|
|
Analytické hodnocení léčiv kapalinovou chromatografií VI
Rosecký, Jan ; Sochor, Jaroslav (vedoucí práce) ; Mokrý, Milan (oponent)
Analytické hodnocení léčiv kapalinovou chromatografií VI Diplomová práce Jan Rosecký Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv, Heyrovského 1203, Hradec Králové Cílem této diplomové práce je optimalizace postupu stanovení kyseliny 6-aminokapronové, tj. hydrolytického rozkladného produktu akcelerantu transdermální penetrace transkarbamu 12, pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) a následná validace vypracované metody. Před HPLC analýzou byla kyselina 6-aminokapronová derivatizována 3,5-dinitrobenzoylchloridem. Analýza derivatizované kyseliny byla prováděna na koloně Separon SGX C-18 (150 x 3mm I.D, 5µm). Pro separaci byla použita gradientová eluce. Mobilní fáze obsahovala směs acetonitrilu a octanového pufru o pH 4,5 a průtoková rychlost byla 1 ml/min. Na kolonu bylo nastříknuto 20 µl vzorku a detekce byla prováděna při vlnové délce 230 nm. Pro kvantitativní hodnocení derivatizované kyseliny byla použita metoda vnitřního standardu a jako nejvhodnější byla zvolena kyselina 7-aminoheptanová. V rámci validace metody byly hodnoceny tyto parametry - přesnost, správnost, linearita, selektivita, robustnost a detekční a kvantitativní limit. Bylo prokázáno, že metoda je přesná, správná, lineární (hodnota korelačního...
|
|
|
HPLC analýza léčiv III
Blažková, Petra ; Sochor, Jaroslav (vedoucí práce) ; Mokrý, Milan (oponent)
ANALYTICKÉ HODNOCENÍ ÚČINNÝCH LÁTEK KAPALINOVOU CHROMATOGRAFIÍ II. Diplomová práce Petra Blažková Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv, Heyrovského 1203, Hradec Králové Tato diplomová práce se zabývá problematikou analytického hodnocení účinných látek kapalinovou chromatografií. Konkrétně je zaměřena na hodnocení fenobarbitalu v biologickém materiálu za užití mikroextrakce tuhou fází (SPME) a vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC). Detekce probíhá při vlnové délce 218 nm. Chromatografické podmínky jsou stanoveny na reverzní fázi C18. Mobilní fázi představuje směs methanolu a fosfátového pufru v poměru 50:50 a její průtok je 0,4 ml/min, na kolonu je dávkováno 20 µl. Rozpouštědlo fenobarbitalu sestává z 80 dílů methanolu a 20 dílů pufru. Při stanovování podmínek SPME ve vodném roztoku léčiva je zvoleno vlákno carbowax/TPR, extrakce probíhá po dobu 20 minut, desorbováno je do methanolu. Pro izolaci léčiva z králičí plazmy je užito vlákno PDMS/DVB, extrakce je realizována za výše zvolených podmínek. Pro kvantitativní hodnocení fenobarbitalu v králičí plazmě je vypracována kalibrační křivka.
|
|
|
Analytické hodnocení účinných látek kapalinovou chromatografií III.
Doskočilová, Marie ; Sochor, Jaroslav (vedoucí práce) ; Mokrý, Milan (oponent)
ANALYTICKÉ HODNOCENÍ ÚČINNÝCH LÁTEK KAPALINOVOU CHROMATOGRAFIÍ III. Diplomová práce Marie Doskočilová Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv, Heyrovského 1203, Hradec Králové V této diplomové práci byly vypracovány vhodné podmínky pro analytické hodnocení vzorku oxazepamu v králičí krvi vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií. Pro úpravu biologického materiálu byla použita mikroextrakce tuhou fází. Analýza probíhala na koloně C18. Mobilní fázi tvořila směs methanolu a vody v poměru 80:20. Byl užit UV detektor v oblasti vlnové délky 230 nm. Kvantitativní vyhodnocení proběhlo metodou vnitřního standardu, kterým byl diazepam. Oxazepam byl izolován z biologického materiálu metodou SPME. Sorpce probíhala na vlákno PDMS/DVB, desorpce do methanolu. Doba sorpce i desorpce trvala 13 minut. Účinnost extrakce byla 5, 9%. Pro kvantitativní hodnocení byla vypracována kalibrační křivka, která byla následně ověřena modelovými vzorky.
