|
|
PROBIOTICKÉ GENY POTRAVINÁŘSKY VÝZNAMNÝCH BAKTERIÍ MLÉČNÉHO KVAŠENÍ
Konečná, Jana ; Ševčovičová,, Andrea (oponent) ; Doškař, Jiří (oponent) ; Španová, Alena (vedoucí práce)
Izolace deoxyribonukleové kyseliny (DNA) je velmi důležitým krokem v molekulární diagnostice mikroorganismů. Pro amplifikaci DNA polymerázovou řetězovou reakcí (PCR) je nezbytná vysoká kvalita izolované DNA. Izolace DNA pomocí konvenční fenol–chloroformové extrakce a srážení DNA ethanolem je časově náročná a vyžaduje použití toxického fenolu. Magnetické separační techniky využívající magnetické pevné částice jsou jednou z moderních metod, které urychlují izolaci nukleových kyselin. Cílem této práce bylo ověřit použití dvou různých typů magnetických částic pro extrakci DNA na pevné fázi. Množství DNA v separační směsi bylo měřeno za použití ultrafialové spektrofotometrie (UV). Metoda byla testována nejprve na DNA z kuřecích erytrocytů. Pro adsorpci DNA na magnetické částice byl použit fosfátový pufr (pH 7, 7,6 a 8). Ukázalo se, že přibližně polovina DNA byla adsorbována na částice. Eluční podmínky DNA byly také optimalizovány. Poté byla testována bakteriální DNA a metoda použita k izolaci z reálných vzorku potravinových doplňků stravy. Tato DNA eluovaná z částic byla v kvalitě pro PCR. Vysokorozlišovací analýza křivek tání (HRM) je jednoduchá a levná metoda, použivána pro diskriminaci amplikonů po polymerázové řetězové reakci (PCR) v reálném čase. V této práci byla testována HRM-PCR pro rychlou identifikaci kmenů patřících do skupiny Lactobacillus. Byly použity tři různé metody izolace DNA: fenolová extrakce, separace pomocí magnetických částic a izolace pomocí komerčního kitu. K amplifikaci genu 16S rRNA bylo testováno 10 párů primerů pro cílové genové fragmenty (LAC1 - LAC2, LAC2 - LAC4, P1V1 - P2V1, Gro F - GroR, 3BA - 338f - Primer 1, V1F - V1R, CHAU - V3F - CHAU - V3R, CHAU - V6F - CHAU - V6R, poxcDNAFw - poxPromRVC, poxcDNAFw - poxPromRVT). Použitím párů primerů GroF/R a LAC2/4 byly úspěšně identifikovány druhy patřící do rodu Lactobacillus. Byly zjištěny rozdíly mezi použitými metodami extrakce z křivek tání HRM – PCR analýz.
|
|
| |
|
|
Magnetické částice a jejich využití v biotechnologii
Knápková, Monika ; Konečná, Jana (oponent) ; Trachtová, Štěpánka (vedoucí práce)
Práce je zaměřena na magnetické částice, které jsou využívány v řadě biotechnologických aplikací. Teoretická část práce pojednává o specifických vlastnostech těchto částic, o materiálech, kterými mohou být tvořeny a dále jsou zmíněny některé biotechnologické aplikace využívající magnetické částice. V experimentální části byly využity vybrané druhy magnetických částic za účelem izolace nukleových kyselin. Kvalita izolované DNA s ohledem na čistotu byla vyhodnocena za použití metody polymerázové řetězové reakce a jejích modifikací. Dále byla využita vysokorozlišovací analýza křivek tání (HRM analýza) za účelem ověření kvality izolované DNA a pro rozlišení bakterií Lactobacillus casei a Lactobacillus rhamnosus. Izolace DNA pomocí magnetických nosičů byla úspěšná, přičemž z hlediska koncentrace byly nejvhodnější komerčně dostupné mikronosiče MPG a magnetické mikročástice typu Fkol 77ox. Z hlediska čistoty byly pro izolaci DNA nejlepší magnetické nanočástice F79/L3 PLL. Bakteriální druhy Lactobacillus casei a Lactobacillus rhamnosus se pomocí HRM analýzy nepodařilo rozlišit.
|
|
|
Povinná mlčenlivost všeobecných sester a důsledky jejího porušení
Benešová, Pavla ; Prošková, Eva (vedoucí práce) ; Konečná, Jana (oponent)
Cílem mé bakalářské práce bylo zjistit, jaké je právní vědomí všeobecných sester v problematice povinné mlčenlivosti. Dále bylo zkoumáno, zda všeobecné sestry vědí, jaké jsou důsledky za neoprávněné nahlížení do zdravotnické dokumentace. V teoretické části popisuji problematiku povinné mlčenlivosti a důsledky jejího porušení. Vymezuji pojmy osobní a osobní citlivý údaj. Uvádím podmínky, za kterých dochází k prolomení povinné mlčenlivosti a důsledky porušení právní povinnosti. Popisuji právní odpovědnost všeobecných sester. V praktické části využívám kvalitativní metody sběru dat, rozhovoru, k tomu, abych odpověděla na hlavní a dílčí výzkumné otázky. Pomocí provedených rozhovorů se všeobecnými sestrami, provádím analýzu případu a popisuji provedená opatření zaměstnavatele v Městské nemocnici v Litoměřicích.
