|
|
Detekce proteinu Hsp70 v rostlinách vystavených různým stresovým faktorům.
Lengálová, Alžběta ; Hýsková, Veronika (vedoucí práce) ; Liberda, Jiří (oponent)
! Rostliny musí neustále čelit působení mnoha různých stresových faktorů. Jako sesilní organismy nemohou rostliny nepříznivým podmínkám uniknout a musely si proto vyvinout specifické obranné mechanismy. Většina studií se zabývá reakcí rostlin na jeden typ stresu, v přírodě se ale rostlina musí vyrovnávát s mnoha stresovými faktory najednou. V této práci byl sledován vliv abiotického stresu v podobě teplotního šoku na rozvoj infekce vyvolané Y virem bramboru (PVY) v rostlinách tabáku (Nicotiana tabacum L.). Teplotní šok je jednoznačně spojen se syntézou proteinu Hsp70, který má ve stresových podmínkách mnoho důležitých funkcí, které zmírňují důsledky působení stresu (podílí se například na opětovném sbalování nebo degradaci poškozených proteinů a syntéze proteinů de novo). Působení proteinu Hsp70 v průběhu virové infekce však není zcela objasněno, některé studie dokazují jejich účast při multiplikaci a šíření virových částic v rostlině. V prvním pokusu provedém v rámci této práce byl imunochemickou detekcí zjištěn vyšší obsah viru PVYNTN v rostlinách tabáku, které byly po infikování vystaveny teplotnímu šoku, než v rostlinách pouze infikovaných. Obsah viru odpovídal množství proteinu Hsp70 detekovaného imunochemicky pomocí specifické protilátky. Odpověď rostliny na kombinaci teplotního šoku s...
|
|
| |
|
|
Vliv biotického stresu na metabolismus dusíkatých látek v rostlinách tabáku
Fiala, Martin ; Ryšlavá, Helena (vedoucí práce) ; Müller, Karel (oponent)
V tomto projektu byl studován vliv virové infekce na metabolismus dusíkatých látek v rostlinách tabáku (Nicotiana tabacum L., cv. Petit Havana SR1). Skupina rostlin tabáku byla infikována Y virem bramboru, kmenem NTN. Přítomnost viru byla potvrzena metodou ELISA. Pro studium byla vybrána skupina enzymů, které jsou v C4 rostlinách součástí Hatchova-Slackova cyklu (fosfoenolpyruvátkarboxylasa (EC 4.1.1.31, PEPC), NADP- malátdehydrogenasa (oxalacetát dekarboxylační) (EC 1.1.1.40, NADP-ME), pyruvát, fosfátdikinasa (EC 2.7.9.1, PPDK). V C3 rostlinách tyto enzymy souvisejí s odpovědí rostliny na stresové podmínky. V důsledku virové infekce došlo ke zvýšení aktivity těchto enzymů. Infekce PVYNTN způsobila snížení aktivity nitrátreduktasy (EC 1.7.1.1, NR), enzymu fixace dusíkatých látek redukujícího dusičnany na dusitany. Dále byly v této práci sledovány enzymy katalyzující syntézu glutamátu a glutaminu z amonných iontů: glutaminsynthetasa (EC 6.3.2.1, GS) a glutamátsynthasa (EC 1.4.1.14, GOGAT). U obou těchto enzymů došlo ke zvýšení jejich aktivity vlivem virové infekce. Mimo tuto hlavní cestu fixace dusíku může ještě rostlina využívat enzym glutamátdehydrogenasu (EC 1.4.1.2, GDH). Enzym katalyzuje také opačnou reakci, deaminaci glutamátu. Směr reakce záleží především na podmínkách prostředí. Také u...
|
|
|
Vliv sacharosy v kultivačním mediu na aktivitu fosfoenolpyruvátkarboxylasy v rostlinách tabáku
Fiala, Martin ; Ryšlavá, Helena (vedoucí práce) ; Hoffmeisterová, Hana (oponent)
In Czech - Abstrakt Rostliny jsou za fyziologických podmínek autotrofní organismy, které využívají energii slunečního záření k fixaci CO2 pro syntézu sacharidů. Přítomnost sacharosy v kultivačním médiu může ovlivnit metabolismus celé rostliny. Cílem této práce bylo zjistit, zda přítomnost sacharosy ovlivní aktivitu fosfoenolpyruvátkarboxylasy (EC 4.1.1.31, PEPC) a nitrátreduktasy (EC 1.7.1.1., NR). PEPC je v C4 a CAM rostlinách fotosyntetickým enzymem, v C3 rostlinách plní řadu funkcí, dodává intermediáty citrátového cyklu a spojuje tak metabolismus sacharidů a aminokyselin. Aktivita PEPC v rostlinách pěstovaných se sacharosou byla o 70 % vyšší než v rostlinách pěstovaných bez sacharosy. Stupeň fosforylace PEPC byl studován stanovením aktivity PEPC po působení alkalické fosfatasy, aktivaci D- glukosa-6-fosfátem a inhibici L-malátem. Aktivita PEPC se po působení alkalické fosfatasy snížila. Pokles byl pro rostliny pěstované se sacharosou i bez sacharosy velmi podobný. Aktivace PEPC D-glukosa-6-fosfátem a inhibice PEPC L-malátem byla srovnatelná v rostlinách pěstovaných se sacharosou i bez sacharosy. Nitrátreduktasa je klíčovým enzymem fixace dusíku. Aktivita NR byla v rostlinách pěstovaných se sacharosou o 90 % vyšší než v rostlinách pěstovaných bez sacharosy. V rostlinách pěstovaných se sacharosou bylo o 52...
|
|
|
Vliv sucha na metabolismus rostlin tabáku
Miedzińska, Lucia ; Ryšlavá, Helena (vedoucí práce) ; Vaňková, Radomíra (oponent)
VVlliivv ssuucchhaa nnaa mmeettaabboolliissmmuuss rroossttlliinn ttaabbáákkuu (Nicotiana tabacum L.) Diplomová práce - abstrakt Lucia Miedzińska, Bc. Vedoucí diplomové práce: Doc. RNDr. Helena Ryšlavá, CSc. Konzultant: RNDr. Veronika Doubnerová, PhD. Sucho patří mezi jednu z nejčastějších forem rostlinného stresu, neboť k němu dochází nejen při nedostatku vody, ale i sníženou schopností přijímat vodu kořeny v zasolených půdách či za chladu. V této diplomové práci bylo zjišťováno, zda rostliny tabáku (Nicotiana tabacum L., cv. W38) reagují na sucho změnou aktivity enzymů: NADP dependentní malátdehydrogenasy dekarboxylační (EC 1.1.1.40; NADP-ME), fosfoenolpyruvátkarboxylasy (EC 4.1.1.31; PEPC) a pyruvát, fosfátdikinasy (EC 2.7.9.1; PPDK). Aktivity sledovaných enzymů v listech tabáku byly v průběhu 11 dnů stresu významně zvýšeny; aktivita PEPC dvojnásobně, PPDK až 3,3-krát a NADP-ME dokonce až čtyřnásobně oproti rostlinám kontrolním. V průběhu stresu byla sledována regulace aktivity NADP-ME a PEPC na úrovni transkripce - metodou "real-time" PCR a translace - imunochemicky. Exprese proteinu NADP-ME a transkripce mRNA pro chloroplastovou isoformu byly zvýšeny, mRNA pro cytosolovou isoformu nebyla významně ovlivněna. Exprese proteinu PEPC byla zvýšena jen velmi málo, transkripce mRNA pro PEPC byla mírně snížena....
|
host ::
RSS.