|
|
Stanovení gancikloviru u pacientů po transplantaci plic
Hrach, Filip ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Kotaška, Karel (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Filip Hrach Školitel: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Konzultant: doc. Ing. Eva Klapková, Ph.D. Název diplomové práce: Stanovení gancikloviru u pacientů po transplantaci plic Ganciklovir je nukleosidový analog, který je široce využíván pro léčbu infekcí způsobených herpetickými viry včetně cytomegaloviru. Pacientům po transplantaci plic je vždy profylakticky podáván valganciklovir (proléčivo gancikloviru), aby se předešlo cytomegalovirové infekci. Cílem diplomové práce bylo zavést spolehlivou, citlivou a rychlou analytickou metodu pro stanovení gancikloviru a tuto metodu validovat. Dále stanovit hodnoty gancikloviru u pacientů po transplantaci plic. Posledním cílem bylo zhodnotit význam terapeutického monitorování gancikloviru. Pro stanovení gancikloviru byla zavedena metoda kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií. Byly stanoveny validační parametry nezbytné pro bioanalytické metody. Všechny validační parametry splnily podmínky úspěšné validace. Při perorálním podání antivirotika je využíván valganciklovir a při intravenózním podání ganciklovir. Pacienti po transplantaci plic dostávají profylakticky perorálně 900 mg/den valgancikloviru. Po profylaxi je intravenózně podáván...
|
|
|
Stanovení gancikloviru u pacientů po transplantaci plic
Hrach, Filip ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Kotaška, Karel (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Filip Hrach Školitel: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Konzultant: doc. Ing. Eva Klapková, Ph.D. Název diplomové práce: Stanovení gancikloviru u pacientů po transplantaci plic Ganciklovir je nukleosidový analog, který je široce využíván pro léčbu infekcí způsobených herpetickými viry včetně cytomegaloviru. Pacientům po transplantaci plic je vždy profylakticky podáván valganciklovir (proléčivo gancikloviru), aby se předešlo cytomegalovirové infekci. Cílem diplomové práce bylo zavést spolehlivou, citlivou a rychlou analytickou metodu pro stanovení gancikloviru a tuto metodu validovat. Dále stanovit hodnoty gancikloviru u pacientů po transplantaci plic. Posledním cílem bylo zhodnotit význam terapeutického monitorování gancikloviru. Pro stanovení gancikloviru byla zavedena metoda kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií. Byly stanoveny validační parametry nezbytné pro bioanalytické metody. Všechny validační parametry splnily podmínky úspěšné validace. Při perorálním podání antivirotika je využíván valganciklovir a při intravenózním podání ganciklovir. Pacienti po transplantaci plic dostávají profylakticky perorálně 900 mg/den valgancikloviru. Po profylaxi je intravenózně podáván...
|
|
|
Stanovení selenu a manganu v likvoru atomovou absorpční spektrometrií
Jiráková, Lucie ; Kotaška, Karel (vedoucí práce) ; Klapková, Eva (oponent)
Cílem práce bylo posoudit vhodnost použití atomové absorpční spektrometrie pro stanovení selenu a manganu v likvoru a stanovit koncentrace Se a Mn ve vybraném souboru pacientů. Pro selen byla stanovena mez detekce 2,9 μg/l a pro mangan 0,26 μg/l. Bylo vyšetřeno 73 pacientů (31 žen, 42 mužů), jejichž průměrný věk činil 14,1 let. Pacienti byli rozděleni do dvou skupin podle věku (56 dětí, 17 dospělých) a do dvou podskupin podle diagnóz (onkologické, neurologické). Kontrolní skupinu tvořilo 18 jedinců (5 žen, 13 mužů, průměrný věk 21,7 let) s neonkologickými a neneurologickými diagnózami. Prokázali jsme statisticky významně zvýšené koncentrace selenu v likvoru v kontrolní skupině oproti skupině neurologické (medián = 14,4 μg/l vs. 12,4 μg/l, p < 0,05). Zvýšené hladiny manganu v likvoru jsme zaznamenali v dětské skupině s onkologickými onemocněními v porovnání s kontrolní skupinou pacientů (1,2 μg/l vs. 0,5 μg/l, p < 0,05). Stanovení selenu a manganu v likvoru může být diagnosticky významné u vybraných skupin pacientů. Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
