|
|
Renální ageneze
Svobodová, Iveta ; Musil, Zdeněk (vedoucí práce) ; Merta, Miroslav (oponent)
Renální ageneze je pom rn asté, geneticky podmín né, onemocn ní. Geny, které vedou k jejímu vzniku, nejsou v ak stále potvrzené. P edm tem této práce bylo provést molekulárn genetickou analýzu dvou kandidátních gen , které mohou vést k renální agenezi u lov ka, gen kódujících tyrozinkinázový receptor RET a neurotrofický faktor GDNF. Byla provedena muta ní analýza 20 exon genu RET a 3 exon genu GDNF v souboru 20 pacient s diagnostikovanou unilaterální renální agenezí. Zji ovány byly také numericné zm ny obou gen . Cílem práce pak bylo identifikovat p ípadné mutace gen RET a GDNF a tím p isp t k jejich asociaci se vznikem ageneze ledvin. V souboru pacient nebyla nalezena ádná popsaná patogenní mutace, detekovány byly pouze t i popsané jednobodové polymorfizmy v genu RET. Polymorfizmus rs1800860 (GCG-GCA, Ala-Ala 432) se nachází v 7. exonu a byl nalezen u 11 pacient z celkových 20, z toho ve dvou p ípadech v homozygotním stavu. Polymorfizmus rs1800861 (CTT- CTG, Leu-Leu 769) je lokalizován v exonu 13 a byl identifikován u 6 z 20 pacient , z toho jeden pacient byl homozygotem pro minoritní alelu G. Polymorfizmus rs1800863 (TCC- TCG; Ser-Ser) v 15. exonu byl nalezen u 5 pacient , a to v dy v heterozygotní konstituci. Ve v ech p ípadech se jedná o asté polymorfizmy s frekvencí minoritní alely v populaci...
|
|
|
Příprava rekombinantní cDNA některých lékových transportérů
Svobodová, Iveta ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Červený, Lukáš (oponent)
SOUHRN Amplifikovali jsme CDS pro transportér ABCC4, ABCC5. Pro amplifikaci ABCC5 jsme navrhli dva systémy, pouze první systém jsme zaklonovávali. Optimální teplota annealingu byla 64 řC a optimální koncentrace hořčíku byla 2mM. Jako klonovací kit se nám osvědčil až TOPO XL. Do vektoru jsme zaklonovali CDS pro ABCC4, ABCC5. Inzerty jsme štěpili pomocí restrikčních endonukleáz. ABCC4 jsme vyštěpili Spe I a Not I. ABCC5 jsme štěpili pomocí EcoR I a Hind III. Stejnými endonukleázami jsme štěpili i pZeoSV2(-). Poté jsme inzerty zaklonovali do pZeoSV2(-).
|
|
|
Vliv daunorubicinu na expresi markerů nitračního stresu u králičího modelu antracyklínové toxicity
Svobodová, Iveta ; Štaud, František (oponent) ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce)
Cilem teto rigorozni prace bylo detekovat změny endotelialni exprese nitrotyrosinu ve stěně aortalniho oblouku kraliků, kterym bylo podavano antracyklinove cytostatikum daunorubicin. Sledovali jsme připadne změny exprese nitrotyrosinu po různych davkovych intervalech podavani daunorubicinu. Chronicka antracyklinova kardiotoxicita byla navozena opakovanym podanim daunorubicinu (3 mg/kg=50 mg/m2 i.v., 1x tydně) po dobu 10 tydnů. Pro sledovani časoveho morfologickych, změn aorty v průběhu rozvoje toxickeho učinku antracyklinů bylo utvořeno 10 daunorubicinovych skupin (n=6), ktere reprezentovaly zviřata exponovana různe kumulativni davce DAU. Zviřata byla ukončovana za 24 hodin nebo za 7 dnů po dane kumulativni davce cytostatika. Vysledky byly porovnany s hodnotami naměřenymi u kontrolnich zviřat (n=6), kterym nebyla aplikovana žadna latka. Imunohistochemicka analyza neprokazala indukci endotelialni exprese markeru nitračniho stresu nitrotyrosinu ani u kontrolni a ani u žadne z daunorubicinovych skupin. Lze tedy konstatovat, že daunorubicin zřejmě neindukuje morfologicky detekovatelnou endotelialni dysfunkci v aortalnim oblouku kralika u modelu antracyklinove cardiotoxicity a ukazuje na větši obrannou schopnost endotelialnich buněk ve srovnani s kardiomyocyty. 6
|
|
| |
|
| |
|
| |
host ::
RSS.