|
|
|
Netradiční potraviny s obsahem probiotických bakterií
Sobotková, Markéta ; Konečná, Jana (oponent) ; Trachtová, Štěpánka (vedoucí práce)
Probiotické mikroorganismy jsou obsaženy kromě běžných mléčných produktů také v netradičních potravinách konzumovaných zejména v asijských zemích. V práci je uveden přehled vybraných méně obvyklých potravin s obsahem probiotických mikroorganismů, které nejsou řazeny mezi mléčné fermentované výrobky. Jsou diskutovány pozitivní účinky probiotických potravin na zdravotní stav člověka. Experimentální část práce se zabývá identifikací probiotických mikroorganismů přítomných ve vybraném probiotickém výrobku asijského původu. DNA byla z produktu izolována metodou fenolové extrakce a za využití magnetických částic. Přítomnost probiotických MO byla zjišťována za využití metody polymerázové řetězové reakce v reálném čase (qPCR).
|
|
|
Identifikace probiotických bakterií v komplexních matricích potravin a potravinových doplňků
Cesnak, Filip ; Konečná, Jana (oponent) ; Trachtová, Štěpánka (vedoucí práce)
Teoretická časť práce pojednáva o všeobecnej charakteristike probiotických baktérií, ich vplyvoch na zdravie človeka a technologických nárokoch kladených na probiotické baktérie. Ďalej práca pojednáva o aktuálnych metódach identifikácie baktérií, najmä na základe polymerázovej reťazovej reakcie. Experimentálna časť pozostáva z identifikácie probiotických baktérií v potravinovom doplnku. Prítomnosť deklarovaných probiotických baktérií bola analyzovaná polymerázovou reťazovou reakciou (PCR) s DNA izolovanou zo vzorky potravinového doplnku pomocou magnetických nosičov.
|
|
|
Posouzení obvyklé ceny věcného břemene na trase vedení splaškové kanalizační sítě
Konečná, Jana ; Hlavinková, Vítězslava (oponent) ; Hrubanová, Michaela (vedoucí práce)
Diplomová práce se zabývá problematikou věcných břemen zatěžující nemovitosti v ČR. Cílem diplomové práce je na základě provedeného ocenění stanovit hodnotu věcného břemene a hodnotu rodinného domu zatíženého věcnými břemeny, zhodnotit a zdůvodnit případné znehodnocení nemovitosti zřízením věcných břemen. V teoretické části jsou vymezeny pojmy související s oceňováním nemovitostí, metody oceňování nemovitostí a pojmy z katastru nemovitostí. Poté následuje právní úprava věcných břemen, metody a postupy ocenění věcných břemen a ocenění nemovitostí s věcným břemenem. Praktická část se zabývá oceněním věcného břemene. Městský úřad ve Vyškově zrealizoval výstavbu obecní splaškové kanalizaci v místních částech Lhota a Rychtářov. Vedení kanalizace probíhá přes soukromé pozemky, a proto je s vlastníky dotčených pozemků zahájeno jednání o zřízení věcného břemene, které je po dohodě následně smluvně ošetřeno. Na závěr této části je shrnutí a porovnání ceny věcného břemene v roce 2011 a 2014. Dále je v praktické části oceňován rodinný dům v místní části Rychtářov. Na závěr práce je stanovena obvyklá cena rodinného domu a zhodnocení vlivu věcného břemene (služebnosti) na věc nemovitou.
|
|
|
Oceňování prací při pozemkových úpravách
Naňka, Martin ; Konečná, Jana (oponent) ; Tichá, Alena (vedoucí práce)
Cílem práce je komplexně popsat problematiku pozemkových úprav a zpracovat rozpočty plánů společných zařízení provedených v rámci pozemkových úprav. Pro jednotlivé plány společných zařízení budou zpracovány karty rozpočtových ukazatelů. Na závěr práce proběhne vyhodnocení zpracovaných rozpočtů a výsledných rozpočtových ukazatelů.
|
|
|
Hodnocení realizací protierozních a vodohospodářských zařízení v pozemkových úpravách
Konečná, Jana
Pozemkové úpravy jsou významným nástrojem pro realizaci protierozních a vodohospodářských zařízení. Tato mají polyfunkčnímu charakter a přispívají také ke zvýšení ekologické stability a estetiky zemědělské krajiny. Přestože proces pozemkových úprav neprobíhá s potřebnou intenzitou, přináší nepopiratelně pozitivní výsledky. Cílem disertační práce je posoudit intenzitu procesu pozemkových úprav v ČR se speciálním zaměřením na vyhodnocení jeho účinnosti v oblasti ochrany půdy a vody. Pro tento účel bylo vybráno 9 katastrálních území s nejméně jedním realizovaným protierozním nebo vodohospodářským zařízením. Jsou umístěny po celé České republice a reprezentují její rozmanité přírodní a antropické podmínky. Pro vyhodnocení účinnosti opatření ochrany půdy a vody v modelových územích byly použity unifikované metody.
|
|
| |
host ::
RSS.