|
|
Využití nových ex vivo testů pro nalezení kapradin s anthelmintickým účinkem
Bednářová, Klára ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Klára Bednářová Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název: Využití nových ex vivo testů pro nalezení kapradin s anthelmintickým účinkem Haemonchus contortus patří mezi celosvětově rozšířené hlístice parazitující v gastrointestinálním traktu malých přežvýkavců. Hlístice způsobují onemocnění zvané hemonchóza. Typickým příznakem onemocnění je anémie vznikající v důsledku sání krve hlísticemi. S onemocněním se také snižuje produktivita a může docházet k úmrtí hostitele. Pro léčbu hemonchózy se využívá pouze několik léčiv, počet nově zavedených léčiv je nízký. V dnešní době je stále větším problémem vznikající rezistence na anthelmintika právě díky vysoké adaptibilitě H. contortus a také nesprávnému užívání syntetických léčiv. Syntetická léčiva znečišťují životní prostředí, i proto je snaha nalézt rostlinné produkty s anthelmintickým účinkem. U některých asijských a afrických kapradin byl prokázán anthelmintický účinek, proto jsme se rozhodli provézt testy na průkaz anthelmintické aktivity u evropských druhů kapradin. U vybraných druhů se testoval anthelmintický účinek proti hlísticím, konkrétně H. contortus s využitím testu líhnutí vajíček a bioluminiscenční analýzy ATP u dospělců. Kapradiny, které...
|
|
|
Vliv vybraných herbicidů na expresi UGT a aktivitu antioxidačních enzymů huseníčku rolního
Rysová, Samanta ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Samanta Rysová Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Konzultant: RNDr. Radka Podlipná, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv vybraných herbicidů na expresi UGT a aktivitu antioxidačních enzymů huseníčku rolního Herbicidy se hojně využívají k regulaci plevelů v zemědělství. Přestože je jejich použití esenciální pro zajištění dostatečné produkce zemědělských plodin, dochází ke snížení jejich účinku kvůli vzniku herbicidní rezistence. Je proto důležité objasnit mechanismy vzniku herbicidní rezistence, aby byly herbicidy používány efektivně a mohly být případně vyvinuty nové látky. Zároveň působí herbicidy na rostlinu jako abiotický stresový faktor a dochází tak k ovlivnění antioxidačního aparátu rostlinných buněk. Hlavním cílem této práce bylo zjistit vliv vybraných herbicidů - tribenuron-methylu (TBM), pinoxadenu (PNX) a sulcotrionu (SLC), na expresi vybraných UGT, které by mohly hrát roli ve vzniku herbicidní rezistence a dále prozkoumat vliv TBM na aktivitu vybraných antioxidačních enzymů - askorbátperoxidasy (APX), katalasy (CAT) a superoxiddismutasy (SOD). Jako modelová rostlina byl použit huseníček rolní (Arabidopsis thaliana), experiment byl prováděn na buněčných suspenzích a hydroponických...
|
|
|
Jednonukleotidové polymorfizmy v patogenezi neoplazií ze zralých B-buněk
Wagnerová, Andrea ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Beránek, Martin (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Andrea Wagnerová Školitel: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D., Mgr. Kateřina Černá Pilátová, Ph.D. Název diplomové práce: Jednonukleotidové polymorfizmy v patogenezi neoplazií ze zralých B-buněk Chronická lymfatická leukémie (CLL - Chronic lymphocytic leukemia) je onemocnění charakterizované klonální proliferací B-lymfocytů. CLL patří mezi nejčastější lymfoproliferativní onemocnění s řadou definovaných rizikových faktorů, nicméně etiopatogeneze zůstává do jisté míry neobjasněna. V posledních 10-15 letech se objevují různé studie, které hovoří především o genetické predispozici k tomuto onemocnění. Působení vnějších faktorů v etiologii CLL prokázáno nebylo. V souvislosti s CLL je také definovaný asymptomatický stav, označovaný jako monoklonální B-lymfocytóza (MBL - Monoclonal B-cell lymphocytosis), často popisovaný jako prekurzorový k CLL. Byla provedena imunofenotypizace lymfocytů průtokovou cytometrií u jedinců v kontrolní skupině (100 osob) a ve skupině CLL/MBL (pacienti s diagnózou CLL nebo MBL, 50 osob). U všech jedinců kontrolní a CLL/MBL skupiny byly vyšetřeny vybrané genetické polymorfizmy (rs17483466, rs735665, rs7176508, rs872071, rs13397985), které byly v jiných studiích asociovány s...
