|
|
Vývoj metody pro stanovení entekaviru v biologických materiálech s využitím UHPLC MS/MS
Gottvald, Tomáš ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát: Tomáš Gottvald Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj metody pro stanovení entekaviru v biologických materiálech s využitím UHPLC-MS/MS Entekavir je syntetický analog guanosinového nukleosidu, který hraje významnou roli v léčbě virové infekce chronické hepatitidy B. Tato práce byla zaměřena na vývoj vysoce citlivé metody pro stanovení koncentrace entekaviru v biologickém materiálu (potkaní moči) pomocí ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostní spektrometrií. Při analýze byl použit stabilní izotopicky značený vnitřní standard, entekavir C2 13 N15 . Vzhledem ke struktuře analyzované molekuly bylo vhodné k analýze využít hydrofilní interakční chromatografii (HILIC). Jedním z hlavních úkolů bylo potvrdit tento fakt porovnáním s běžně používanou chromatografií na reverzních fázích (RP-UHPLC) na koloně Acquity BEH C18. Mobilní fáze pro reverzní chromatografii byla optimalizována na složení: acetonitril/0,01% kyselina mravenčí v poměru 4 : 96. HILIC separace byla provedena na koloně Acquity BEH Amide za použití izokratické eluce a složení mobilní fáze acetonitril/5 mM octan amonný pH 4,0 (75 : 25). Ve výsledku HILIC poskytovala lepší výsledky, pokud...
|
|
|
Využití separačních metod v klinickém výzkumu
Plíšek, Jiří ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent) ; Friedecký, David (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Jiří Plíšek Školitel: prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Školitel specialista: doc. RNDr. Dagmar Solichová, Ph.D. Název disertační práce: Využití separačních metod v klinickém výzkumu Disertační práce se zabývá vývojem a validací nových LC metod pro stanovení biologicky aktivních látek, zejména liposolubilních vitaminů (vitamin A, E, D) a jejich metabolitů. Vitaminy patří mezi nezbytné esenciální mikronutrienty, které lidský organismus není schopen syntetizovat s výjimkou steroidního hormonálního prekurzoru vitaminu D. V organismu vitaminy zasahují do řady biochemických reakcí buď přímo, nebo jako koenzymy. Zájem o klinické monitorování těchto látek se v posledních letech dostává stále více do popředí. Z důvodu velmi nízkých sérových koncentrací metabolitů vitaminu D (25-hydroxy vitaminu D3 a 25-hydroxy vitaminu D2) je třeba pro stanovení využít moderních instrumentálních technik, mezi které patří i spojení ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní detekcí. V případě sledovaní hladin vitaminů A (retinol) a E (α-tokoferol) v mateřském mléce a vitaminu E (α-tokoferol) v erytrocytárních membránách je vhodné využití klasické kapalinové chromatografie s detekcí diodového...
|
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení vybraných aktivních látek v potravních doplňcích
Jägerová, Kateřina ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Kateřina Jägerová Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení vybraných aktivních látek v potravních doplňcích V této práci byla vyvinuta HPLC metoda pro současné stanovení rutinu, troxerutinu, diosminu a hesperidinu. Vypracovaná metoda byla aplikována na stanovení výše uvedených analytů ve farmaceutických přípravcích a potravních doplňcích, Cilkanol (Zentiva), Detralex (Les Laboratoires), Hemodin Prebio Forte (Valosun a. s.), MobiVen Micro (Vulm cz a. s.). Pro analýzu byla použita kolona na Ascentis Express RP - Amide (10 cm x 3,0 mm, 2,7 μm) Supelco Analytical, s využitím mobilní fáze o poměru acetonitril/voda 30/70 s přídavkem kyseliny octové na úpravu pH 3. Analýza látek probíhala při průtoku 1 ml/min, teplotě 50řC a tlaku 18,6 MPa. Byla zvolena vlnová délka 283 nm pro hesperidin a 255 nm pro rutin, troxerutin a diosmin. Pro detekci byl použit DAD detektor. Klíčová slova: HPLC, rutin, troxerutin, diosmin, hesperidin, flavonoidy, potravní doplňky
|
|
|
Development and optimization of chromatographic methods suitable for clinical application
Jenčo, Jaroslav ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Hroboňová, Katarína (oponent) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Jaroslav Jenčo Školiteľ: prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Konzultant: doc. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Názov dizertačnej práce: Vývoj a optimalizácia chromatografických metód vhodných pre klinickú aplikáciu Predkladaná dizertačná práca je rozdelená do niekoľkých častí, kopírujúcich pracoviská, na ktorých som postupne pracoval. Zjednocujúcim prvkom je vývoj a optimalizácia metód na prípravu vzoriek biologicky aktívnych látok a ich následná analýza za pomoci separačných metód. V teoretickej časti sú charakterizované cieľové látky, z biochemického, fyzikálno - chemického a analytického hľadiska. Sú v nej popísané základné charakteristiky extrakčných postupov a prehľad metód používaných na stanovenie popísaných látok v biologickom materiáli. V prvej, hlavnej experimentálnej časti, sa dizertačná práca zaoberá vývojom, optimalizáciou a validáciou analytickej metódy na chromatografickú analýzu vitamínu B1, jeho biologicky aktívnych foriem a aktívnej formy vitamínu B6 v krvi. Je v nej popísaný výber techník úpravy vzoriek, samotná optimalizácia cieľovej metodiky a dôvody jej výberu. V ďalšej časti sa práca zaoberá samotným vývojom chromatografickej metódy a jej aplikáciou na vybrané vzorky...
