|
|
Molekulární mechanismy zabíjení buněk nádoru slinivky břišní
Ezrová, Zuzana ; Neužil, Jiří (vedoucí práce) ; Hyršlová Vaculová, Alena (oponent)
Jedním z nejobtížněji léčitelných typů nádorů je rakovina slinivky břišní, k jejíž léčbě jsou dosud užívané klasické terapie zcela nedostatečné. Přesto zatím nebyl zaznamenán žádný významný pokrok v zavedení nových terapeutických přístupů, a tak toto onemocnění zůstává jednou z nejčastějších příčin úmrtí na rakovinu. V současné době mnohé vědecké práce odkazují na potenciální využití metforminu, látky ze skupiny biguanidů nejčastěji užívané k léčbě diabetu druhého typu. Metformin snižuje dle retrospektivních studií riziko výskytu rakoviny pankreatu u diabetiků, a to pravděpodobně interakcí s komplexem I dýchacího řetězce. Laboratorní výzkumy ovšem evidují protinádorové účinky této látky až na hranici fyziologických koncentrací, jež jsou u pacientů jen velmi obtížně dosažitelné. Vzhledem k narůstajícímu množství důkazů nepostradatelnosti funkčních mitochondrií v iniciaci i rozvoji maligních novotvarů jsme proto ve spolupráci s dalšími výzkumnými institucemi modifikovali metformin tak, aby byla posílena jeho akumulace v mitochondriích. Očekávali jsme, že mitochondriálně cílený metformin, norMitoMet, se bude vyznačovat výrazně zvýšenou účinností v porovnání s mateřskou látkou. Tato práce je zaměřena na objasnění mechanismu působení obou látek na pankreatické rakovinné buňky in vitro za využití...
|
|
|
Katabolická dráha hemu v patogenezi jaterních onemocnění.
Váňová, Kateřina ; Muchová, Lucie (vedoucí práce) ; Brůha, Radan (oponent) ; Neužil, Jiří (oponent)
This thesis focuses on the role of heme catabolic pathway in the pathogenesis of selected liver diseases. The aim was to clarify if the modulation of heme oxygenase (Hmox) and its catabolic products - especially carbon monoxide (CO) and bilirubin - affected the development and progression of liver diseases, focusing on inflammatory and cholestatic pathways. Firstly, we discovered that the induction of hmox1 prevented hepatocellular damage in endotoxin-induced inflammation. Furthermore, administration of CO in vivo in early-phase of endotoxin-induced cholestasis decreased the inflammatory cytokine production in the liver and simultaneously prevented downregulatory effect of cytokines on hepatocyte transporters resulting in hepatoprotection. For the first time, we characterized in vivo tissue distribution and elimination of inhaled CO in rats. In vitro experiments and the model of extrahepatic cholestasis revealed the significant role of intracellular bilirubin in hepatocellular protection against oxidative damage which accompanies cholestatic disorders. Last but not least, hmox1 induction by heme increased hepatocyte transporters expression and subsequently stimulated bile flow participating in conferring protection against estrogen-induced cholestasis. Presented results demonstrate that the heme...
|
|
|
Mitochondria as a target for anti-cancer therapy by vitamin E analogues.
Kľučková, Katarína ; Neužil, Jiří (vedoucí práce) ; Hyršlová Vaculová, Alena (oponent) ; Pecina, Petr (oponent)
(CZ) Na základě slibných výsledků s protirakovinně působícím analogem vitaminu E bez redoxní aktivity α-tokoferyl sukcinátem (α-TOS) jsme připravili jeho mitochondriálně cílený derivát MitoVES, a to připojením skupiny TPP+ k mateřské látce. Testovali jsme hypotézu, podle které by cílení látky přímo do jejího místa působení, mitochondrií, mělo zvýšit její protirakovinný účinek a vést k efektivnější protirakovinné látce s možností nižších účinných dávek. Prokázali jsme, že MitoVES je vysoce efektivní protirakovinná látka, mnohonásobně účinnější než necílený α-TOS, a to in vitro i in vivo. Protirakovinné působení látky MitoVES je zajištěno jeho interakcí s komlexem II (CII) ve vazebném místě pro ubichinon (Qp), čímž dojde k narušení funkce CII. MitoVES zde způsobí přerušení toku elektronů a následnou zvýšenou produkci reaktivních forem kyslíku (ROS), které poté indukují apoptózu. K té dochází mitochondriální drahou, a to preferenčně zapojením proapoptotického proteinu Bak, který způsobí permeabilizaci vnější mitochondriální membrány. Z našich výsledků dále vyplývá, že pro apototickou funkci látky MitoVES je důležité jeho mitochondriální zacílení na základě vyššího mitochondriálního potenciálu (ΔΨ). Tato vlastnost zajišťuje, že MitoVES je selektivní pro rakovinné buňky, které mají vyšší ΔΨ než buňky...
