|
|
Vztah tkáňového a solubilního endoglinu k endotelové dysfunkci a možnosti jejich ovlivnění.
Blažíčková, Kateřina ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Blaha, Vladimír (oponent) ; Mičuda, Stanislav (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Mgr. Kateřina Blažíčková Školitel: Doc. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Název disertační práce: Vztah tkáňového a solubilního endoglinu k endotelové dysfunkci a možnosti jejich ovlivnění Ateroskleróza je komplexní zánětlivé onemocnění a jako součást kardiovaskulárních chorob je hlavním zdrojem morbidity a mortality na světě. Prvotním dějem v rozvoji aterosklerózy je endotelová dysfunkce, která je charakterizována narušením homeostázy endotelu. Lékem volby v terapii aterosklerózy jsou statiny, které snižují hladinu LDL cholesterolu a příznivě ovlivňují hladiny HDL cholesterolu. Statiny však mají i široké spektrum dalších účinků, které jsou souhrnně označovány jako nelipidové nebo tzv. pleiotropní. Mezi nejdůležitější nelipidové účinky statinů bývá řazena na lipidech nezávislá modulace endotelové funkce a dále antioxidační, antiinflamatorní, antitrombogenní a antiproliferační účinky. Nejpoužívanějším zvířecím modelem pro studium aterosklerózy je myš. Díky dietě s vysokým obsahem lipidů a genetické úpravě jsme schopni pozměnit lipidové spektrum u myší a navodit aterosklerotické změny již v útlém věku. Během procesu aterogeneze dochází v cévách k patologickým změnám na imunologické,...
|
|
|
Časné změny exprese tkáňového endoglinu a VCAM-1 v aortě myší po podávání vysokotukové diety
Swierczková, Iva ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Herink, Josef (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Školitel: doc. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Kandidát: Bc. Iva Swierczková Název diplomové práce: Časné změny exprese tkáňového endoglinu a VCAM-1 v aortě myší po podávání vysokotukové diety. Cíl práce: Cílem práce bylo sledovat změny exprese endoglinu a VCAM-1 v aortě myší po podání standardní a vysokotukové diety pomocí imunohistochemických metod. Následně byly porovnány výsledky kontrolní a experimentální skupiny. Metoda: K experimentu byly použity dvouměsíční samice myší kmene C57BL/6J. První polovina myší byla krmena standardní dietou. Druhá skupina byla krmena dietou s obsahem 1,25 % cholesterolu a 40 % tuku. Myši byly krmeny po dobu následujících 3 měsíců. Imunohistochemická detekce byla realizována pomocí nepřímé trojstupňové metody avidin-biotin komplexu. Výsledky: Exprese enoglinu byla pozorovatelná na cévním endotelu u obou skupin myší bez patrných rozdílů mezi experimentální a kontrolní skupinou. Také u VCAM-1 jsme pozorovali expresi na cévním endotelu. U kontrolní skupiny se exprese jevila silnější než u skupiny experimentální, nicméně tyto rozdíly nebyly zásadní. Závěr: Podávání vysokotukové diety s obsahem 1,25 % cholesterolu a 40 % tuku po dobu 3 měsíců nemělo vliv na expresi endoglinu a...
|
|
|
Sledování vlivu statinů a solubilního endoglinu na markery endotelové dysfunkce u vybraných buněčných linií a kultur
Vařejčková, Michala ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Štěrba, Martin (oponent) ; Mladěnka, Přemysl (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Mgr. Michala Vařejčková Školitel: Prof. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Název disertační práce: Sledování vlivu statinů a solubilního endoglinu na markery endotelové dysfunkce u vybraných buněčných linií a kultur. Tato disertační práce se zabývá studiem vlivu atorvastatinu a solubilního endoglinu na markery endotelové dysfunkce in vitro u primární buněčné kultury HUVEC a u buněčné linie HEK293T. Některé experimenty zahrnuté v této disertační práci byly provedeny v rámci spolupráce v laboratoři prof. Carmela Bernabeu ve výzkumném centru Centro de Investigaciones Biologicas v Madridu. Endotelová dysfunkce je poškození funkce endotelu, kdy je narušena rovnováha mezi vazokonstrikčními a vasodilatačními mechanismy, dochází ke zvýšené agregaci trombocytů, adhezi leukocytů a zvýšené permeabilitě endotelu. Všechny tyto děje představují první krok v rozvoji aterosklerózy a jsou součástí dalších kardiovaskulárních onemocnění, jako je např. preeklampsie, diabetes mellitus typu 2. Důležitou roli při těchto onemocněních hraje endoglin, eNOS a solubilní endoglin (sEng), který je pomocí MMP - 14 odštěpován z membránového endoglinu a uvolňován do cirkulace. Bylo zjištěno, že sEng je schopen zvyšovat expresi...