|
|
|
Vývoj CE-C4D metody pro analýzu sacharidů v medu
Šebestová, Gabriela ; Jáč, Pavel (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Gabriela Šebestová Školitel: PharmDr. Pavel Jáč, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj CE-C4D metody pro analýzu sacharidů v medu Med je běžně využívaná přírodní směs, u které je nutné sledovat kvalitu kvůli možnému nesprávnému zacházení nebo falšování. Tato diplomová práce je zaměřena na vývoj metody kapilární elektroforézy s kapacitně vázanou bezkontaktní vodivostní detekcí (CE-C4D) pro stanovení obsahu sacharidů ve vzorcích medu. Pro optimalizaci separačních podmínek bylo využito plánování experimentů (DoE), které umožňuje nalezení vhodných separačních podmínek na základě multivariantní optimalizace. Během optimalizace byl zkoumán především vliv těchto faktorů: složení elektrolytu, separační napětí a teplota během separace a vnitřní průměr separační kapiláry. Byly optimalizovány dvě metody: jedna s normálním elektroosmotickým tokem (EOF) a druhá za využití obráceného EOF po přídavku CTAB. Pro validaci a analýzu vzorků medu byla využita metoda v režimu normálního EOF. Separace probíhala v křemenné kapiláře o vnitřním průměru 20 m, celkové délce 48,7 cm a efektivní délce 33,8 cm. Teplota byla 27,7 řC a napětí +16,5 kV. Jako optimální byl zvolen základní elektrolyt o koncentraci 35 mM NaOH a 15 mM...
|
|
|
Studium distribuce substituentů v derivátech na bázi hyaluronanu
Sedláček, Jakub ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Zimčík, Petr (oponent) ; Chmelař, Josef (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra analytické chemie Kandidát Ing. Jakub Sedláček Školitel doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název disertační práce Studium distribuce substituentů v derivátech na bázi hyaluronanu Deriváty na bázi hyaluronanu nacházejí uplatnění v řadě medicínských odvětví. Připravované deriváty bývají charakterizovány molární hmotností a stupněm substituce, nicméně tyto parametry neumožňují odlišit deriváty s rozdílnou distribucí substituentů podél řetězce, které mohou vykazovat rozdílné makroskopické vlastnosti. Z toho důvodu jsou potřebné metody, které dokážou distribuci substituentů postihnout. Předkládaná disertační práce pojednává o stanovení distribuce aminoskupiny v deacetylovaném hyaluronanu. Teoretická část začíná popisem hyaluronanu, jeho struktury a jeho derivátů. Následně se zaměřuje na deacetylovaný hyaluronan, na jeho využití, přípravu a charakterizaci, přičemž hlavní zájem je věnován jeho depolymerizaci na oligosacharidy pomocí deaminačního štěpení nebo pomocí enzymů štěpících hyaluronan. Nakonec jsou uvedeny příklady metod použitých pro analýzu oligosacharidů hyaluronanu pomocí kapalinové chromatografie. Experimentální část popisuje přípravu vzorků deacetylovaného hyaluronanu, stanovení jejich molárních hmotností rozměrově...
|
|
|
Development and optimization of chromatographic methods suitable for clinical application
Jenčo, Jaroslav ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Hroboňová, Katarína (oponent) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Jaroslav Jenčo Školiteľ: prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Konzultant: doc. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Názov dizertačnej práce: Vývoj a optimalizácia chromatografických metód vhodných pre klinickú aplikáciu Predkladaná dizertačná práca je rozdelená do niekoľkých častí, kopírujúcich pracoviská, na ktorých som postupne pracoval. Zjednocujúcim prvkom je vývoj a optimalizácia metód na prípravu vzoriek biologicky aktívnych látok a ich následná analýza za pomoci separačných metód. V teoretickej časti sú charakterizované cieľové látky, z biochemického, fyzikálno - chemického a analytického hľadiska. Sú v nej popísané základné charakteristiky extrakčných postupov a prehľad metód používaných na stanovenie popísaných látok v biologickom materiáli. V prvej, hlavnej experimentálnej časti, sa dizertačná práca zaoberá vývojom, optimalizáciou a validáciou analytickej metódy na chromatografickú analýzu vitamínu B1, jeho biologicky aktívnych foriem a aktívnej formy vitamínu B6 v krvi. Je v nej popísaný výber techník úpravy vzoriek, samotná optimalizácia cieľovej metodiky a dôvody jej výberu. V ďalšej časti sa práca zaoberá samotným vývojom chromatografickej metódy a jej aplikáciou na vybrané vzorky...