|
|
|
HPLC analýza léčiv a potenciálních léčiv v biologickém materiálu
Luňáková, Veronika ; Kovaříková, Petra (vedoucí práce) ; Mokrý, Milan (oponent)
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) je v současnosti jednou z nejprogresivnějších separačních metod umožňující současně kvantitativní i kvalitativní analýzu. Významnou oblastí užití HPLC je stanovení léčiv a jejich metabolitů v biologickém materiálu. Tato práce byla zaměřena na vývoj chromatografických podmínek vhodných pro HPLC analýzu dvou nových potenciálních léčiv odvozených od aroylhydrazonu, HNAF-INH a 4,6DAR-INH, v biologickém materiálu a jejich následnou aplikaci při hodnocení stability těchto látek v plasmě. Analyzované chelátory byly připraveny obměnou struktury salicylaldehyd isonikotinoyl hydrazonu (SIH) s cílem zlepšit stabilitu látky v plasmě. Jako vhodná stacionární fáze byla vybrána HPLC kolona LiChroCART® HPLC - cartridge LiChrospher® 100 RP - 18e (15μm) s předkolonou LiChroCART® 4-4 Purospher® RP - 18 (5μm). Mobilní fází byla v případě HNAF-INH směs: fosfátový pufr (0,01 mol/l vodný roztok NaH2PO4 · 2 H2O s 2 mmol/l EDTA, pH 3): methanol, 42:58 (v/v). Teplota na koloně byla 25 ◦C, průtok 1,0 ml/min a UV detekce 288 nm, jako vnitřní standard byl použit SIH. Mobilní fáze pro hodnocení 4,6DAR-INH: fosfátový pufr (0,01 mol/l vodný roztok NaH2PO4 · 2 H2O) s 2 mmol/l EDTA, pH 6), směs (methanol - acetonitril, 1:1), 50:50 (v/v). Teplota na koloně 25 ◦C, průtok 1,0 ml/min, UV...
|
|
| |
|
|
Validace HPLC hodnocení amlodipinu a atorvastatinu v kombinovaném léčivém přípravku
Kašková, Jana ; Mokrý, Milan (vedoucí práce) ; Pilařová, Pavla (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát: Mgr. Jana Kašková Konzultant: RNDr. Milan Mokrý, CSc. Název rigorózní práce: Validace HPLC hodnocení amlodipinu a atorvastatinu v kombinovaném léčivém přípravku Předmětem této rigorózní práce je validace chromatografické metody. Validovanou metodou je simultánní analýza účinných látek amlodipin-besylát a atorvastatin v komerčně vyráběných tabletách pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Stacionární fází byla zvolena kolona 125x4 mm I. D. s náplní Nucleosil 120-5 C 18, Macherey-Nagel, mobilní fází směs o složení acetonitril - roztok dodekahydrátu hydrogenfosforečnanu sodného (0,025 mol/l) v poměru 55 : 45, okyselená kyselinou fosforečnou na pH 4,4 a protékající rychlostí 1,0 ml/min, při teplotě 25řC propylparabenem jako vnitřním standardem. Detekce UV-VIS detektorem byla prováděna při vlnové délce 210 nm. Z validačních parametrů byla posuzována linearita, přesnost, správnost, robustnost a selektivita. Linearita byla potvrzena analýzou vzorků standardů v rozsahu 50 - 150 % očekávané koncentrace léčivých látek. Pro ověření přesnosti bylo připraveno šest vzorků o stejném složení a z výsledků analýzy vypočítána relativní směrodatná odchylka, která se pohybovala v rozmezí 0,04...
|
|
|
Analytické hodnocení léčiv s využitím chromatografických metod VI.