|
|
|
Časné změny exprese tkáňového endoglinu a VCAM-1 v aortě myší po podávání vysokotukové diety
Swierczková, Iva ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Herink, Josef (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Školitel: doc. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Kandidát: Bc. Iva Swierczková Název diplomové práce: Časné změny exprese tkáňového endoglinu a VCAM-1 v aortě myší po podávání vysokotukové diety. Cíl práce: Cílem práce bylo sledovat změny exprese endoglinu a VCAM-1 v aortě myší po podání standardní a vysokotukové diety pomocí imunohistochemických metod. Následně byly porovnány výsledky kontrolní a experimentální skupiny. Metoda: K experimentu byly použity dvouměsíční samice myší kmene C57BL/6J. První polovina myší byla krmena standardní dietou. Druhá skupina byla krmena dietou s obsahem 1,25 % cholesterolu a 40 % tuku. Myši byly krmeny po dobu následujících 3 měsíců. Imunohistochemická detekce byla realizována pomocí nepřímé trojstupňové metody avidin-biotin komplexu. Výsledky: Exprese enoglinu byla pozorovatelná na cévním endotelu u obou skupin myší bez patrných rozdílů mezi experimentální a kontrolní skupinou. Také u VCAM-1 jsme pozorovali expresi na cévním endotelu. U kontrolní skupiny se exprese jevila silnější než u skupiny experimentální, nicméně tyto rozdíly nebyly zásadní. Závěr: Podávání vysokotukové diety s obsahem 1,25 % cholesterolu a 40 % tuku po dobu 3 měsíců nemělo vliv na expresi endoglinu a...
|
|
|
The importance of membrane and soluble endoglin in atherosclerosis.
Mphetang, Constance Bontle ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Najmanová, Iveta (oponent)
Tato práce se zabývá významem membránového a rozpustného endoglinu (sEng) ve vzniku a progrese aterosklerózy. Ateroskleróza představuje hlavní rizikový faktor pro srdeční onemocnění a mrtvici, což činí vážný zdravotní problém. Úloha endoglinu při ateroskleróze je ještě třeba definovat a toto bude popsáno níže. Exprese endoglinu byla objevena v aterosklerotických cévách převážně v endoteliálních a hladkých svalových buňkách jak u pokusných zvířat, tak u lidí. Tento objev naznačuje, že endoglin hraje roli při aterogenezi a stabilizaci aterosklerotických plaků. Kromě aterosklerózy byly také zjištěny vysoké hladiny rozpustného endoglinu v případech hypercholesterolemie a infarktu myokardu a také se týkaly inhibice signalizace TGF-β ve stěnách postižených cév. Navíc, statiny rozumně snížily hladiny rozpustného endoglinu a usnadnily jeho expresi v aortě myší, což vedlo ke snížení aterosklerotických účinků a komplikací. Dále, pacienti s familiární hypercholesterolemií podstoupili extrakorporální eliminace, což pomohlo výrazně snížit hladiny rozpustného endoglinu. Ve závěru, hladiny rozpustného endoglinu může být kličem pro pochopení aterogeneze, její progrese a účinnosti zavedených léčebných strategií.
