|
|
Evolution of mixed cultures of the pathogenic yeasts Candida albicans and Candida guilliermondii
Hirko, Dominik ; Heidingsfeld, Olga (vedoucí práce) ; Schierová, Michaela (oponent)
Cílem této práce bylo zjistit, jak se mění kokultury kvasinek Candida albicans a Candida guilliermondii v průběhu času, jednak za kontrolních podmínek a též pod vlivem flukonazolu. Tyto druhy jsou oportunní fungální patogeny, které se značně liší ve své citlivosti k nejčastěji používanému antimykotiku - flukonazolu. Po krátkém úvodu do společných rysů studovaných druhů, jejich mechanizmu patogeneze a léčby infekcí, které způsobují, se tato práce věnuje růstovým křivkám obou mikroorganizmů za vybraných podmínek a taktéž procesu umělé evoluce pomocí modelu pasážování kokultur. Poté byly tyto populace C. albicans a C. guillieromondii zkoumány pomocí qPCR a chromogenních médií. qPCR analýza odhalila, že za kontrolních podmínek v kulturách převládá C. albicans (CA). Možným důvodem je 20 % kratší generační doba, jak ukazuje růstová křivka. V přítomnosti flukonazolu bylo možno pozorovat dva trendy. Jeden souvisí s přirozenou rezistencí C. guilliermondii (CG) a vedl k tomu, že CG byla na konci pasážování dominantní. Druhý trend vedl k dominanci CA, přestože tato kvasinka je za normálních okolností k flukonazolu citlivá. Na základě tohoto zjištení byla testovaná minimalní inhibiční koncentrace (MIC50) náhodně vybraných kolonií CA. V experimentu, kde ve 12. pasáži CA převládla, došlo až k 10- násobnému...
|
|
|
Využití core-shell kolon pro stanovení flukonazolu
Brokešová, Kateřina ; Drastík, Martin (vedoucí práce) ; Kubíček, Vladimír (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Kandidát: Kateřina Brokešová Vedoucí práce: Ing. Martin Drastík, Ph.D. Název diplomové práce: Využití core-shell kolon pro stanovení flukonazolu Byla vyvinuta HPLC metoda pro stanovení obsahu flukonazolu uvolněného při disoluci matric tvořených polymery kyseliny mléčné a glykolové, kde docházelo k postupnému uvolňování inkorporovaného flukonazolu v závislosti na složení použitých kopolymerů. Metoda využívá kolonu Ascentis Express RP-Amide, 10 cm x 3,0 mm; 2,7 μm a UV detekce při 260 nm. Byla použita mobilní fáze složená z acetátového pufru o pH 5,0:methanol (80:20), průtoková rychlost byla 0,70 ml/min. Optimální teplota analýzy byla 50 řC. Retenční čas flukonazolu byl 3,3 min a celkový čas analýzy pak 4 min. Klíčová slova: flukonazol, core-shell kolona, HPLC, PLGA
|
|
|
Využití core-shell kolon pro stanovení flukonazolu
Brokešová, Kateřina ; Drastík, Martin (vedoucí práce) ; Kubíček, Vladimír (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Kandidát: Kateřina Brokešová Vedoucí práce: Ing. Martin Drastík, Ph.D. Název diplomové práce: Využití core-shell kolon pro stanovení flukonazolu Byla vyvinuta HPLC metoda pro stanovení obsahu flukonazolu uvolněného při disoluci matric tvořených polymery kyseliny mléčné a glykolové, kde docházelo k postupnému uvolňování inkorporovaného flukonazolu v závislosti na složení použitých kopolymerů. Metoda využívá kolonu Ascentis Express RP-Amide, 10 cm x 3,0 mm; 2,7 μm a UV detekce při 260 nm. Byla použita mobilní fáze složená z acetátového pufru o pH 5,0:methanol (80:20), průtoková rychlost byla 0,70 ml/min. Optimální teplota analýzy byla 50 řC. Retenční čas flukonazolu byl 3,3 min a celkový čas analýzy pak 4 min. Klíčová slova: flukonazol, core-shell kolona, HPLC, PLGA
|
|
|
Studium vzájemných interakcí patogennich kvasinek rodu Candida a bakterie Pseudomonas aeruginosa v průběhu kokultivací
Mynářová, Lenka ; Hodek, Petr (vedoucí práce) ; Papoušková, Klára (oponent)
Oportunisticky patogenní druhy kvasinek rodu Candida jsou častým původcem kvasinkových infekcí člověka. Ačkoli se pozornost dnešní medicíny soustředí spíše na vývoj léku proti rakovině, AIDS nebo Alzheimerově chorobě, není možné opominout ani hrozbu systémových kandidóz. Ty představují velké nebezpečí pro jedince se sníženou imunitou a jsou spojeny s vysokou mortalitou, přičemž terapie je finančně náročná a ne vždy účinná. Bakterie Pseudomonas aeruginosa by mohla být jistou inspirací v boji proti patogenním kvasinkám, protože dokáže inhibovat růst nejrozšířenějšího původce rodu Candida, C. albicans. P. aeruginosa jednak produkuje řadu toxických nízkomolekulárních látek a zároveň ne zcela známým mechanismem interaguje s buněčnou stěnou C. albicans a tak podporuje její lyzi. Nicméně, koexistence těchto mikroorganismů je také možná a jejich vzájemný vztah záleží na různých faktorech. Tato skutečnost byla zjištěna díky tomu, že některé nemoci a patologické stavy se vyznačují koinfekcí pacienta vyvolanou jak původcem P. aeruginosa, tak C. albicans. V této práci jsem studovala mechanismy interakce mezi patogenní kvasinkou C. albicans a bakterií P. aeruginosa pomocí a) sledování genové exprese C. albicans v kokultuře C. albicans + P. aeruginosa b) analýzy filtrovaných médií obou mikroorganismů a jejich...
|
host ::
RSS.