|
|
|
Porovnání gelové a kapilární elektroforézy bílkovin
Krbec, Michal ; Franěk, Tomáš (vedoucí práce) ; Kotaška, Karel (oponent)
Elektroforéza sérových proteinu je jednou z metod užívaných v laboratorní diagnostice patologických stavu, ale i k výzkumným úcelum. Jde o jednostupnovou metodu, pri níž dochází k izolaci jednotlivých proteinu ze smesi (nejcasteji krevních bílkovin) v elektrickém poli v prítomnosti vhodného pufru a na vhodném nosici na základe jejich ruzné pohyblivosti, závislé na jejich povrchovém náboji a molekulové hmotnosti. Puvodne býval nosicem papír, pozdeji acetátcelulózová membrána a nyní již témer výhradne agaróza (cištený agar s nízkou endoosmózou), prípadne polyakrylamid (PAA). Mým úkolem v této práci bylo analyzovat sérii vzorku metodou gelové elektroforézy a následne analyzovat stejnou sérii i metodou kapilární elektroforézy. Výsledky získané obema metodami jsem zpracoval numericky, vzájemne porovnal a statisticky zhodnotil. Výstupem mojí práce je porovnání gelové a kapilární elektroforézy, zhodnocení výhod, nevýhod a zejména rozdílu mezi obema metodami.
|
|
| |
|
|
Vyšetření močových konkrementů urolitiázy
Kultová, Lenka ; Zadina, Jiří (vedoucí práce) ; Kotaška, Karel (oponent)
Urolitiáza je rozšířené onemocnění, které může vést k závažným komplikacím až selhání funkce ledvin. Pro přesnou diagnózu a zavedení účinné metafylaxe je důležité analyzovat složení konkrementu. Ve své práci jsem se zabývala analýzou močových konkrementů metodami infračervené spektroskopie a polarizační mikroskopie. V první části práce jsem se zaměřila na metodické aspekty stanovení. V souboru deseti vzorků, které zahrnovaly převážně se vyskytující komponenty močových konkrementů, jsem při hodnocení IČ spekter používala dva softwarové programy - Kidney Stone Analysis a Omnic. Program Kidney Stone Analysis zobrazuje pouze jeden konečný výsledek analýzy. Program Omnic udává deset možných výsledků složení daného vzorku, které se nejlépe shodují se spektry z knihovny. Hodnotící osoba zde má možnost tyto výsledky porovnat a podle toho, jak se kvantitativní údaje vyhodnocení jednotlivých komponent ve výsledcích opakují, se rozhodnout pro konečný výsledek. Pokud se při hodnocení IČ spekter obsah komponent pohybuje okolo 10 %, výsledek nelze považovat za zcela spolehlivý. Polarizační mikroskop umožňuje ověření a upřesnění výsledků analýzy. Potvrdilo se, že kombinace obou metod je často velice přínosná. V druhé části práce jsem analyzovala močové konkrementy pacientských vzorků, tak jak se hodnotí v podmínkách...
|
|
| |
|
|
Možnosti stanovení síranových iontů v biologickém materiálu u pacientů se závažnými poruchami metabolizmu
Plasová, Martina ; Kotaška, Karel (vedoucí práce) ; Zadina, Jiří (oponent)
Sírany patří mezi významné anionty podílející se na řadě procesů v lidském organizmu. Cílem bakalářské práce bylo ověřit možnosti využití stanovení síranových aniontů v séru u pacientů se závažnými metabolickými poruchami Sulfáty byly vyšetřeny v séru 68 pacientů (31 mužů, průměrný věk 67 let, věkové rozmezí 31 - 86 a 37 žen, průměrný věk 71, věkové rozmrzí 44 - 86) pomocí dvou turbidimetrických metod (kvantichromsulfátové a želatinázové BGR metody). 12 vzorků nebylo možno statisticky vyhodnotit, protože byly silně hemolytické a hodnoty sulfátů vycházely falešně pozitivní. Metodu kvantichromsulfátovou jsme použili pro vyšetření u 34 pacientů (21 žen, průměrný věk 70 let, věkové rozmezí 45 - 86 let a 13 mužů, průměrný věk 64, věkové rozmezí 49 - 83 let). Želatinázovou metodu jsme použili pro vyšetření 22 pacientů (9 žen, průměrný věk 69 let, věkové rozmezí 44 - 86 let a 13 mužů, průměrný věk 67 let, věkové rozmezí 31 - 82 let). Střední hodnoty sulfátů v séru u vyšetřovaných pacientů před hemodialýzou byly významně vyšší než po hemodialýze (p<0.0001, neparametrický t-test, alfa = 0.05). Želatinázová metoda vykazuje významně menší snížení hodnot sulfátů po hemodialýze než metoda kvantichromsulfátová.(p = 0.037 vs. p < 0.001, neparametrický t-test, alfa = 0,05), což lze vysvětlit významným vlivem interferencí u...