|
|
|
Western blot analýza vybraných molekul zánětu v aortě apoE/LDLR deficientního myšího modelu
Krejcarová, Jana ; Rathouská, Jana (vedoucí práce) ; Nachtigal, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Western blot analýza vybraných molekul zánětu v aortě apoE/LDLR deficientního myšího modelu Autor diplomové práce: Jana Krejcarová Vedoucí práce: PharmDr. Jana Rathouská, Ph.D. Cíl práce: Tato diplomová práce byla zaměřena na detekci a následné vyhodnocení exprese molekul ICAM-1, VCAM-1, COX-2 a P-selektinu v myších aortách. Kontrolní a sledovaná skupina myší se lišily v genetické výbavě, kdy sledovaná skupina měla nefunkční geny pro apolipoprotein E a zároveň LDL receptor (apoE−/− /LDLR−/− ). Metody: Pro studii byli použiti 2 měsíce staří myší samci kmene C57BL/6J. Samci byli rozděleni do dvou skupin - kontrolní a sledované s nefunkčním receptorem pro nízkodenzitní protein a pro apolipoprotein E. Obě skupiny byly krmeny standardní dietou pro hlodavce. Pro detekci a následné kvantifikované vyhodnocení exprese markerů VCAM-1, ICAM-1, COX-2 a P-selektinu byla použita analýza Western blot. Hladiny solubilních molekul ICAM-1 a P-selektinu v plazmě byly hodnoceny metodou Luminex®. Výsledky: Western blot analýza neprokázala signifikantní rozdíly exprese VCAM-1, ICAM-1, COX-2 a P-selektinu mezi oběma skupinami myší. Využití metody Luminex® přineslo signifikantní výsledek (nárůst hladin) v případě...
|
|
|
Časné změny exprese eNOS a ICAM-1 v aortě myší po podávání vysokotukové diety.
Stehlíková, Tereza ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Blažíčková, Kateřina (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Školitel: doc. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Kandidát: Tereza Stehlíková Název diplomové práce: Časné změny exprese eNOS a ICAM-1 v aortě myší po podávání vysokotukové diety Cíl práce: Cílem práce bylo sledovat změny v expresi eNOS a ICAM-1 v aortě myší po podávání vysokotukové diety v porovnání s kontrolní skupinou myší, jež byla krmena standardní dietou. Metoda: Pro experiment byly použity samice myší kmene C57BL/6J. Polovina byla krmena po dobu 3 měsíců vysokotukovou dietou s obsahem 1,25 % cholesterolu 40 % tuku, druhá polovina, která sloužila jako kontrolní, byla po celou dobu krmena běžnou stravou. Imunohistochemická detekce byla provedena pomocí nepřímé trojstupňové metody avidin- biotin komplexu. Výsledky: Exprese eNOS byla výrazná a dobře pozorovatelná na cévním endotelu, avšak bez rozdílu mezi kontrolní a experimentální skupinou. ICAM-1 exprese byla také detekována pouze na cévním endotelu v aortě, ale nebyl zde prokázán signifikantní rozdíl v expresi ICAM-1 mezi oběma skupina. Závěr: Podávání vysokotukové diety s obsahem 1,25 % cholesterolu a 40 % tuku po dobu 3 měsíců nemělo vliv na expresi eNOS a ICAM-1 v aortě myší. Výsledky této práce tedy naznačují, že použití těchto myší a tohoto...
|
|
|
Anti-inflammatory effects of ursodeoxycholyl lysophosphatidylethanolamide on THP-1 human macrophages via Toll-like receptor 4
Horvátová, Alžbeta ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Nachtigal, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Alžbeta Horvátová Školitel: prof. PharmDr. Petr Pávek PhD. Název diplomové práce: Protizánětlivý účinek UDCA-LPE na lidské makrofágové buněčné linii THP-1 prostřednictvím Toll-like receptoru 4 Nealkoholická steatohepatitida (NASH) se stala jedním z nejčastějších onemocnění jater v rozvinutých zemích. Během NAFLD je hladina ochranného fosfatidylcholinu (PC, z angl. phosphatisylcholine) snížena. Fosfolipidový konjugát žlučové kyseliny ursodeoxycholyl lysofosfatidylethanolamin (UDCA-LPE) byl navržen, aby specificky zabezpečil dodávku PC do hepatocytů. Nicméně, předchozí studie prokázaly, že UDCA-LPE má svůj vlastní hepatoprotektivní účinek a vykazuje anti-apoptické, protizánětlivé, anti-fibrotické vlastnosti a rovněž zlepšuje steatózu a hyperlipidemii na různých modelech in vivo. Tyto účinky mohou být zprostředkovány sekundárně prostřednictvím modulace imunitního systému. Z tohoto důvodu, s cílem zjistit jestli má UDCA-LPE přímý vliv na buňky imunitního systému in vitro, jsem změřila pomocí ELISA uvolňování prozánětlivých cytokinů TNFα, IL-6 a IL-1β v LPS- indukovaných THP-1-derivovaných lidských makrofázích. Kromě toho účinek UDCA-LPE na MAPK signální dráhy a nukleární translokaci NFκB byl...
