|
|
Studium vlivu složení mobilní fáze na selektivitu a retenci analytů na HILIC stacionárních fázích
Štětková, Kateřina ; Kočová Vlčková, Hana (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Kateřina Štětková Školitel: RNDr. Hana Vlčková, Ph. D. Název diplomové práce: Studium vlivu složení mobilní fáze na selektivitu a retenci analytů na HILIC stacionárních fázích Tato diplomová práce se zabývá vlivem koncentrace ACN, pH a koncentrace pufru v mobilní fázi na retenci a selektivitu kolon Atlantis HILIC Silica (3 μm, 2,1 mm x 100 mm) a Luna NH2 (3 μm, 2,0 mm x 100 mm). Ke studii bylo vybráno celkem 35 analytů, které zahrnují látky neutrální, bazické a kyselé. Detekce byla provedena pomocí PDA detektoru při vlnové délce 245 nm. Všechna měření probíhala za podmínek izokratické eluce při průtoku 0,4 ml.min-1 s využitím směsi acetonitril/voda (pufr) jako mobilní fáze. Teplota na koloně byla nastavena na 30 řC, teplota autosampleru na 4 řC a použitý nastřikovaný objem byl 2 μl. Pro vyhodnocení výsledků byly z naměřených hodnot sestrojeny grafy a tabulky, které sloužily k hodnocení kolon z hlediska selektivity a retence jednotlivých skupin analytů. Kolona Atlantis HILIC Silica vykazovala chování typické pro HILIC chromatografii, tj. retence stoupala se zvyšující se koncentrací ACN v mobilní fázi a to především od >85% ACN. Kolona Luna NH2 kromě HILIC chování navíc vykazovala silnou retenci...
|
|
|
Porovnání selektivity a retence analytů na dvou HILIC stacionárních fázích
Hodovská, Nikola ; Vlčková, Hana (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Nikola Klvanová Školitel: RNDr. Hana Vlčková, Ph.D. Název diplomové práce: Porovnání selektivity a retence na dvou HILIC stacionárních fázích Diplomová práce se zabývá vlivem koncentrace acetonitrilu, pH a koncentrace pufru v mobilní fázi na retenci a selektivitu dvou analytických kolon Luna HILIC (diol) (3 m, 100 x 3,0 mm) a Ascentis ES Cyano (3 m, 100 x 2,1 mm). Pro studii bylo vybráno celkem 28 analytů ze zástupců kyselých, neutrálních a bazických látek. Detekce byla provedena pomocí PDA detektoru při vlnové délce 245 nm. Jako mobilní fáze byla použita směs acetonitrilu a vodné složky (pufr nebo kyselina octová) za izokratické eluce s průtokem mobilní fáze 0,7 ml/min a 0,3 ml/min. Teplota na koloně byla nastavena na 30řC a teplota v autosampleru na 4řC. Nástřik byl 5 l nebo 3 l. Pro snazší hodnocení byly naměřené hodnoty shrnuty v tabulkách a následně sestrojeny grafy. Vliv procentuálního obsahu acetonitrilu v mobilní fázi byl hodnocen na základě grafické závislosti k'= f (%W), ze které je patrná zvyšující se retence se zvyšujícím se obsahem acetonitrilu v mobilní fázi (typické HILIC chování), především v oblasti od 85%) pro všechny analyty na koloně Luna HILIC (diol). Na koloně Ascentis ES...
|
|
|
Vývoj MEPS metody pro UHPLC-MS/MS stanovení entekaviru v ultrafiltrátu ledvin
Janák, Jaroslav ; Vlčková, Hana (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
1 Abstrakt Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Jaroslav Janák Školitel: RNDr. Hana Vlčková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj MEPS metody pro UHPLC-MS/MS stanovení entekaviru v ultrafiltrátu ledvin Diplomová práce se zabývala vývojem a validací metody úpravy vzorků pro stanovení entekaviru v ultrafiltrátu ledvin, pomocí techniky MEPS, tj. mikroextrakce tuhým sorbentem. K analýze byla využita již dříve vyvinutá UHPLC-MS/MS metoda pro stanovení entekaviru v potkaní moči. Pro jeho stanovení byla využita hydrofilní interakční chromatografie na koloně Acquity BEH Amide za použití izokratické eluce. Složení mobilní fáze acetonitril - 5 mM octan amonný pH 4,0 bylo v poměru 75:25 (v:v). Jako vnitřní standard byl použit entekavir C2 13 N15 . Ionizace analytu byla provedena elektrosprejem v pozitivním módu a jako detektor byl zvolen trojitý kvadrupól. Ke kvantifikaci analytu bylo využito SRM přechodů entekaviru a vnitřního standardu. Na základě optimalizace MEPS metody byl jako nejvhodnější tuhá fáze zvolen porézní grafitický uhlík vhodný pro analýzu polárních látek. Jako eluční činidlo byl zvolen roztok acetonitril a vody v poměru 75:25 (v:v) a jako promývací činidlo čistá voda. Metoda byla validována. Ověřena byla zejména linearita, přesnost,...
