|
|
Hodnocení kvality protilátek určených pro detekci endoglinu v játrech
Kejzlarová, Eliška ; Svobodová, Zuzana (vedoucí práce) ; Tripská, Katarína (oponent)
Diplomová práce se zabývá endoglinem, transmembránovým glykoproteinem, který může být štěpen za vzniku tzv. solubilního endoglinu, jenž poté cirkuluje v krvi. V teoretické části práce jsou nejprve kapitoly věnující se kardiovaskulárním a jaterním onemocněním souvisejícím se změnami v expresi či hladině endoglinu v krvi, následují kapitoly shrnující dosavadní poznatky o tomto proteinu ve vztahu k různým onemocněním. Cílem experimentální části práce bylo vybrat vhodnou protilátku proti endoglinu určenou pro western blot (WB). K dispozici byly celkem čtyři primární protilátky od tří výrobců. Účelem bylo protilátky otestovat a určit, která z nich má nejlepší schopnost detekovat endoglin ve vzorcích myší tkáně, jako jsou játra nebo aorta na WB. Pro ověření jejich schopnosti vázat endoglin a také pro porovnání jejich afinit k tomuto proteinu byl použit affiblot. Nově vyvinuté a patentované zařízení fungujícího na bázi dot blotu. Vazba použitých protilátek na endoglin byla ověřena pomocí metody WB a poté byly výsledky obou metod porovnány. Ze získaných výsledků vyplynulo, že protilátka od Abcam má nejvhodnější parametry, co se týká specifity a citlivosti pro identifikaci endoglinu. Klíčová slova: endoglin, solubilní endoglin, NASH, cirhóza, nealkoholová steatohepatitida, protilátka, affiblot
|
|
|
Imunohistochemická analýza vlivu TRC105 na proces jaterni fibrózy
Hamerníková, Veronika ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Svobodová, Zuzana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Farmacie Autor: Veronika Hamerníková Vedoucí diplomové práce: RNDr. Ivana Němečková, Ph.D. Název práce: Imunohistochemická analýza vlivu TRC105 na proces jaterní fibrózy Diplomová práce se zabývá analýzou exprese biomarkerů jaterní fibrózy jater myší. Cílem práce bylo otestovat účinek léčiva TRC105 (carotuximab) na modelu fibrotizovaných jater po 4 týdenním podávání DDC (3,5-diethoxykarbonyl-1,4-dihydro-2,4,6-kolidin). Byla zkoumána a porovnávána depozice kolagenu a exprese α-SMA, GFAP a endoglinu. Zvířata byla v experimentu rozdělena do 3 skupin: kontrolní skupina (n=6), DDC skupina (n=6) a TRC105 skupina (n=6). Kontrolní skupina byla krmena standardní dietou, DDC a TRC105 skupině byl v dietě podáván 0,1% DDC. Kontrolní a DDC skupině byl aplikován fyziologický roztok, skupině TRC105 bylo aplikováno léčivo. Analýza exprese pak byla prováděna na fixovaných jaterních řezech. Exprese kolagenu byla vyhodnocena barvením Picro-Sirius Red a exprese α-SMA, GFAP a endoglinu metodou imunohistochemie ve fluorescenčním zobrazení. Histologické barvení kolagenních vláken Picro-Sirius Red ukazuje, že DDC dieta vyvolává rozvoj jaterní fibrózy. Větší intenzita zabarvení v porovnání s...