|
|
|
Vztah tkáňového a solubilního endoglinu k endotelové dysfunkci a možnosti jejich ovlivnění.
Blažíčková, Kateřina ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Blaha, Vladimír (oponent) ; Mičuda, Stanislav (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Mgr. Kateřina Blažíčková Školitel: Doc. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Název disertační práce: Vztah tkáňového a solubilního endoglinu k endotelové dysfunkci a možnosti jejich ovlivnění Ateroskleróza je komplexní zánětlivé onemocnění a jako součást kardiovaskulárních chorob je hlavním zdrojem morbidity a mortality na světě. Prvotním dějem v rozvoji aterosklerózy je endotelová dysfunkce, která je charakterizována narušením homeostázy endotelu. Lékem volby v terapii aterosklerózy jsou statiny, které snižují hladinu LDL cholesterolu a příznivě ovlivňují hladiny HDL cholesterolu. Statiny však mají i široké spektrum dalších účinků, které jsou souhrnně označovány jako nelipidové nebo tzv. pleiotropní. Mezi nejdůležitější nelipidové účinky statinů bývá řazena na lipidech nezávislá modulace endotelové funkce a dále antioxidační, antiinflamatorní, antitrombogenní a antiproliferační účinky. Nejpoužívanějším zvířecím modelem pro studium aterosklerózy je myš. Díky dietě s vysokým obsahem lipidů a genetické úpravě jsme schopni pozměnit lipidové spektrum u myší a navodit aterosklerotické změny již v útlém věku. Během procesu aterogeneze dochází v cévách k patologickým změnám na imunologické,...
|
|
|
Úloha lidských papilomavirů v etiopatogenezi zhoubných nádorů sinonazální krajiny
Sieglová, Kateřina ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Petera, Jiří (oponent)
Cílem této diplomové práce je komparace imunohistochemických a molekulárně biologických metod pro detekci lidských papilomavirů (HPV) v nádorové tkáni s jejich následným využitím při studiu HPV v etiopatogenezi zhoubných nádorů sinonasální krajiny. Z množství metod používaných k detekci lidských papilomavirů byla vybrána in situ hybridizace, imunohistochemická detekce exprese proteinu p16INK4a , klasická polymerázová řetězová reakce v kombinaci se dvěma detekčními metodami a to enzymoimunoanalýzou a reverzní hybridizací, dále pak polymerázová řetězová reakce v reálném čase a reverzní transkripce. V porovnání všech metod užitých k detekci HPV byla zjištěna velice dobrá shoda, kde všechny prováděné metody vykazovali vzájemnou korelaci p˂0,0001 (p16, DNA in situ hybridizace, RNA in situ hybridizace, kvantitativní polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí (RT- qPCR) mRNA) až na metodu detekce p16 vs. DNA polymerázovou řetězovou reakcí (PCR), jejichž korelační koeficient dosáhl p=0,004 v celém souboru, respektive p=0,002 v souboru dlaždicobuněčného karcinomu. Lze tedy k detekci HPV s výhodou využít detekci p16 imunohistochemicky v kombinaci s detekcí mRNA pomocí RT-qPCR, jež poskytne informaci jak o vlivu HPV na buněčný cyklus, tak i o jeho transkripční aktivitě a typu. Výše zmíněnými metodami...
|
host ::
RSS.