|
|
|
Laboratorní stanovení kostních markerů při osteoporóze
Moučková, Štěpánka ; Dršata, Jaroslav (vedoucí práce) ; Kotaška, Karel (oponent)
1 Abstrakt Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Štěpánka Moučková Školitel: ing. Marta Pechová Název bakalářské práce: Laboratorní stanovení kostních markerů při osteoporóze Cílem práce je porovnání vstupních hodnot markerů kostní novotvorby a resorpce u nově zachycených pacientů s osteoporózou s hodnotami po jejich zaléčení. Jako markery kostní novotvorby byly porovnávány N-MID osteokalcin, aminoterminální propeptid prokolagenu typu I (PINP) a marker kostní resorpce karboxyterminální telopeptid (β-CTx). Celkem byla nasbírána a zpracována data od 66 pacientů, z toho 60 žen (47 po menopauze a 13 před menopauzou) a 6 mužů. Pacienti byli rozděleni do čtyř skupin nejen podle věku, ale i v závislosti na použité léčbě. Muži vzhledem k malému počtu nebyli do hodnocení zahrnuti. Analýza jednotlivých markerů byla provedena s použitím nejmodernějších metod od firmy Roche na imunochemickém analyzátoru Cobas e411. Současně byly změřeny hodnoty 25-OH vitaminu D3, kalcia (TCa) a parathyrinu. Ze získaných hodnot vyplývá, že pacientky zaléčené bisfosfonáty vykazují významnou změnu markerů kostního obratu, zatímco u pacientek bez prokázané osteoporózy jsou hodnoty kostních markerů udržovány na stejné hladině pomocí vitaminu D a kalcia. Hodnoty vitaminu D3...
|
|
|
Využití imunochemických metod v diagnostice nádorových a degenerativních onemocnění
Hanousková, Lenka ; Kotaška, Karel (vedoucí práce) ; Bronský, Jiří (oponent) ; Štern, Petr (oponent)
Úvod: Imunochemické metody jsou důležitým pomocníkem klinických lékařů i odborníků v biomedicínském výzkumu. Předností imunochemických metod je jejich vysoká citlivost a přesnost. Cílem práce bylo využít imunochemických metod ke stanovení biomarkerů nádorových a degenerativních onemocnění. Byly provedeny celkem čtyři studie. Dvě studie se zabývaly hledáním nových biomarkerů karcinomu prostaty, třetí studie se zabývala sledováním FGF23 u pacientů s hyperparathyreózou a čtvrtá studie se zabývala stanovením kyseliny hyaluronové u pacientů s gonartrózou kolene. Metody a pacienti: 1. studie: Koncentrace Chromograninu A, Endoglinu, TIMP-1 a thymidinkinázy 1 (TK1) v séru a Endoglinu, SPINK-1, Annexinu, TIMP-1 v moči byly měřeny u 58 pacientů (průměrný věk 68 let, rozmezí 45 -82 let) s klinicky diagnostikovaným karcinomem prostaty a 30 zdravých jedinců (průměrný věk 64 let, rozmezí 55 - 78 let) bez relevantní urologické anamnézy a hodnoty PSA v normě. TK1 byla vybrána jako nejvhodnější marker a sérové koncentrace TK1 byly následně měřeny u 169 pacientů (průměrný věk 62 let, rozmezí 45 - 82 let) s karcinomem prostaty a kontrolní skupiny 39 zdravých mužů (průměrný věk 61 let, rozmezí 54 - 78 let). Vyšetření TK1 bylo rozšířeno o stanovení epitopu TK210. Sérové koncentrace TK210 byly měřeny u 126 pacientů...
|
host ::
RSS.