|
|
Metabolismus proteinů a aminokyselin u proteokatabolických stavů - vliv metabolitů leucinu
Kovařík, Miroslav ; Holeček, Milan (vedoucí práce) ; Farghali, Hassan (oponent) ; Hlúbik, Pavol (oponent)
SOUHRN Proteokatabolismus a ztráta svalové hmoty jsou základními znaky charakterizujícími komplexní metabolický syndrom, zvaný kachexie. Ta je závažnou komplikací celé řady onemocnění, na jejichž patogenezi se často podílí systémová zánětová odpověď a endotoxemie. Aminokyseliny s rozvětveným řetězcem (leucin, isoleucin a valin) nejsou pouze významným substrátem pro tvorbu bílkovin, ale podílejí se také na regulaci metabolismu bílkovin, biosyntézy a sekrece inzulínu a slouží jako zdroj aminoskupiny při tvorbě alaninu a glutaminu ve svalu. Proteoanabolickou aktivitu vykazují kromě leucinu také některé jeho metabolity, kyselina -ketoisokapronová (KIC) a -hydroxy--methylbutyrát (HMB), a tudíž některé ze známých účinků leucinu mohou být navozeny těmito metabolity. V poslední době je pozornost zaměřena na HMB, užívaný jako potravní doplněk pro sportovce, ale zkoumaný také pro své potenciální využití v terapii kachexie. Cílem našich experimentů bylo: 1) studium vlivu endotoxinu na metabolismus bílkovin a aminokyselin u různých typů kosterního svalu a dávkové závislosti těchto změn; 2) posouzení vlivu vybraných metabolitů leucinu (KIC a HMB) na metabolismus bílkovin a aminokyselin - u různých typů kosterních svalů; za podmínek in vitro a in vivo; u zdravých potkanů a v proteokatabolických podmínkách. Pokusy byly...
|
|
|
Testing of newly synthetized compounds with Constitutive androstane receptor (CAR)
Mouratidis, Ioannis ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Kovařík, Miroslav (oponent)
Karlova Univerzita v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Ioannis Mouratidis Školitel: Doc. PharmDr. Petr Pávek Ph.D. Testing of newly synthesized compounds with constitutive androstane receptor (CAR) V minulých letech probíhal intenzivní výzkum hledající ligandy nově objevených nukleárních receptorů. Důvodem této intenzivní výzkumné činnosti je případný široký léčebný potenciál jaderných receptorů. Nukleární receptory se podílí na řízení metabolismu a vylučování různých látek, endogenních i exogenních, a tak řídí homeostázu u živých organismů. V mé studii jsem testoval aktivaci konkrétního jaderného receptoru známého jako konstitutivní receptor androstane (CAR). Testoval jsem 11 strukturálně různých sloučeniny. Současně jsem použil známý inhibitor CAR klotrimazol a aktivátor CITCO. Pro testování těchto látek jsem použil metodu two-hybrid assay. Tato metoda umožňuje studovat interakce ligand-protein v prostředí blízkému situaci in vivo. Metoda je založena na Dual-Luciferase Reporter kitu, který umožňuje kvantifikaci interakce ligandu s CAR receptorem prostřednictví luciferázového reportérového konstruktu. Výsledná chemiluminiscence byla měřena na Genios Plus luminometru. Kvantifikace luminiscence testovaných sloučenin ukázala, že látky 21, 22, 23...