Boudová, Kristýna ; Mokrý, Milan (vedoucí práce) ; Kastner, Petr (oponent)
SOUHRN Analytické hodnocení léčiv s využitím chromatografických metod VI. Diplomová práce Kristýna Boudová Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Byla vypracována metoda pro simultánní stanovení vitamínů B1 (thiamin), B3 (nikotinamid), B6 (pyridoxin) a vitamínu C (kys. askorbová) pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie v multivitamínových tabletách a dále použita pro stanovení těchto vitamínů v multivitamínovém šumivém přípravku, používaném jako potravinový doplněk. Získané výsledky byly porovnány s hodnotami deklarovanými výrobcem. Nejlepších výsledků bylo dosaženo použitím chromatografické kolony s náplní Lichrosphere 100 RP C18, 250 mm x 4 mm I.D. (5 µm) firmy Merck, Německo s mobilní fází methanol : voda (pH 2,8 upraveno 10% CH3COOH) + 0,005 mol/l sodné soli kyseliny hexansulfonové + 0,1% triethylaminu) v poměru 20:80 (v/v). K detekci byl použit spektrofotometrický detektor s vlnovou délkou 270 nm. Průtoková rychlost byla 1 ml/min, čas analýzy nepřesahoval 13 minut. Látky byly eluovány v pořadí kys. askorbová, nikotinamid, pyridoxin, thiamin. Metoda bude následně validována.
|
|
| |
|
|
Development and validation of an HPLC method for determination of 3-aminopropanol and stability study of pharmaceutical preparation
Dittrichová, Kateřina ; Mokrý, Milan (vedoucí práce) ; Kastner, Petr (oponent)
Souhrn Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Studentka: Mgr. Kateřina Dittrichová Školitel: RNDr. Milan Mokrý, CSc. Konzultant: Ing. Lubomír Galla Název rigorózní práce: Vývoj a validace HPLC metody pro stanovení 3-aminopropanolu a stabilitní studie farmaceutického přípravku Byla navržena a vyvinuta nová metoda pro stanovení 3-aminopropanolu pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie spojené s fluorescenčním detektorem. Metoda je založená na derivatizační reakci 3-aminopropnaolu s fluorescaminem v prostředí dekahydrátu tetraboritanu sodného a následné tvorby fluorescenčního derivátu. Pro separaci byla použita kolona s reverzní fází C18 (Discovery C18, 150 mm × 4,6 mm, 5 µm). Fluorescenční detektor pracoval při dvou vlnových délkách: EM 483 nm a EX 390 nm. Stanovení bylo provedeno izokratickou elucí mobilní fázi složenou z acetonitrilu a octanu amonného v poměru 26:74 (v/v), rychlostí 1,00 ml.min-1 a při teplotě 30řC. Objem nástřiku byl 10 µl. V rámci testu způsobilosti byly hodnoceny tři parametry: retenční čas, účinnost metody a symetrie píku. Metoda byla poté plně validována. Výtěžnosti 3- aminopropanolu se nacházely v intervalu od 99,00 do 101,00 %. Metoda byla vykazovala dostatečnou přesnost: relativní směrodatná odchylka...
|
|
|
Analytické hodnocení léčiv s využitím chromatografických metod I
Hladík, Michal ; Mokrý, Milan (vedoucí práce) ; Kastner, Petr (oponent)
SOUHRN Analytické hodnocení léčiv s využitím chromatografických metod I. (Nalezení podmínek pro současné stanovení klotrimazolu a benzylalkoholu) Diplomová práce Michal Hladík Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv V diplomové práci byly vypracovány optimální chromatografické podmínky pro současnou HPLC analýzu klotrimazolu a benzylalkoholu v topickém léčivém přípravku (2% krém). Nejlepších výsledků bylo dosaženo s chromatografickou kolonou o rozměrech 150×4 mm I.D. s náplní Separon SGX CN, 7 μm, (Tessek, Praha, Česká Republika). Jako mobilní fáze byla vybrána směs acetonitril : pufr (K2HPO4 0,05 mol/l, pH=6,7 upraveno pomocí 10 % H3PO4) v poměru 60:40 při průtokové rychlosti 0,8 ml/min. K detekci byl použit UV detektor s nastavenou vlnovou délkou 268 nm. Metoda byla validována z hlediska linearity a robustnosti Validace metody bude dokončena v rámci rigorózní práce..
|
host ::
RSS.