|
| |
|
| |
|
|
Stanovení adrenalinu a noradrenalinu v plazmě metodou HPLC
Kučerová, Tereza ; Klapková, Eva (vedoucí práce) ; Kotaška, Karel (oponent)
Cílem této bakalářské práce bylo provést validaci metody na stanovení adrenalinu a noradrenalinu v plazmě pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s elektrochemickou (coulometrickou) detekcí. Metodu bylo potřeba nejprve optimalizovat pro coulometrickou detekci, neboť byl používán kit firmy Bio-Rad, který byl určen pro stanovení s amperometrickou detekcí. Principem této metody je chromatografická separace látek s následnou oxidací stanovovaných analytů při průchodu analytickou celou s coulometrickou detekcí. Součástí analytického postupu je extrakce adrenalinu a noradrenalinu na pevné fázi. V rámci této práce byla provedena optimalizace metody pro stanovení adrenalinu a noradrenalinu s coulometrickou detekcí. Na jednotlivých analytických celách bylo zvoleno následující nastavení potenciálů: na cele 1 byl nastaven potenciál 350 mV s rozsahem 100 nA, na cele 2 byl nastaven potenciál 0 mV s rozsahem 50 nA na a na guard cele 0 mV s rozsahem 50 nA. Dále byla chromatografická metoda plně validována (přesnost, správnost, mez detekce, robustnost). Na závěr bylo provedeno mezilaboratorní porovnání výsledků 42 pacientských vzorků s výsledky naměřenými v nemocnici Šternberk.
|
|
|
Porovnání gelové a kapilární elektroforézy bílkovin
Krbec, Michal ; Franěk, Tomáš (vedoucí práce) ; Kotaška, Karel (oponent)
Elektroforéza sérových proteinu je jednou z metod užívaných v laboratorní diagnostice patologických stavu, ale i k výzkumným úcelum. Jde o jednostupnovou metodu, pri níž dochází k izolaci jednotlivých proteinu ze smesi (nejcasteji krevních bílkovin) v elektrickém poli v prítomnosti vhodného pufru a na vhodném nosici na základe jejich ruzné pohyblivosti, závislé na jejich povrchovém náboji a molekulové hmotnosti. Puvodne býval nosicem papír, pozdeji acetátcelulózová membrána a nyní již témer výhradne agaróza (cištený agar s nízkou endoosmózou), prípadne polyakrylamid (PAA). Mým úkolem v této práci bylo analyzovat sérii vzorku metodou gelové elektroforézy a následne analyzovat stejnou sérii i metodou kapilární elektroforézy. Výsledky získané obema metodami jsem zpracoval numericky, vzájemne porovnal a statisticky zhodnotil. Výstupem mojí práce je porovnání gelové a kapilární elektroforézy, zhodnocení výhod, nevýhod a zejména rozdílu mezi obema metodami.
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Možnosti stanovení síranových iontů v biologickém materiálu u pacientů se závažnými poruchami metabolizmu
Plasová, Martina ; Kotaška, Karel (vedoucí práce) ; Zadina, Jiří (oponent)
Sírany patří mezi významné anionty podílející se na řadě procesů v lidském organizmu. Cílem bakalářské práce bylo ověřit možnosti využití stanovení síranových aniontů v séru u pacientů se závažnými metabolickými poruchami Sulfáty byly vyšetřeny v séru 68 pacientů (31 mužů, průměrný věk 67 let, věkové rozmezí 31 - 86 a 37 žen, průměrný věk 71, věkové rozmrzí 44 - 86) pomocí dvou turbidimetrických metod (kvantichromsulfátové a želatinázové BGR metody). 12 vzorků nebylo možno statisticky vyhodnotit, protože byly silně hemolytické a hodnoty sulfátů vycházely falešně pozitivní. Metodu kvantichromsulfátovou jsme použili pro vyšetření u 34 pacientů (21 žen, průměrný věk 70 let, věkové rozmezí 45 - 86 let a 13 mužů, průměrný věk 64, věkové rozmezí 49 - 83 let). Želatinázovou metodu jsme použili pro vyšetření 22 pacientů (9 žen, průměrný věk 69 let, věkové rozmezí 44 - 86 let a 13 mužů, průměrný věk 67 let, věkové rozmezí 31 - 82 let). Střední hodnoty sulfátů v séru u vyšetřovaných pacientů před hemodialýzou byly významně vyšší než po hemodialýze (p<0.0001, neparametrický t-test, alfa = 0.05). Želatinázová metoda vykazuje významně menší snížení hodnot sulfátů po hemodialýze než metoda kvantichromsulfátová.(p = 0.037 vs. p < 0.001, neparametrický t-test, alfa = 0,05), což lze vysvětlit významným vlivem interferencí u...