|
|
|
Reoferetické a aferetické postupy pro odstranění cholesterolu a jejich dopad na imunitní systém
Svrčková, Ellen ; Andrýs, Ctirad (vedoucí práce) ; Krejsek, Jan (oponent)
LDL-aferéza a hemoreoferéza patří mezi nejužívanější extrakorporální eliminační metody umožňující snižování hladin LDL cholesterolu u familierní hypercholesterolémie (FH). V případě selhání konzervativní terapie (farmakoterapie a režimová opatření) se pak stávají jedním z mála účinných a dostupných řešení klinického stavu s vysokou morbiditou i mortalitou. Vlastní intervence je nejčastěji sledována pomocí změn hladin složek plazmatických lipidů. V komplexním procesu aterogeneze ale nezastupitelnou roli hraje i imunitní systém se svými působky a předpokládá se, že parametry imunitního systému mohou přímo odrážet stav a progresi aterosklerózy u pacientů postižených FH. Cílem této práce bylo hodnocení hladin vybraných imunologických markerů (glykoprotein α-2- makroglobulin, IL-10, solubilní endoglin , solubilní apoptotický faktor sAPO-1/Fas a solubilní forma adhezivní molekuly P-selektinu) a jejich změny po LDL- aferéze a hemoreoferéze pomocí enzymoimunoanalýzy a imunonefelometrie. Zkoumaný soubor pacientů (celkem 12) zahrnoval 3 léčené hemoreoferézou 9 léčených LDL-aferézou. V hladinách solubilního endoglinu, sAPO-1/Fas a α-2-makroglobulinu byl zaznamenán významný pokles po provendení obou procedur. Pozorované změny mohou být zdrojem informace nejenom o účinnosti intervence ale také o případném...
|
|
|
Hodnocení exprese a koexprese endoglinu a VCAM-1 v aortě apoE-deficientních myší
Minaříková, Lucie ; Rathouská, Jana (vedoucí práce) ; Fikrová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Hodnocení exprese a koexprese endoglinu a VCAM-1 v aortě apoE-deficientních myší Diplomová práce Lucie Minaříková Vedoucí práce: Mgr. Jana Rathouská Cíl práce: Záměrem této práce bylo sledovat expresi a koexpresi endoglinu (TGF-β receptoru III) a molekuly VCAM-1 v endotelu myší aorty. Jako experimentální model jsme použili myší kmen C57BL/6J, který byl geneticky upraven a vyznačoval se deficitem apolipoproteinu E. Metody: Při studii jsme se zaměřili na testování myšího kmene C57BL/6J s knockoutovaným genem pro apolipoprotein E v různých fázích aterosklerotického procesu. Deset týdnů staré myší samice byly rozděleny do tří skupin a krmeny dietami s různým obsahem cholesterolu. Jedna experimentální skupina byla krmena standardní dietou pro hlodavce (tzv. "chow type diet") po dobu dvou měsíců. Zbylé dvě skupiny byly krmeny dietou s obsahem 21 % tuku (tzv. "Western type diet") po dobu dvou a čtyř měsíců. Pro zjištění hladin celkového cholesterolu byla provedena biochemická analýza krve. Získané vzorky vzestupné části aorty byly analyzovány imunohistochemickou metodou ImmPRESSTM s detekčním činidlem DAB. Sledovanými markery byly endoglin (ENG) a VCAM-1. Výsledky: Biochemická analýza prokázala hodnoty...
|
|
|
Sledování exprese a koexprese endoglinu a P-selectinu v aortě apoE-deficientních myší
Brlicová, Monika ; Rathouská, Jana (vedoucí práce) ; Kovařík, Miroslav (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutickfakultav HradciKrlov Katedrabiologickcha lkaskchvd Sledovn exprese a koexprese endoglinu a P-selektinu v aortapoE-deficientnch my Diplomovprce MonikaBrlicov Vedoucprce:Mgr.JanaRathousk Clprce: Sledovali jsme expresi a vzjemnou koexpresi endoglinu (receptoru III pro TGF- cytokin) a P-selektinu (adhezn molekuly a markeru endoteliln dysfunkce) v ascendentnch aortch apoE-deficientnch my krmench standardn dietou pro hlodavce a dietou zpadnho typu (vysokotukovou dietou) pro dosaen rznch fz aterosklerotickho, procesu. Rovn byly hodnoceny zmny celkovch hladin cholesterolu u mypopodnoboutypdiet. Metody: Pro tuto diplomovou prci byl pouit modifikovan kmen C57BL/6J my s deficitem apolipoproteinu E, kter je nchyln k aterogenezi. Myibylyrozdlenydo t skupin. Prvn skupina byla krmena standardn dietou (tzv. "chow" dieta) po dobu dvoumsca daldvskupinyzpadnmtypemdiety (tzv. "Western type" dieta) po dobu dvou a ty msc.U vech skupin byly biochemicky stanoveny a nslednjsme statisticky hodnotili hladiny celkovho cholesterolu v krvi. Imunohistochemick metodynmumonilydetekovat expresi a ppadnoukoexpresi endoglinu a...
