|
|
Cirkadiánní hodiny a detoxikační procesy v játrech
Ludvíková, Tereza ; Pačesová, Dominika (vedoucí práce) ; Kolář, David (oponent)
Cirkadiánní systém ovlivňuje téměř veškeré fyziologické procesy v těle savců. Mimo jiné i detoxikační procesy v játrech jsou pod cirkadiánní kontrolou. Jak centrální, tak periferní hodiny v játrech regulují expresi genů podílejících se na detoxikaci xenobiotických látek a léčiv. První část práce shrnuje hlavní charakteristiky centrálních a periferních cirkadiánních hodin, včetně jejich molekulární podstaty. Ve druhé části je pozornost soustředěna na hlavní funkce jaterní tkáně se zaměřením na detoxikační procesy. Třetí část je zaměřena na cirkadiánní rytmy v expresi a aktivitě enzymů zvaných cytochromy P450, které jsou nejdůležitějším systémem katalyzujícím fázi I detoxikace, dále se také krátce zaměřuje na vliv cirkadiánního systému na expresi jaderných receptorů a transkripčních faktorů PAR bZIP, které jsou zapojené do regulace transkripce cytochromů P450. Poslední část popisuje vliv cirkadiánního systému na účinnost a toxicitu vybraných léčiv, na metabolismus paracetamolu s hlavním účelem popsat, jak je časem podání ovlivněna paracetamolem indukovaná hepatotixicita. Klíčová slova: cirkadiánní systém, játra, detoxikace, cytochrom, paracetamol
|
|
|
Mechanismus vzniku nádorových procesů a jejich ovlivnění ellipticinem
Parisová, Martina ; Stiborová, Marie (vedoucí práce) ; Moserová, Michaela (oponent)
Ellipticin (5,11-dimethyl-6H-pyrido[4,3-b]karbazol) představuje silné protinádorové agens, vykazující vícenásobný mechanismus působení. V této bakalářské práci jsou popsány příčiny vzniku nádorových procesů a informují o mechanismech hlavních farmakologických a cytotoxických účinků ellipticinu spolu s výsledky naší laboratoře ukazující nový mechanismus působení ellipticinu. Cytotoxické a mutagenní působení ellipticinu je přisuzováno především jeho dvěma mechanismům, interkalaci ellipticinu do dvoušroubovicové struktury DNA a jeho působení jako inhibitoru topoisomerasy II. Ellipticin take vytváří kovalentní adukty s DNA, po jeho oxidaci cytochromy P450 a peroxidasami. Cytochromy P450 oxidují ellipticin na pět různých metabolitů, z nichž 13-hydroxyellipticin, 12-hydroxyellipticin a N(2)-oxid ellipticinu vedou ke vzniku dvou majoritních aduktů s DNA. V případě peroxidas je ellipticin oxidován na radikál, poskytující dimer ellipticinu a také na N(2)-oxid ellipticinu. Z důvodu vysoké účinnosti ellipticinu a jeho derivátů proti různým typům nádorových onemocnění stoupá zájem o toto protinádorové léčivo a jsou stále zkoumány nové směry vývoje a přípravy cíleně směřovaných léčiv na bázi ellipticinu.
