|
|
Mechanisms of phenotypic plasticity induced by genotoxic stress
Přibyl, Miroslav ; Hodný, Zdeněk (vedoucí práce) ; Remešová, Hana (oponent) ; Vomastek, Tomáš (oponent)
Rezistence nádorových buněk vůči léčbě představuje hlavní důvod neúspěšné nádorové terapie. Růst nádorových buněk v primárním místě nádoru nebo jejich šíření a růst v sekundárních oblastech jsou hlavní důvody, proč pacienti nemoci podlehnou. I moderní terapie založené na aktivaci imunitního systému nachází své hranice u mnohých typů nádorů. Rezistence vůči léčbě je zprostředkována nejen nádorovými buňkami, ale i jinými komponenty nádorového mikroprostředí. Porozumění mechanizmům nádorové rezistence zprostředkované nádorovými buňkami, ale i nádorovému mikroprostředí umožní vývoj nových terapeutických přístupů. V této práci představujeme naše nedávné výsledky. Ozařování, 5-azacytidin i IFNγ indukují expresi genu suprabasin (SBSN) a vznik fenotypu nádorových buněk, který je zodpovědný za resistenci vůči terapii a projevuje se nízkou adhezivitou a kmenovými vlastnostmi nádorových buněk. Snížení exprese genu SBSN vedlo k potlačení tohoto fenotypu. Rovněž jsme identifikovali aberantně zvýšenou expresi genu SBSN v kostní dřeni podskupiny pacientů trpících myelodysplastickými syndromy (MDS). Exprese SBSN byla zprostředkována supresorovými buňkami odvozenými z myeloidní řady (MDSCs) a hladina SBSN negativně korelovala se zastoupením T buněk a koncentrací CCL2 v kostní dřeni pacientů. Z toho vychází možný...
|
|
|
Metody sledování buněčných procesů v reálném čase
Švecová, Iva ; Hodný, Zdeněk (vedoucí práce) ; Groušl, Tomáš (oponent)
Cílem této práce je poskytnout přehled metod využívaných ke sledování procesů v živých buňkách v reálném čase se zaměřením na sledování signálních drah. První, neobsáhlejší část práce se zabývá metodami využívajícími fluorescenci, poté se zmíníme také o bioluminiscenčních metodách a metodách nevyžadujících značení. V sekci o fluorescenčních metodách si nejprve představíme typy fluoroforů a příslušné způsoby značení. Následně se podíváme na jednotlivé přístupy. Začneme dvěma způsoby designu biosenzorů, následovat budou tři metody umožňující sledování kinetiky molekul, poté se seznámíme s metodou FLIM využívanou ke sledování prostředí kolem fluoroforu a skončíme s dvěma technikami vylepšujícími rozlišení. U každé techniky si vysvětlíme její princip a uvedeme si příklady využití. Na závěr se podíváme na příklad sledování signální dráhy.
|
|
|
Significance of protein phosphorylation for bacterial cell
Gregorová, Michaela ; Branny, Pavel (vedoucí práce) ; Lišková, Petra (oponent)
Fosforylácia - najčastejšie sa vyskytujúca posttranslačná úprava, plní významnú úlohu v mnohých bunkových procesoch baktérií. Baktérie obsahujú enzýmy, ktoré majú na starosti pripojenie fosfátovej skupiny (kinázy) aj enzýmy s reciprokou aktivitou (fosfatázy). Reverzibilná fosforylácia a defosforylácia proteínov sú základom prenosu signálov z okolia do vnútra bunky. Modifikácia špecifických aminokyselín má za následok zmenu aktivity cieľového proteínu, jeho stability či lokalizácie v rámci bunky, alebo môže ovplyvniť jeho interakciu s ďalším partnerom. Bakteriálne bunky sú vďaka komplexnému systému týchto fosforylačných kaskád, schopné sa veľmi efektívne prispôsobovať meniacim sa podmienkam prostredia.
|
|
|
Mechanisms of phenotypic plasticity induced by genotoxic stress
Přibyl, Miroslav ; Hodný, Zdeněk (vedoucí práce) ; Remešová, Hana (oponent) ; Vomastek, Tomáš (oponent)
Rezistence nádorových buněk vůči léčbě představuje hlavní důvod neúspěšné nádorové terapie. Růst nádorových buněk v primárním místě nádoru nebo jejich šíření a růst v sekundárních oblastech jsou hlavní důvody, proč pacienti nemoci podlehnou. I moderní terapie založené na aktivaci imunitního systému nachází své hranice u mnohých typů nádorů. Rezistence vůči léčbě je zprostředkována nejen nádorovými buňkami, ale i jinými komponenty nádorového mikroprostředí. Porozumění mechanizmům nádorové rezistence zprostředkované nádorovými buňkami, ale i nádorovému mikroprostředí umožní vývoj nových terapeutických přístupů. V této práci představujeme naše nedávné výsledky. Ozařování, 5-azacytidin i IFNγ indukují expresi genu suprabasin (SBSN) a vznik fenotypu nádorových buněk, který je zodpovědný za resistenci vůči terapii a projevuje se nízkou adhezivitou a kmenovými vlastnostmi nádorových buněk. Snížení exprese genu SBSN vedlo k potlačení tohoto fenotypu. Rovněž jsme identifikovali aberantně zvýšenou expresi genu SBSN v kostní dřeni podskupiny pacientů trpících myelodysplastickými syndromy (MDS). Exprese SBSN byla zprostředkována supresorovými buňkami odvozenými z myeloidní řady (MDSCs) a hladina SBSN negativně korelovala se zastoupením T buněk a koncentrací CCL2 v kostní dřeni pacientů. Z toho vychází možný...