|
|
|
Vývoj on-line SPE HPLC metody pro stanovení ochratoxinu A v tokajských vínech
Uhrová, Adéla ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Adéla Uhrová Školitel, konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatinský, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj on-line SPE HPLC metody pro stanovení ochratoxinu A v Tokajských vínech Tato diplomová práce se zabývá optimalizací a validací chromatografické metody stanovení ochratoxinu A v Tokajském vínu s následnou aplikací na reálné vzorky. Byla vyvinuta metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie s fluorescenční detekcí za využití on-line extrakce pomocí přepínání kolon. Vzorky byly o objemu 50μl dávkovány přímo na extrakční kolonu, kde v 1. minutě byl analyt extrahován na předkoloně Ascentis® Express RP-Amide za přítomnosti mobilní fáze - 40% MeOH ve 0,5% vodném roztoku kyseliny octové. Po extrakci došlo k přepnutí ventilu a extrahované látky tak byly separovány na analytické koloně YMC Triart C18 ExRS. Separace probíhala za gradientové eluce s počátečním poměrem acetonitrilu v mobilní fázi 45%, který v 5. minutě dosáhl koncentrace 80%. Detekce fluorimetrem byla optimalizována na excitační a emisní vlnové délky ʎEx 335 nm a ʎEm 463 nm. V poslední části práce byl stanovován ochratoxin A v reálných vzorcích, kde byl ochratoxin A ve 45 případech potvrzen. Klíčová slova: ochratoxin A, Tokajské víno, přepínání kolon
|
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení vybraných fenolických kyselin a flavonoidů v Tokajských vínech
Moravcová, Pavlína ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Lhotská, Ivona (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Pavlína Moravcová Školitel: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení vybraných fenolických kyselin a flavonoidů v Tokajských vínech Cílem této diplomové práce byl vývoj a optimalizace HPLC metody pro současné stanovení celkem 15 fenolických látek, kyseliny protokatechové, fertarové, kávové, p-hydroxybenzoové, syringové, gallové, p-kumarovém, ferulové, chlorogenové, kaftarové, 2-hydroxy-4-methoxybenzoové, polydatinu, resveratralu, katechin hydrátu a epikatechinu v Tokajských vínech. Množství a zastoupení vybraných fenolických sloučenin bylo analyzováno ve 25 vzorcích Tokajských vín, které pocházejí z vinic ze slovenské části Tokajské vinohradnické a vinařské oblasti. Práce se mimo jiné zaměřuje na popis specifických charakteristik této unikátní oblasti, jedinečného způsobu výroby Tokajského vína a jeho chemického složení, konkrétně spektra fenolických látek v něm obsažených. Analýza vybraných fenolických látek byla provedena za pomoci kolony Ascentis® Express F5 (150 x 4,6 mm; 5 µm) s použitím mobilní fáze složené z 0,1% kyseliny fosforečné a acetonitrilu v gradientové eluci. Látky byly analyzovány při teplotě 30 řC a průtoku 1 ml/min a detekovány při...
|
|
|
Optimization of neonicotinoids extraction using nanofibers in sequential injection analysis systém
Zouharová, Monika ; Horstkotte Šrámková, Ivana (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Monika Zouharová Školiteľ: PharmDr. Ivana Horstkotte Šrámková, Ph.D. Názov: Optimalizácia extrakcie neonikotinoidov s využitím nanovlákien v systéme sekvenčnej injekčnej analýzy V diplomovej práci bolo testované použitie rôznych typov nanovlákien ako sorbentov pre extrakciu neonikotinoidov v spojení so systémom sekvenčnej injekčnej analýzy. Pri vypracovaní práce bolo testovaných sedem typov nanovlákien, a to polyamid (PA6), polykaprolaktón (PCL), polyimid (PID) a polydopamínom poťahovaný polyamid (PA6)coated, polykaprolaktón (PCL)coated, polyimid (PID)coated a kombinácia polyimidu a polykaprolaktónu (PID/PCL)coated. Tieto nanovlákna boli vyrobené metódou elektrostatického zvlákňovania. Testované nanovlákna boli umiestnené v držiaku vyrobenom 3D tlačou, ktorý bol zapojený do systému sekvenčnej injekčnej analýzy. Ako detekčná metóda bola použitá UV spektrofotometria. Analyzovanými látkami boli insekticídy zo skupiny neonikotinoidov. Extrakcia týchto látok bola skúmaná na všetkých siedmich typoch nanovlákien. V rámci týchto meraní boli pozorované retencie jednotlivých analytov na nanovláknach v závislosti na ich chemickej štruktúre a fyzikálne-chemických vlastnostiach. Najviac meraní bolo prevedených s...
|
host ::
RSS.