práce: Hodnocení biologicky aktivních látek pomocí HPLC IV. Vypracoval(a): Martina Seidlová Školitel(ka): PharmDr.Pavla Pilařová, Ph.D. V této diplomové práci byla prováděna studie retenčního chování léčiv v extrémních podmínkách pro kolonu schopnou měřit pH v rozmezí 1-12 na koloně Kinetex EVO C18 (150 x 3 mm). Pro vyšší pH se studovala tyto léčiva: kvetiapin a jeho dva metabolity - norkvetiapin a 7-hydroxykvetiapin, bromhexin, kodein, zolpidem a jeho nečistota, fluoxetin a aciklovir. Nejlepších výsledků dosahoval kvetiapin s jeho metabolity, proto byly vybrány pro další testování a možnost separace z plazmy. Jako mobilní fáze byl použit octanový pufr o pH 10 v poměru 70:30 k organické fázi, která byla tvořena acetonitrilem a methanolem (55:5). Pro nízké pH byla studována tyto léčiva: kyselina salicylová, kyselina acetylsalicylová, aciklovir, bromhexin a fluoxetin. Nejlepších výsledků dosahovala kyselina salicylová a acetylsalicylová, proto byly použity pro další testování a možnost separace v léčivém přípravku. Jako mobilní fáze byl použit fosfátový pufr o pH 2,2 s acetonitrilem v poměru 80:20. Průtok byl nastaven na 1,0 ml/min, teplota na koloně byla 25řC. Detekce probíhala...
|
|
|
Vývoj postupu extrakce pro izolaci pravastatinu a jeho metabolitu z biologického materiálu pomocí SPE
Rabatinová, Martina ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Martina Rabatinová Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název rigorózní práce: Vývoj postupu extrakce pro izolaci pravastatinu a jeho metabolitu z biologického materiálu pomocí SPE Statiny jsou skupinou léčiv používaných ke snižování hladin cholesterolu. Jde o inhibitory 3-hydroxy-3-metylglutaryl-koenzym A reduktázy. Tato práce se zabývá vývojem metody pro kvalitativní a kvantitativní analýzu pravastatinu a pravastatinu laktonu v potkaní moči. Metoda byla využita pro farmakokinetickou studii. Extrakce z biologického materiálu byla provedena na SPE kolonce Discovery DSC-18. Promývací i eluční činidla byla složena z vhodných poměrů acetonitrilu a 10 mM pufru octanu amonného, pH 4,5. Množství extrakčních kroků bylo optimalizováno tak, aby došlo k eliminaci většiny matricových nečistot. Jako separační a detekční technika byla využita ultravysokoúčinná kapalinová chro- matografie ve spojení s hmotnostně spektrometrickým detektorem typu trojitého kva- drupólu. Separace byla provedena na koloně BEH C18 2, 1 × 100 mm s částicemi o ve- likosti 1, 7 µm. Jako mobilní fáze byla vybrána směs acetonitrilu a 0, 5 mM roztoku octanu amonného o pH 4,0. Analýza probíhala při podmínkách gradientové eluce...
|
|
|
Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení endogenních a exogenních látek pro transportní a metabolické studie
Hroch, Miloš ; Nobilis, Milan (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent) ; Šišpera, Luděk (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát Ing. Miloš Hroch Konzultant Doc. PharmDr. Milan Nobilis, CSc. Název rigorózní práce Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení endogenních a exogenních látek pro transportní a metabolické studie Předkládaná disertační práce se zabývá vývojem a validací chromatografických metod v bioanalýze léčiv a jejich metabolitů. Práce přináší v teoretické části seznámení se základy problematiky bioanalýzy s využitím kapalinové chromatografie. Zvláštní zřetel je kladen na novější trendy, zejména v oblasti stacionárních fází. V praktické části je čtenář podrobněji seznámen s vývojem a validací několika bioanalytických metod s využitím vysokoúčinné kapalinové chromatografie. První metoda se týká stanovení 5 fluorouracilu a jeho metabolitů. Využito je separace na koloně Luna PFP(2) s gradientovou elucí a UV/VIS detekcí. Diskutována jsou zejména specifika stanovení těchto velmi polárních špatně detekovatelných látek. Vyvinutá a validovaná metoda je používána pro TDM onkologických pacientů léčených s karcinomem rekta. Další diskutovaná metoda se zabývá stanovením polyglutamátů metotrexátu v erytrocytech s využitím isokratické eluce na hybridní koloně Gemini C18 a fluorescenční detekcí po...
|
host ::
RSS.