|
|
|
Rozmanitost a funkce solubilních elektrontransportních proteinů
Alexová, Eliška ; Hrdý, Ivan (vedoucí práce) ; Mach, Jan (oponent)
Elektrontransportní proteiny slouží k přenosu elektronů mezi různými solubilními i membránově vázanými enzymy a proteiny v biologických procesech, jako jsou respirace, fotosyntéza a různé typy energetického metabolismu. Elektrontransportní proteiny se vyskytují ve všech živých organismech. Aktivní místo elektrontransportních proteinů obsahuje buď ionty kovů, jako jsou železo a měď, thiolovou nebo flavinovou skupinu. Toto aktivní místo používají k přenosu elektronů. S přenosem elektronů se pojí redoxní potenciál, což je relativní tendence páru molekul přijímat nebo uvolňovat elektrony. Čím zápornější mají molekuly hodnotu redoxního potenciálu, tím mají větší schopnost uvolňovat elektrony. Mezi elektrontransportními proteiny s nejnižším redoxním potenciálem patří ferredoxiny s železo- sirným klastrem a cytochromy s hemovou skupinou. Naopak nejvyšší redoxní potenciál mají cupredoxiny s měďnatým centrem. Klíčová slova: cytochrom, flavodoxin, cupredoxin, ferredoxin, thioredoxin, glutaredoxin, rubredoxin
|
|
|
Mechanismus vzniku nádorových procesů a jejich ovlivnění ellipticinem
Parisová, Martina ; Stiborová, Marie (vedoucí práce) ; Moserová, Michaela (oponent)
Ellipticin (5,11-dimethyl-6H-pyrido[4,3-b]karbazol) představuje silné protinádorové agens, vykazující vícenásobný mechanismus působení. V této bakalářské práci jsou popsány příčiny vzniku nádorových procesů a informují o mechanismech hlavních farmakologických a cytotoxických účinků ellipticinu spolu s výsledky naší laboratoře ukazující nový mechanismus působení ellipticinu. Cytotoxické a mutagenní působení ellipticinu je přisuzováno především jeho dvěma mechanismům, interkalaci ellipticinu do dvoušroubovicové struktury DNA a jeho působení jako inhibitoru topoisomerasy II. Ellipticin take vytváří kovalentní adukty s DNA, po jeho oxidaci cytochromy P450 a peroxidasami. Cytochromy P450 oxidují ellipticin na pět různých metabolitů, z nichž 13-hydroxyellipticin, 12-hydroxyellipticin a N(2)-oxid ellipticinu vedou ke vzniku dvou majoritních aduktů s DNA. V případě peroxidas je ellipticin oxidován na radikál, poskytující dimer ellipticinu a také na N(2)-oxid ellipticinu. Z důvodu vysoké účinnosti ellipticinu a jeho derivátů proti různým typům nádorových onemocnění stoupá zájem o toto protinádorové léčivo a jsou stále zkoumány nové směry vývoje a přípravy cíleně směřovaných léčiv na bázi ellipticinu.
|
|
|
Nové alternativní krystalizační techniky používané pro zlepšení morfologie a difrakční kvality proteinových krystalů
TOMČOVÁ, Ivana
Röntgénová strukúrna analyza predstavuje v dnesnej dobe jeden z najúcinnejsích nástrojov urcenych k rieseniu struktúry a funkcie proteínov. V predkladanej práci je popísaná detailná atómová struktúra bakteriálneho dvojdoménového cytochrómu c4 po prvykrát izolovaného z anaerobného organizmu a atómové struktúry dvoch rôznych krystálovych foriem {\clqq}sladkého`` proteínu {--} thaumatínu izolovaného z Africkej kroviny. Na príklade cytochrómu je ukázané, ako bola pouzitá biochemická analyza spolu s röntgénovou struktúrnou analyzou pri hladaní funkcie tohto proteínu. Popri modernych vysoko-vykonnych metódach krystalizácie proteínov sa v poslednych rokoch coraz viac kladie dôraz na stúdium ich fyzikálno-chemickych vlastností a vyskum molekulovych interakcií. Nasim cielom bolo vylepsit proces hladania podmienok pre rast proteínovych krystálov s pouzitím novych alternatívnych krystalizacnych metod. V tejto práci sú prezentované dva nové prístupy proteínovej krystalizácie. Prvym je nová metóda krystalizácie spocívajúca v pridávaní aditív do okolitych kvapiek, ktoré môzu vplyvom pomalého vyparovania ovlyvnit pH, ci tlak pary nad proteínovou kvapkou bez toho, aby boli v kvapke samotnej prítomné. Druhy prístup spocíva v precíznom kontrolovaní teploty pocas krystalizacného procesu a udrziavania proteínového roztoku v metastabilnom stave. Pri tomto experimente je mozné manipulovat s rastom jednotlivych krystálov a tiet ovplyvnovat nukleáciu novych krystalizacnych jadier. Oba prístupy boli testované na modelovych i nami studovanych proteínoch (cytochróm, xylanáza a thaumatín), vysledkom coho boli získané kvalitnejsie, stabilnejsie a lepsie difraktujúce krystáli. Na záver práce sú prezentované vysledky krystalizácie dalsích troch enzymov, dvoch haloalkán dehalogenáz izolovanych z dvoch rozdielnych baktérií a jedného membránového proteínu {--} hydrogenázy izolovanej z anaerobného organizmu. Tieto vysledky budú dalej pouzité k röntgénovej struktúrnej analyze.
|
host ::
RSS.