|
|
|
Endoglin and livers
Jozefčeková, Nikola ; Doleželová, Eva (vedoucí práce) ; Prašnická, Alena (oponent)
Autorka: Nikola Jozefčeková Názov práce: Endoglin a pečeň Forma: Diplomová práca Názov školy: Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Študijný obor: Farmácia Táto diplomová práca zhrňuje dostupné informácie o endogline, jeho izoformách v pečeni a jeho vplyve na pečeň behom rôznych patologických stavov. V prvej časti je popísaná morfológia a fyziológia pečene, jej štruktúra, histológia a metabolické funkcie. Druhá časť sa venuje izoformám endoglinu, úlohe v TGF- β1 signalizačnom komplexe, expresii endoglinu a jej regulácii. V tretej časti sú opísané ochorenia pečene, pri ktorých sú pozorované zmeny expresie endoglinu a priblíženie endoglinu ako diagnostického a prognostického markera. Endoglin (CD105, TGF-β receptor III) je homodimérny transmembránový glykoproteín a membránový koreceptor TGF-β s vysokou expresiou v endotelových bunkách. Má zásadnú úlohu pri vývoji vaskulárneho systému. Jeho účasť je pozorovaná v procese angiogenézy, vaskulárnej homeostázy a TGF-β signalizácii. Ovplyvňuje a moduluje aktivitu TGF-βRII, ALK1 a ALK5 receptorov. Endoglin interakciou s TGF- β komplexom, moduláciou aktivity ALK receptorov a Smad signalizačných proteínov, kontroluje fibrotické a antifibrotické zmeny v orgánoch. Endoglin je exprimovaný v pečeňových hviezdicových bunkách a aktivovaných...
|
|
|
Morfologická charakteristika změn v plicích u myšího modelu aterosklerózy.
Vyskočilová, Martina ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Blažíčková, Kateřina (oponent)
Bakalářská práce Morfologická charakteristika změn v plicích u myšího modelu aterosklerózy Autor: Martina Vyskočilová Studijní obor: Zdravotní laborant Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci králové Cíl práce: Ateroskleróza je multifaktoriální onemocnění způsobené ukládáním krevních lipidů do vrstvy intimy krevních cév. Díky tomu, že se při procesu aterogeneze uplatňují imunitní pochody, je onemocnění považováno za zánětlivý děj. Vzácně se aterosklerotické pláty tvoří v pulmonálních arteriích, přičemž je tento stav mnohdy doprovázen zvýšeným tlakem v plicích, který samotné onemocnění s velkou pravděpodobností vyvolává. Cílem této práce je zjistit, zda v plicích ApoE/LDLr-/- myšího modelu aterosklerózy dojde k morfologickým změnám, charakteristickým pro plicní aterosklerózu, oproti plícím zdravých myší. Metody: Plíce ApoE/LDLr-/- myší i zdravých C57BL/6J myší z kontrolní skupiny byly fixovány v 4% neutrálním formaldehydu, zality do parafínu a na mikrotomu nakrájeny na řezy o tloušťce 4 μm. Jeden z řezů byl obarven hematoxylinem-eosinem, druhý zeleným trichromem. Barvení hematoxylinem-eosinem je základní barvení používané k orientačnímu znázornění histologické stavby určité tkáně, barvení zeleným trichromem je používáno k pozorování potencionálních změn kolagenního vaziva. Výsledky: Po...
|
|
|
Sledování exprese a koexprese endoglinu a P-selectinu v aortě apoE-deficientních myší
Brlicová, Monika ; Rathouská, Jana (vedoucí práce) ; Kovařík, Miroslav (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutickfakultav HradciKrlov Katedrabiologickcha lkaskchvd Sledovn exprese a koexprese endoglinu a P-selektinu v aortapoE-deficientnch my Diplomovprce MonikaBrlicov Vedoucprce:Mgr.JanaRathousk Clprce: Sledovali jsme expresi a vzjemnou koexpresi endoglinu (receptoru III pro TGF- cytokin) a P-selektinu (adhezn molekuly a markeru endoteliln dysfunkce) v ascendentnch aortch apoE-deficientnch my krmench standardn dietou pro hlodavce a dietou zpadnho typu (vysokotukovou dietou) pro dosaen rznch fz aterosklerotickho, procesu. Rovn byly hodnoceny zmny celkovch hladin cholesterolu u mypopodnoboutypdiet. Metody: Pro tuto diplomovou prci byl pouit modifikovan kmen C57BL/6J my s deficitem apolipoproteinu E, kter je nchyln k aterogenezi. Myibylyrozdlenydo t skupin. Prvn skupina byla krmena standardn dietou (tzv. "chow" dieta) po dobu dvoumsca daldvskupinyzpadnmtypemdiety (tzv. "Western type" dieta) po dobu dvou a ty msc.U vech skupin byly biochemicky stanoveny a nslednjsme statisticky hodnotili hladiny celkovho cholesterolu v krvi. Imunohistochemick metodynmumonilydetekovat expresi a ppadnoukoexpresi endoglinu a...