|
|
|
Optimalizace přípravy jaterních sferoidů
Vojtěchová, Tereza ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Tereza Vojtěchová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Martin Ambrož, Ph.D. Název diplomové práce: Optimalizace přípravy jaterních sféroidů V preklinickém hodnocení léčiv hrají nezastupitelnou roli různé jaterní in vitro modely. Jedním z nich jsou multicelulární jaterní sféroidy. Jedná se o 3D buněčné agregáty, které vznikají procesem buněčné agregace. Jsou využívány ve vývoji léčiv a představují slibný nástroj pro identifikaci nových cílů a screening léčiv na různá jaterní onemocnění. Cílem této diplomové práce bylo zavést a optimalizovat přípravu jaterních sféroidů metodou "forced- floating". Pro izolaci hepatocytů a přípravu sféroidů byly použity játra samců a samic potkana kmene Wistar. Při izolaci hepatocytů jsme čelili problémům s jejich nízkou viabilitou, proto jsme se postup izolace snažili optimalizovat. Přesto se nám podařilo získat pouze malé množství hepatocytů s dostatečnou viabilitou k následnému vytvoření sféroidů. Vytvořené sféroidy jsme inkubovali po dobu 7 a 14 dnů s různými lipogenními činidly a sledovali jsme jejich viabilitu pomocí měření produkce adenosintrifosfátu (ATP). Při inkubaci sféroidů s lipogenními substráty po dobu 7 dnů nedošlo k zásadním...
|
|
|
Využití nových ex vivo testů pro nalezení syntetických látek s anthelmintickým účinkem
Mičundová, Magdalena ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Magdalena Mičundová Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Využití nových ex vivo testů pro nalezení syntetických látek s anthelmintickým účinkem Vlasovka slézová (Haemonchus contortus) je parazitická hlístice způsobující nemoc haemonchózu u ovcí a koz. Tento celosvětové rozšířený parazit se živí krví hostitele, čímž způsobuje anémie a edémy, které mohou vést až k úmrtí zvířete. Pro léčbu haemonchózy se používají anthelmintická léčiva, která v poslední době přestávají být účinná v důsledku lékové rezistence hlístic. Proto je nezbytné hledat nová léčiva, která budou účinná i u rezistentních kmenů hlístic. V této práci byl zkoumán anthelmintický účinek 13 nových derivátů benzyloxyamidu (BLK) na vajíčkách a dospělcích H. contortus. Nejprve byl použit test líhnutí vajíček, v němž byla nejúčinnější sloučenina BLK8. Na dospělcích H. contortus byla pro sledování vlivu BLK analogů na viabilitu využita nová metoda bioluminiscenčního stanovení adenosintrifosfátu (ATP). Účinnost BLK analogů byla porovnána s účinkem klasického anthelmintika levamisolu. Z výsledků je zřejmé, že několik BLK analogů (zvláště BLK7, BLK8 a BLK12) signifikantně snižuje viabilitu dospělců H. contortus, a to jak...
|
|
|
Jednonukleotidové polymorfizmy v patogenezi neoplazií ze zralých B-buněk
Wagnerová, Andrea ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Beránek, Martin (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Andrea Wagnerová Školitel: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D., Mgr. Kateřina Černá Pilátová, Ph.D. Název diplomové práce: Jednonukleotidové polymorfizmy v patogenezi neoplazií ze zralých B-buněk Chronická lymfatická leukémie (CLL - Chronic lymphocytic leukemia) je onemocnění charakterizované klonální proliferací B-lymfocytů. CLL patří mezi nejčastější lymfoproliferativní onemocnění s řadou definovaných rizikových faktorů, nicméně etiopatogeneze zůstává do jisté míry neobjasněna. V posledních 10-15 letech se objevují různé studie, které hovoří především o genetické predispozici k tomuto onemocnění. Působení vnějších faktorů v etiologii CLL prokázáno nebylo. V souvislosti s CLL je také definovaný asymptomatický stav, označovaný jako monoklonální B-lymfocytóza (MBL - Monoclonal B-cell lymphocytosis), často popisovaný jako prekurzorový k CLL. Byla provedena imunofenotypizace lymfocytů průtokovou cytometrií u jedinců v kontrolní skupině (100 osob) a ve skupině CLL/MBL (pacienti s diagnózou CLL nebo MBL, 50 osob). U všech jedinců kontrolní a CLL/MBL skupiny byly vyšetřeny vybrané genetické polymorfizmy (rs17483466, rs735665, rs7176508, rs872071, rs13397985), které byly v jiných studiích asociovány s...