|
|
| |
|
| |
|
|
Metabolismus proteinů a aminokyselin u proteokatabolických stavů - vliv metabolitů leucinu
Kovařík, Miroslav ; Holeček, Milan (vedoucí práce) ; Farghali, Hassan (oponent) ; Hlúbik, Pavol (oponent)
SOUHRN Proteokatabolismus a ztráta svalové hmoty jsou základními znaky charakterizujícími komplexní metabolický syndrom, zvaný kachexie. Ta je závažnou komplikací celé řady onemocnění, na jejichž patogenezi se často podílí systémová zánětová odpověď a endotoxemie. Aminokyseliny s rozvětveným řetězcem (leucin, isoleucin a valin) nejsou pouze významným substrátem pro tvorbu bílkovin, ale podílejí se také na regulaci metabolismu bílkovin, biosyntézy a sekrece inzulínu a slouží jako zdroj aminoskupiny při tvorbě alaninu a glutaminu ve svalu. Proteoanabolickou aktivitu vykazují kromě leucinu také některé jeho metabolity, kyselina -ketoisokapronová (KIC) a -hydroxy--methylbutyrát (HMB), a tudíž některé ze známých účinků leucinu mohou být navozeny těmito metabolity. V poslední době je pozornost zaměřena na HMB, užívaný jako potravní doplněk pro sportovce, ale zkoumaný také pro své potenciální využití v terapii kachexie. Cílem našich experimentů bylo: 1) studium vlivu endotoxinu na metabolismus bílkovin a aminokyselin u různých typů kosterního svalu a dávkové závislosti těchto změn; 2) posouzení vlivu vybraných metabolitů leucinu (KIC a HMB) na metabolismus bílkovin a aminokyselin - u různých typů kosterních svalů; za podmínek in vitro a in vivo; u zdravých potkanů a v proteokatabolických podmínkách. Pokusy byly...
|
|
|
Drug-drug interactions (DDI) and pharmacodynamic effects of metformin
Hakeem-Habeeb, Babalola ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Kovařík, Miroslav (oponent)
Karlova Univerzita v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Babalola Hakeem-Habeeb Školitel : Doc. PharmDr. Petr Pávek Ph.D. Drug-drug interactions (DDI) and pharmacodynamic effects of metformin Metformin je široce užívané léčivo v terapii 2. typu diabetu. Kromě toho je čím dál více používán v dalších terapeutických aplikacích. Metformin je léčivo první volby u diabetu 2 typu především z důvodu jeho účinnosti, minimálních lékových interakcí a nežádoucích účinků. Mechanizmus účinku metforminu však není znám. Předpokládá se, že AMPK signální kaskáda a zvýšená exprese SHP mohou být předpokládaným mechanizmem metforminu. SHP inhibuje funkce několika nukleárních receptorů a transkripčních faktorů, které řídí expresi faktorů 1. a 2. fáze biotransformace i metabolismu endogenních látek. Neznámějším z těchto nukleárních receptorů je Pregnanový X receptor (PXR). SHP byl proto navržen jako spojnice mezi biotransformačními enzymy (metabolismem xenobiotic) a intermediárním metabolismem. Ve své diplomové práci shrnuji nejdůležitější poznatky týkající se mechanizmu účinku a role metforminu na metabolismu xenobiotik řízený PXR receptorem nebo metabolismus intermediární. Kromě toho sumarizuji nejdůležitější lékové interakce metforminu.
|
|
|
Nejnovější údaje z odborné literatury o estrogenových a progesteronových receptorech v karcinomu dělohy
Ježková, Alena ; Kovařík, Miroslav (vedoucí práce) ; Doležel, Martin (oponent)
Touto prací navazujeme na předchozí práce školícího pracoviště, které jsou zaměřeny na ER, PR expresi v nádorech dělohy a jejich možné praktické využití. Tuto problematiku jsme zúžili pouze na karcinomy endometria, jelikož nádory cervixu jsou řešeny v bakalářské práci Lenky Nespěchalové. Vyhledali jsme informace ze zahraniční a české literatury, kterými jsme obohatili dosavadní rešeršní přehledné práce školícího pracoviště. Bohužel česká literatura nedisponuje tak bohatým množstvím studií jako zahraniční. Pozorovali jsme trend snahy českých pracovišť publikovat studie na podkladě zahraničních prací. Naší prací jsme navázali především na diplomovou práci Mareškové B., 2008. V zásadní problematice PR, ER jsme získali shodné údaje s Mareškovou. Důležité je nejenom stanovení totálních hladin steroidních receptorů, ale především poměrů jejich izoforem PRA/PRB, ERα/ERβ. Obecně progesterony mají ochranný antiproliferativní účinek na endometrium, v detailu se jedná především o transkripční represi zprostředkovanou PRA isoformou. PRB naopak aktivuje transkripci ERα, která je zodpovědná za zvýšenou proliferaci. Právě PRB je významným faktorem pro nasazení progestinové terapie. ERβ disponuje antiproliferativním efektem prostřednictvím represe ERα. Z tohoto důvodu jsme se dále zaměřili i na jiné molekulárně...
|
|
|
Využití kometového testu pro stanovení poškození DNA v průběhu protinádorové chemoterapie.