|
|
| |
|
|
Analýza statinů v biologickém materiálu
Vlčková, Hana ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent) ; Šimek, Petr (oponent)
4 ABSTRAKT Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Hana Vlčková Školitel: Prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Školitel specialista: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název disertační práce: Analýza statinů v biologickém materiálu Disertační práce se zabývá analýzou statinů v biologickém materiálu. Statiny patří do skupiny léčiv snižující hladinu cholesterolu a jedná se o nejpoužívanější léčiva v léčbě Familiární hypercholesterolémie. Z důvodu velmi nízkých koncentrací statinů (ng/ml) v krevní plazmě je výběr vhodné analytické metody značně omezen. Díky své citlivosti a selektivitě se ukázalo spojení kapalinové chromatografie s hmotnostně spektrometrickou detekcí jako nejvhodnější technika. V případě analýzy složitých matricí, jako jsou biologické vzorky, musí chromatografické separaci vždy předcházet úprava vzorku. Teoretická část disertační práce nejprve shrnuje jednotlivé farmakologické vlastnosti a účinky statinů. Dále je věnována teoretickým poznatkům z oblasti UHPLC a hmotnostní spektrometrie. Nejrozsáhlejší díl teoretické části je věnován popisu jednotlivých technik úpravy vzorků. Praktická část se zabývá nejen vývojem UHPLC-MS/MS metodiky pro stanovení statinů v biologickém materiálu, ale i volbou a vývojem vhodné extrakční techniky....
|
|
|
Extrakce na tuhou fázi a její miniaturizace metodou Lab-On-Valve pro stanovení farmaceuticky významných látek
Jelínková, Iva ; Chocholouš, Petr (vedoucí práce) ; Vlčková, Hana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Iva Jelínková Školitel: PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Název diplomové práce: Extrakce na tuhou fázi a její miniaturizace metodou Lab-On-Valve pro stanovení farmaceuticky významných látek Diplomová práce se zabývá vývojem metody extrakce na tuhou fázi (SPE) s využitím mikroextrakce tuhým sorbentem (MEPS) pro stanovení vitamínů A, D, E a možnostmi automatizace této metody. Stanovení bylo založeno na absorpci vitamínů na mikrokoloně MEPS, rušivé složky byly odstraněny promývacím roztokem (zředěná kyselina octová o pH 3) a byla provedena extrakce elučním roztokem (100% ACN). Detekce proběhla za pomocí UV spektrofotometru při vlnových délkách absorpčních maxim pro vitamín A - 325 nm, pro vitamín D - 265 nm, pro vitamín E - 295 nm. Metoda byla optimalizována. Byl vyvíjen program, kde byly testovány koncentrace jednotlivých vitamínů, dávkovací objemy, průtokové rychlosti a složení rozpouštědel. Po optimalizaci metody byla provedena extrakce a následné stanovení krevní plazmy fortifikované vitamíny A, D, E metodou sekvenční injekční chromatografie (SIC). Výtěžnost metody byla pro vitamín A 156,83 %, pro vitamín D 28,38 %, pro vitamín E 15,79 %. Byla hodnocena opakovatelnost, pro kterou byly použity tři...
|
|
|
Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro stanovení pravastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů
Mikšová, Alena ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Vlčková, Hana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Alena Mikšová Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, PhD. Název diplomové práce: Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro stanovení pravastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů Tato diplomová práce se zabývá vývojem UHPLC-MS/MS metody určené pro stanovení pravastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů. Byly optimalizovány základní parametry pro MS detekci - desolvační teplota, iontová optika (napětí na hexapolu a na extraktoru), průtok dusíku na vstupním kuželu, napětí na kapiláře, průtok dusíku a napětí na vstupním kuželu, které je specifické pro každou látku. K separaci analytů byla použita kolona BEH C18 (2,1 x 100 mm, 1,7µm). Jako detektor byl použit trojitý kvadrupól. Ionizace byla provedena elektrosprejem v negativním i pozitivním modu. Kvantifikace analytů byla provedena pomocí SRM (monitorování vybrané reakce). Prekurzorovým iontem pro všechny stanovované statiny v pozitivním modu byl vybrán iont [M+H]+ , který byl v hmotnostním spektru nejintenzivnější. U pravastatinu laktonu byl dále vybrán amonný adukt [M+NH4]+ . V negativním modu byl u všech stanovovaných statinů vybrán iont [M-H]- . U pravastatinu laktonu a rosuvastatinu laktonu byl rovněž vybrán acetátový adukt [M-H+CH3COO]- . Při zvolených...