|
|
|
The study of the influence of vitamin E analogues on malignant mesothelioma
Kovářová, Jaromíra ; Neužil, Jiří (vedoucí práce) ; Kozubík, Alois (oponent) ; Vítek, Libor (oponent)
Souhrn Rakovina je nejčastější příčinou smrti v západním světě a frekvence jejího výskytu stále stoupá. Přestože k dnešní době došlo k výraznému zlepšení v diagnostice a přístupu k léčbě, mnoho typů rakoviny je stále letální díky nedostatečné radikální terapii. Jedním z fatálních neoplastických druhů této choroby je maligní mezoteliom (MM). MM je charakterizován vysokou úmrtností a limitovanými terapeutickými možnostmi. Etiologie tohoto onemocnění je především spojována s inhalací azbestových vláknen. Výskyt MM se zvyšuje v mnoha zemích; proto je velmi důležité hledat nová molekulární zásahová místa, protirakovinné strategie a léčiva, která by výrazně pomohla zkvalitnit terapii. Určitá nová léčiva, především ta, která mají specifické molekulární cíle a vykazují se vysokou selektivitou pro rakovinné buňky, významně zvýšila úspěšnost léčby některých druhů rakoviny. Velmi slibný molekulární cíl pro protirakovinné látky tvoří mitochondrie. V posledních letech se výzkum zaměřil na skupinu protirakovinných sloučenin, zvaných 'mitokany', které indukují apoptózu v rakovinných buňkách mitochondriální destabilizací. Bylo publikováno, že některé mitokany vyvolávají apoptózu selektivně v rakovinných buňkách a inhibují růst mnoha druhů karcinomu v preklinických modelech. Cílem této doktorské práce bylo studium...
|
|
|
Role onkogenu erbB-2 v biologii rakovinných kmenových buněk
Prokopová, Kateřina ; Neužil, Jiří (vedoucí práce) ; Anděra, Ladislav (oponent)
Nedávné výzkumy ukazují na přítomnost minoritní frakce nádorových buněk, která vykazuje určité "kmenové" vlastnosti. Tyto tzv. rakovinné kmenové buňky (RKB) se vyznačují relativně vyšší odolností k léčbě, tradičně zaměřené na diferencované a rychle se dělící buňky a proto mohou být příčinou relapsů nádorových onemocnění. RKB sdílejí specifickou expresi genů a deregulaci signálních drah. Jednou ze známých deregulací je zvýšená exprese receptoru erbB-2 (HER2), vyskytující se u ~25-30% případů rakoviny prsu. Zvýšená exprese erbB-2 receptoru je spojená se špatnou prognózou, zvýšeným proliferačním potenciálem a s rezistencí vůči chemoterapii. Dle nedávných výzkumů se při zvýšení hladiny erbB-2 zvyšuje i procento RKB v populaci nádorových buněk. V této diplomové práci jsme jako model RKB rakoviny prsu in vitro studovali tzv. mammosféry, rostoucí v médiu bez obsahu séra, do něhož jsou buňky postupně převáděny. Tyto buňky jsou CD44+ , vyznačují se zvýšenou expresí ABCG-2, Sox-2, Vimentinu a také vysokými hladinami erbB-2. Dále jsme připravili stabilní linii MCF7 buněk se sníženou hladinou erbB-2 pomocí shRNA plazmidu. V erbB-2- buňkách jsme charakterizovali expresi sady markerů RKB a sledovali schopnost těchto buněk iniciovat tvorbu nádoru v nahé myši pomocí ultrazvuku. Klíčová slova Rakovinné kmenové...
|
|
| |
|
|
TRAIL-induced Apoptosis in Populations of Colon Cancer Cell Lines under Various Cultivation Conditions
Nevařil, Leonard ; Anděra, Ladislav (vedoucí práce) ; Neužil, Jiří (oponent)
Tumor Necrosis Factor-Related Apoptosis Inducing Ligand (TRAIL) is a cytokine of TNF family, which participates in the non-exclusive regulation of survival and proliferation of mainly hematopoietic cells. Shortly after its discovery it also brought significant attention as specific and potent inducer of apoptosis of cancer cells of various origins, and since then it has been investigated as a potential novel anti-tumor therapeutics. Recently, cancer stem cells (CSCs) were suggested to be a distinct subset of tumor cells that could be responsible at least in some tumors for their sustainment, recurrence and drug resistance. These cells in the "hierarchic" model of tumorigenesis thus represent an important and attractive target for efficient tumor therapy. In this study we use several colorectal adenocarcinoma cell lines as an experimental model for the analysis of CSC-prone cultivation conditions on TRAIL-induced apoptosis of these cells. For enrichment of eventual cancer stem cells we cultivated cell lines in a serum-free medium, originally developed for cultivation of neural stem cells, and assessed the expression of putative CSC markers CD133 and ABCG2 by flow cytometry (FACS). Simultaneously, we tested the expression of TRAIL receptors and susceptibility to TRAIL-induced apoptosis in these cells. We...
|
|
| |
|
| |
|
|
Workflow procesu schválení a vystavení faktury v prostředí velké organizace
Smejkal, Milan ; Neužil, Jiří (oponent) ; Videcká, Zdeňka (vedoucí práce)
Posouzení stávajícího stavu oběhu vybrané částí dokladů v prostředí velké organizace, konkrétně vystavení faktury. Analýza se týká především organizací, kde vystavení faktury zajišťuje všeobecná účtárna na základě podkladů z jednotlivých organizačních jednotek. Administrativní pracovník organizační jednotky vytvoří požadavek, vedoucí tento požadavek schválí, pracovnice všeobecné účtárny na základě shváleného požadavku vystaví fakturu nebo požadavek vrátí k dopracování. Popis procesů, zavedení procesu do informačního systému organizace. Cílem analýzy je zefektivnění procesů velké organizace prostřednictvím informačního systému, využití informací a zrychlení oběhu dokladů.
|
host ::
RSS.