Voříšková, Jana ; Kovařík, Miroslav (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent)
Ve své práci jsem se zabývala měřením poškození DNA v lymfocytech izolovaných z periferní lidské krve během chemoterapeutické léčby. Pacientům s diagnózou bronchogenního karcinomu byla podávána kombinace derivátů platiny (cis- platina nebo karboplatina) a dalších chemoterapeutických látek (gemcitabin, paclitaxel nebo vinorelbin). Celá chemoterapie probíhá ve 4 cyklech. My jsme měřili poškození DNA během 1. a 3. cyklu a 3 týdny po posledním absolvovaném cyklu chemoterapie. Detekci poškození DNA jsme prováděli metodou comet assay pro její spolehlivost a přesnost. Lymfocyty byly izolovány z plné krve pomocí média LSM Lymphocyte a poté byla provedena alkalická verze kometového testu. Hodnotili jsme vznik jednořetězcových zlomů (SSB) a tvorbu křížových vazeb (ICL). Pro detekci křížových vazeb byly lymfocyty inkubovány v přítomnosti 200 µM styrenoxidu (SO). Inkubace periferních lidských lymfocytů s 200 µM SO vede k tvorbě zlomů v DNA a ke vzniku komet. Pokud jsou v DNA přítomné křížové vazby, alkalické rozplétání je blokováno a dojde ke snížení hodnoty % DNA v ohonu (% tail DNA). Komety byly poté barveny ethidium bromidem a analyzovány softwarem LUCIA Comet Assay. Počet jednořetězcových zlomů v DNA byl před započetím chemoterapie poměrně nízký, ihned po zahájení léčby však byl patrný nárůst tohoto typu...
|
|
|
Asociace utilizace nutričních substrátů a prediktorů morbidity a mortality u pacientů s CHOPN
Poláková, Terezie ; Kovařík, Miroslav (vedoucí práce) ; Hronek, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Student: Mgr. Terezie Poláková Konzultant: PharmDr. Miroslav Kovařík, Ph.D. Název práce: Asociace utilizace nutričních substrátů a prediktorů morbidity a mortality u pacientů s CHOPN Chronická obstrukční plicní nemoc (CHOPN) není onemocněním pouze respiračního systému, ale ovlivňuje celkový zdravotní stav pacienta. Mezi jeho závažné důsledky patří hlavně změny v metabolismu živin, které mohou být pro pacienta nebezpečné. Typickým systémovým problémem pacientů s CHOPN je ztráta svalové hmoty. Tato studie se zabývala souvislostmi mezi utilizací nutričních substrátů a indexů, které jsou využívány k predikci morbidity a mortality, u 51 pacientů ve všech stádiích CHOPN (38 mužů a 13 žen ve věkovém průměru 67 ± 7 let) v porovnání s kontrolní skupinou zdravých dobrovolníků (4 muži a 5 žen ve věkovém průměru 62 ± 4). Měření probíhala ambulantně s využitím metody nepřímé kalorimetrie a stanovení množství močoviny v moči. Statisticky významné rozdíly v utilizaci substrátů jsme vyhodnotili pouze v případě relativní utilizace proteinů u pacientů s CHOPN, která měla medián hodnot nižší o 5 % než kontrolní skupina. Utilizace sacharidů a lipidů nebyla významně rozdílná mezi pacienty s CHOPN a zdravými...
|
|
|
Outsourcing konstrukčních prací
Kočí, Stanislav ; Pavlová, Eva (vedoucí práce) ; Kovářík, Miroslav (oponent)
Práce popisuje možnosti a podmínky pro outsourcing konstrukčních prací u společnosti, která se zabývá výrobou letadel. Ve druhé části je zpracován podnikatelský plán na projekt konstrukční kanceláře, která bude konstrukční práce poskytovat. Jsou popsány možnosti využití podpory pro malé a střední podniky. V závěru práce je provedeno hodnocení ekonomické efektivnosti vložených investic a jejich návratnost a provedena citlivostní analýza faktorů rizika.
|
host ::
RSS.