|
|
|
Aplikace technologie nových stacionárních fází v HPLC analýze biologicky aktivních látek pro klinické využití - stanovení kyseliny retinové
Vlčková, Hana ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Nováková, Lucie (oponent)
All-trans retinová kyselina (ATRA) a 13-cis retinová kyselina (13-cis RA) jsou přírozeně se vyskytující retinoidy. All-trans retinová kyselina má mnoho rolí v reprodukci, embryogenezi, buněčné diferenciaci, v procesu vidění a imunitní odpovědi a je také používána k terapii akutní promyelocytární leukémie. Tokoferoly jsou hlavními antioxidanty séra. Jak tokoferoly, tak retinoidy jsou studovány jako chemopreventivní a terapeutické látky pro pacienty s rakovinou. V této práci byla vyvinuta jednoduchá a rychlá HPLC metoda pro současné stanovení vitaminů rozpustných v tucích a retinových kyselin (retinol, all-trans retinová kyselina, 13-cis retinová kyselina, gama- a alfa- tokoferol) v lidském séru za použití monolitní technologie. Monolitní kolona Chromolith Performance RP-18e (100 mm × 4.6 mm) pracovala při pokojové teplotě. Mobilní fáze (MF) byla složena ze směsi acetonitril (ACN) : 1% ammonium acetate (AMC) ve vodě (pH = 7). Pro analýzu byl zvolen gradient:MF ACN : AMC 98:2 (0. fáze) při průtoku 2 ml/min, 3 minuty ACN : AMC 95:5 při průtoku 1,5 ml/min a 3 minuty průtok 3,2 ml/min se stejnou mobilní fází. Detekce a identifikace byla provedena pomocí photodiode array detektoru. Retinol, 13-cis- a all-trans retinová kyselina byly monitorovány při 325 nm. Alfa- a gama- tokoferol byly stanoveny při 295...
|
|
| |
|
|
Role porodní asistentky v edukaci žen s gynekologickými pánevními záněty
VLČKOVÁ, Hana
ROLE PORODNÍ ASISTENTKY V EDUKACI ŽEN S GYNEKOLOGICKÝMI PÁNEVNÍMI ZÁNĚTY V dnešní době narůstá počet žen, jež podcenily příznaky gynekologického pánevního zánětu a nyní se potýkají s jeho následky v podobě chronické bolesti či neplodnosti. Z tohoto důvodu bylo zvoleno téma pro bakalářskou práci: "Role porodní asistentky v edukaci žen s gynekologickými pánevními záněty." Teoretická část bakalářské práce se zabývá edukační činností porodní asistentky, základní etiologií pánevních zánětů, léčbou a ošetřovatelským procesem u žen s pánevními záněty. Pro praktickou část bakalářské práce byla zvolena metoda kvantitativního výzkumného šetření formou anonymního dotazníku. Výzkum probíhal od 1. ledna do 31. března 2011 a zúčastnilo se ho 93 respondentek. V práci byly stanoveny a splněny tři cíle. Prvním cílem výzkumu bylo zjistit, zda jsou ženy informované o příznacích, léčbě a následné prevenci pánevních zánětů. Druhým cílem bylo zjištění spokojenosti žen s úrovní edukace porodní asistentkou v oblasti gynekologických pánevních zánětů. Třetím cílem bylo vytvoření edukačního materiálu o gynekologických pánevních zánětech. Dále byly pro výzkum stanoveny 3 hypotézy. Hypotéza č.1.: "Ženy znají příznaky pánevních zánětů a věnují jim patřičnou pozornost, " byla potvrzena. Hypotéza č. 2.: "Ženy mají nedostatek informací o původcích pánevních zánětů, vyvolávající pozánětlivé změny, jako je neplodnost," byla potvrzena. Hypotéza č.3: "Ženy mají dostatek informací o příčinách vzniku gynekologických zánětů, jejich příznacích, léčbě a následné prevenci," nebyla potvrzena. Výsledky výzkumného šetření této práce by mohly být přínosem pro porodní asistentky a jejich edukační činnost. Pro potřeby žen byl vytvořen edukační materiál ve formě letáku.
|
host ::
RSS.