|
|
|
Establishment of Babesia laboratory model and its experimental application
JALOVECKÁ, Marie
Growing incidence of infections caused by the tick-transmitted protozoan parasite Babesia spp. defines babesiosis as an emerging disease from the aspect of human and veterinary medicine. The thesis provides an insight to biology of two main agents of human babesiosis, Babesia microti and Babesia divergens. We introduce here the fully optimized quantification model of Babesia parasite enabling the detailed investigation of the parasite developmental cycle and identification of molecules playing a role in its acquisition and transmission by the vector Ixodes ricinus. Novel and detailed information about Babesia dissemination within the tick tissues are given by newly implemented visualization and quantification techniques. Special emphasis is paid to parasite development in the tick salivary glands, the primary site responsible for parasite transmission from the vector into the host. Using gene-specific silencing we screene the tick immune pathways including effector molecules and evaluate their role in Babesia acquisition. We also provide a detailed view to Babesia parasite sexual commitment by monitoring its kinetics upon various stimuli. Moreover, a new direction of anti-babesial therapy is proposed by validation of the Babesia proteasome as a drug target. Overall, the research presented in the thesis extends the current knowledge of the Babesia parasite biology including molecular interactions at the tick-Babesia interface and thereby could significantly contribute to a potential control of babesiosis.
|
|
|
Wnt signální dráha v zubním vývoji
Pasovská, Martina ; Hovořáková, Mária (vedoucí práce) ; Hrubá, Eva (oponent)
Signální dráhy hrají důležitou roli ve vývoji orgánů a tkání v těle, včetně zubů. Signály jsou přenášeny z buňky na buňku a vytvářejí signální kaskády. Na začátku dráhy stojí ligand, který se váže na specifický receptorový protein. Po interakci receptorem dochází k exprimaci transkripčních faktorů a ke genové expresi. Poruchy v těchto drahách se vyznačují vývojovými vadami. Molekulární podstata těchto procesů v rámci zubního vývoje je zkoumána především na myší dentici, neboť zubní vývoj myši a člověka se v základních stádiích neliší. Předložená práce je zaměřená především na Wnt signální dráhu v zubním vývoji a její vztah ostatními drahami během odontogeneze. rámci lidské dentice rozlišujeme dočasný a trvalý chrup, jejichž správný vývoj závisí na expresi a vzájemné interakci signálních molekul. Na zubním vývoji se podílejí signální dráhy Wnt, Notch, TNF, Bmp, FGF, Shh a TGFβ. Jednotlivé dráhy spolu interagují a jejich narušení může mít za následek úplné zastavení zubního vývoje nebo vznik dentálních defektů. Mezi zubní patologie u člověka řadíme zubní ageneze, anomálie ve tvaru a velikosti zubů či poruchy tvorby tvrdých tkání. Tyto poruchy se mohou vyskytovat jako součást syndromatických onemocnění, nebo jako ojedinělé defekty. Při vývoji zubu se Wnt signály objevují již ve stádiu epitelového ztluštění a...
|
|
|
Analogy insulinu s řetězcem A prodlouženým o doménu D proteinů IGF-1 a IGF-2
Povalová, Anna ; Stiborová, Marie (vedoucí práce) ; Dračínská, Helena (oponent)
Insulin a insulinu příbuzné růstové faktory 1 a 2 (IGF-1 a -2) tvoří spolu se svými receptory komplexní systém, který ovlivňuje jak bazální metabolismus sacharidů, lipidů a bílkovin tak i buněčný růst, proliferaci, diferenciaci a apoptózu. Poruchy v působení insulinu a faktorů IGF mohou vést k závažným onemocněním jako je cukrovka či rakovinné bujení. Obě tyto choroby v současnosti představují jedny z největších zdravotních hrozeb pro světovou populaci. Insulin i oba IGF vyvolávají své biologické efekty prostřednictvím vysoce podobných receptorů, kterými jsou dvě isoformy receptoru insulinu (IR-A a IR-B) a receptor pro IGF-1 (IGF-1R). Na tyto receptory se hormony vážou s různými afinitami a vyvolávají rozdílné, ale i částečně se překrývající efekty, ať už metabolické (převážně insulin) nebo růstové (IGF i insulin). Pro pochopení mechanismu působení insulinu a IGF je důležité porozumět, které oblasti ve struktuře hormonů jsou důležité pro vazbu na receptory a pro vyvolání specifických účinků. Jednou z oblastí, kterou se insulin a IGF výrazně liší, jsou D-domény IGF-1 a -2, které zcela chybí v insulinu. Z těchto důvodů jsme se rozhodli připravit analogy insulinu s prodlouženým řetězcem A o D-domény IGF či jejich fragmenty s cílem definovat vliv těchto domén na vazebnou specificitu vůči receptorům...
|
|
|
Vliv klíštěcích slin na žírné buňky na úrovni signálních drah
HEJDOVÁ, Barbora
Intracellular signalling molecules create the signalling cascades which enable the transfer of the signal to the cell. In this work we have studied the influence of tick saliva on the cytokine production and the activation of signalling pathways in ionomycin stimulated murine mast cells. We found out that tick saliva inhibits production of several cytokines and affects two important signalling pathways in mast cells possibly involved in the regulation of cytokine induction.
|
host ::
RSS.