|
|
|
Využití nových ex vivo testů pro nalezení kapradin s anthelmintickým účinkem
Bednářová, Klára ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Klára Bednářová Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název: Využití nových ex vivo testů pro nalezení kapradin s anthelmintickým účinkem Haemonchus contortus patří mezi celosvětově rozšířené hlístice parazitující v gastrointestinálním traktu malých přežvýkavců. Hlístice způsobují onemocnění zvané hemonchóza. Typickým příznakem onemocnění je anémie vznikající v důsledku sání krve hlísticemi. S onemocněním se také snižuje produktivita a může docházet k úmrtí hostitele. Pro léčbu hemonchózy se využívá pouze několik léčiv, počet nově zavedených léčiv je nízký. V dnešní době je stále větším problémem vznikající rezistence na anthelmintika právě díky vysoké adaptibilitě H. contortus a také nesprávnému užívání syntetických léčiv. Syntetická léčiva znečišťují životní prostředí, i proto je snaha nalézt rostlinné produkty s anthelmintickým účinkem. U některých asijských a afrických kapradin byl prokázán anthelmintický účinek, proto jsme se rozhodli provézt testy na průkaz anthelmintické aktivity u evropských druhů kapradin. U vybraných druhů se testoval anthelmintický účinek proti hlísticím, konkrétně H. contortus s využitím testu líhnutí vajíček a bioluminiscenční analýzy ATP u dospělců. Kapradiny, které...
|
|
| |
|
|
Vliv vybraných herbicidů na expresi UGT a aktivitu antioxidačních enzymů huseníčku rolního
Rysová, Samanta ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Samanta Rysová Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Konzultant: RNDr. Radka Podlipná, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv vybraných herbicidů na expresi UGT a aktivitu antioxidačních enzymů huseníčku rolního Herbicidy se hojně využívají k regulaci plevelů v zemědělství. Přestože je jejich použití esenciální pro zajištění dostatečné produkce zemědělských plodin, dochází ke snížení jejich účinku kvůli vzniku herbicidní rezistence. Je proto důležité objasnit mechanismy vzniku herbicidní rezistence, aby byly herbicidy používány efektivně a mohly být případně vyvinuty nové látky. Zároveň působí herbicidy na rostlinu jako abiotický stresový faktor a dochází tak k ovlivnění antioxidačního aparátu rostlinných buněk. Hlavním cílem této práce bylo zjistit vliv vybraných herbicidů - tribenuron-methylu (TBM), pinoxadenu (PNX) a sulcotrionu (SLC), na expresi vybraných UGT, které by mohly hrát roli ve vzniku herbicidní rezistence a dále prozkoumat vliv TBM na aktivitu vybraných antioxidačních enzymů - askorbátperoxidasy (APX), katalasy (CAT) a superoxiddismutasy (SOD). Jako modelová rostlina byl použit huseníček rolní (Arabidopsis thaliana), experiment byl prováděn na buněčných suspenzích a hydroponických...
|
|
|
Biological activity of antioxidant compounds in monocytes THP-1
Hájek, Jan ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Univezita Roma Tre Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologie Katedra biochemických věd Kandidát: Jan Hájek Školitel: PharmDr. Iva Boušová, PhD. Prof. Sandra Incerpi, Prof. Jens Z. Pedersen Název diplomové práce: Biologická aktivita antioxidačních látek v monocytech THP-1 Tato práce byla vytvořena na základě pokusů provedených v Laboratoři fyziologie na Univerzitě Roma Tre v Římě pod vedením prof. Sandry Incerpi. Tým laboratoře se zabývá studiem antioxidantů s různou strukturou a hodnocením jejich schopnosti zabránit tvorbě reaktivních forem kyslíku (ROS). Tyto reaktivní sloučeniny jsou nezbytné v mnoha fyziologických pochodech, ale mohou mít také škodlivé účinky a podílet se na rozvoji rozličných onemocnění. V této práci jsem se zabýval studiem antioxidačních vlastností různých polyfenolických látek (mosloflavon, negletein, 5,6-dihydroxyflavon, bajkalein, kyselina galová a sloučenina 1625) v buněčné kultuře lidských monocytů THP-1 a také v in vitro testu. Použil jsem tři různé metody: stanovení intracelulárních ROS (dichlorofluoresceinový test), test cytotoxicity a elektronovou paramagnetickou rezonanční spektroskopii (EPR). Mosloflavon neukázal žádnou vychytávací aktivitu ani v buněčné linii ani během EPR. Naproti tomu negletein měl dobrou vychytávací...
|
host ::
RSS.