|
|
|
Hodnocení exprese a koexprese endoglinu a VCAM-1 v aortě apoE-deficientních myší
Minaříková, Lucie ; Rathouská, Jana (vedoucí práce) ; Fikrová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Hodnocení exprese a koexprese endoglinu a VCAM-1 v aortě apoE-deficientních myší Diplomová práce Lucie Minaříková Vedoucí práce: Mgr. Jana Rathouská Cíl práce: Záměrem této práce bylo sledovat expresi a koexpresi endoglinu (TGF-β receptoru III) a molekuly VCAM-1 v endotelu myší aorty. Jako experimentální model jsme použili myší kmen C57BL/6J, který byl geneticky upraven a vyznačoval se deficitem apolipoproteinu E. Metody: Při studii jsme se zaměřili na testování myšího kmene C57BL/6J s knockoutovaným genem pro apolipoprotein E v různých fázích aterosklerotického procesu. Deset týdnů staré myší samice byly rozděleny do tří skupin a krmeny dietami s různým obsahem cholesterolu. Jedna experimentální skupina byla krmena standardní dietou pro hlodavce (tzv. "chow type diet") po dobu dvou měsíců. Zbylé dvě skupiny byly krmeny dietou s obsahem 21 % tuku (tzv. "Western type diet") po dobu dvou a čtyř měsíců. Pro zjištění hladin celkového cholesterolu byla provedena biochemická analýza krve. Získané vzorky vzestupné části aorty byly analyzovány imunohistochemickou metodou ImmPRESSTM s detekčním činidlem DAB. Sledovanými markery byly endoglin (ENG) a VCAM-1. Výsledky: Biochemická analýza prokázala hodnoty...
|
|
|
Reoferetické a aferetické postupy pro odstranění cholesterolu a jejich dopad na imunitní systém
Svrčková, Ellen ; Andrýs, Ctirad (vedoucí práce) ; Krejsek, Jan (oponent)
LDL-aferéza a hemoreoferéza patří mezi nejužívanější extrakorporální eliminační metody umožňující snižování hladin LDL cholesterolu u familierní hypercholesterolémie (FH). V případě selhání konzervativní terapie (farmakoterapie a režimová opatření) se pak stávají jedním z mála účinných a dostupných řešení klinického stavu s vysokou morbiditou i mortalitou. Vlastní intervence je nejčastěji sledována pomocí změn hladin složek plazmatických lipidů. V komplexním procesu aterogeneze ale nezastupitelnou roli hraje i imunitní systém se svými působky a předpokládá se, že parametry imunitního systému mohou přímo odrážet stav a progresi aterosklerózy u pacientů postižených FH. Cílem této práce bylo hodnocení hladin vybraných imunologických markerů (glykoprotein α-2- makroglobulin, IL-10, solubilní endoglin , solubilní apoptotický faktor sAPO-1/Fas a solubilní forma adhezivní molekuly P-selektinu) a jejich změny po LDL- aferéze a hemoreoferéze pomocí enzymoimunoanalýzy a imunonefelometrie. Zkoumaný soubor pacientů (celkem 12) zahrnoval 3 léčené hemoreoferézou 9 léčených LDL-aferézou. V hladinách solubilního endoglinu, sAPO-1/Fas a α-2-makroglobulinu byl zaznamenán významný pokles po provendení obou procedur. Pozorované změny mohou být zdrojem informace nejenom o účinnosti intervence ale také o případném...
|
host ::
RSS.