|
|
|
Vyšetření močových konkrementů urolitiázy
Kultová, Lenka ; Zadina, Jiří (vedoucí práce) ; Kotaška, Karel (oponent)
Urolitiáza je rozšířené onemocnění, které může vést k závažným komplikacím až selhání funkce ledvin. Pro přesnou diagnózu a zavedení účinné metafylaxe je důležité analyzovat složení konkrementu. Ve své práci jsem se zabývala analýzou močových konkrementů metodami infračervené spektroskopie a polarizační mikroskopie. V první části práce jsem se zaměřila na metodické aspekty stanovení. V souboru deseti vzorků, které zahrnovaly převážně se vyskytující komponenty močových konkrementů, jsem při hodnocení IČ spekter používala dva softwarové programy - Kidney Stone Analysis a Omnic. Program Kidney Stone Analysis zobrazuje pouze jeden konečný výsledek analýzy. Program Omnic udává deset možných výsledků složení daného vzorku, které se nejlépe shodují se spektry z knihovny. Hodnotící osoba zde má možnost tyto výsledky porovnat a podle toho, jak se kvantitativní údaje vyhodnocení jednotlivých komponent ve výsledcích opakují, se rozhodnout pro konečný výsledek. Pokud se při hodnocení IČ spekter obsah komponent pohybuje okolo 10 %, výsledek nelze považovat za zcela spolehlivý. Polarizační mikroskop umožňuje ověření a upřesnění výsledků analýzy. Potvrdilo se, že kombinace obou metod je často velice přínosná. V druhé části práce jsem analyzovala močové konkrementy pacientských vzorků, tak jak se hodnotí v podmínkách...
|
|
|
Laboratorní stanovení kostních markerů při osteoporóze
Moučková, Štěpánka ; Kotaška, Karel (oponent) ; Dršata, Jaroslav (vedoucí práce)
1 Abstrakt Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Štěpánka Moučková Školitel: ing. Marta Pechová Název bakalářské práce: Laboratorní stanovení kostních markerů při osteoporóze Cílem práce je porovnání vstupních hodnot markerů kostní novotvorby a resorpce u nově zachycených pacientů s osteoporózou s hodnotami po jejich zaléčení. Jako markery kostní novotvorby byly porovnávány N-MID osteokalcin, aminoterminální propeptid prokolagenu typu I (PINP) a marker kostní resorpce karboxyterminální telopeptid (β-CTx). Celkem byla nasbírána a zpracována data od 66 pacientů, z toho 60 žen (47 po menopauze a 13 před menopauzou) a 6 mužů. Pacienti byli rozděleni do čtyř skupin nejen podle věku, ale i v závislosti na použité léčbě. Muži vzhledem k malému počtu nebyli do hodnocení zahrnuti. Analýza jednotlivých markerů byla provedena s použitím nejmodernějších metod od firmy Roche na imunochemickém analyzátoru Cobas e411. Současně byly změřeny hodnoty 25-OH vitaminu D3, kalcia (TCa) a parathyrinu. Ze získaných hodnot vyplývá, že pacientky zaléčené bisfosfonáty vykazují významnou změnu markerů kostního obratu, zatímco u pacientek bez prokázané osteoporózy jsou hodnoty kostních markerů udržovány na stejné hladině pomocí vitaminu D a kalcia. Hodnoty vitaminu D3...
|
host ::
RSS.