|
|
Zátěžové zkoušky estradiolu a ethinylestradiolu
Mašková, Kateřina ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Aufartová, Jana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci králové Katedra analytické chemie Kandidát: Kateřina Mašková Školitel: PharmDr. Lucie Havlíková, Ph.D. Název diplomové práce: Zátěžové zkoušky estradiolu a ethinylestradiolu Diplomová práce se zaměřuje na provedení zátěžových zkoušek estrogenních hormonů 17β-estradiolu (estradiol) a 17α-ethinylestradiolu (ethinylestradiol). Obě látky byly vystaveny vlivům oxidace a kyselému a zásaditému pH po předem danou dobu za zvýšené teploty (70řC). Výsledky těchto zkoušek měly ukázat případný pokles či nárůst plochy píku estradiolu a ethinylestradiolu a tvorbu jejich degradačních produktů. Plochy píků a retenční časy degradačních produktů byly sledovány pomocí HPLC. Cílem práce bylo zjistit, jaké vlastnosti mají tyto hormony v zátěžových situacích, simulujících extrémní podmínky výroby, skladování, transportu a působení vnějších vlivů, charakterizovat degradační produkty a ověřit vhodnost metody pro jejich analýzu. Použitá metoda byla částečně validována ověřením parametrů linearity, správnosti a přesnosti. V experimentální části bylo zjištěno, že estradiol i ethinylestradiol jsou při zvýšené teplotě stabilní ve vodě i v acetonitrilu. Ani po 4 hodinách neměla tato rozpouštědla vliv na stabilitu obou látek. Estradiol byl poté vystaven vlivům 2% HCl a 2%...
|
|
|
Vývoj a validace HPLC metody pro stanovení nikotinu v ústním spreji a v náplních do elektronických cigaret
Maťátková, Marcela ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Marcela Maťátková Školitel: PharmDr. Lucie Havlíková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj a validace HPLC metody pro stanovení nikotinu v ústním spreji a v náplních do elektronických cigaret Cílem této diplomové práce byl vývoj a validace HPLC metody pro stanovení nikotinu v ústním spreji a v náplních do elektronických cigaret. Při vývoji se vycházelo z dostupných metod zabývajících se HPLC analýzou nikotinu a jeho příbuzné látky kotininu. Optimální podmínky byly nalezeny na koloně XTerra® MS C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 µm) s mobilní fází acetonitril : 10mM octan amonný pH 9 (20 : 80, v/v). Průtok mobilní fáze byl 1 ml/min, vlnová délka detektoru byla nastavena na 260 nm a jako vnitřní standard byl zvolen trimetoprim. Za těchto podmínek jsou nikotin, kotinin a trimetoprim odděleny do 5 minut. Při analýze ústního spreje a vybraných náplní do elektronických cigaret je stanovení kotininu rušeno pomocnými látkami v přípravcích. Vypracovaná HPLC metoda byla proto validována pouze pro stanovení nikotinu. Závěry z validace prokázaly, že tato metoda poskytuje přesné a správné výsledky a je tedy vhodná pro daný účel.
|
|
| |
|
|
Stanovení derivátů estrogenu metodou sekvenční injekční chromatografie
Kosařová, Lucie ; Chocholouš, Petr (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Lucie Kosařová Konzultant: PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Název rigorózní práce: Stanovení derivátů estrogenu metodou sekvenční injekční chromatografie Tato práce představuje první využití sekvenční injekční chromatografie s použitím monolitické kolony Merck® Chromolith® Performance RP-18e 100 mm × 3 mm s předkolonou Merck® Chromolith® RP-18e 5 mm × 3 mm o celkové délce 105 mm pro testování čtyř derivátů estrogenu blízkých svou strukturou a vnitřního standardu (etylparaben). K analýze byl použit komerčně dostupný systém SIChromTM (FIAlab® Instruments Inc., USA), mobilní fáze acetonitril:voda 40:60 (v/v) a CCD UV-VIS detektor se spektrofotometrickou detekcí při 225 nm. Pro jednu analýzu, která trvala 7,5 min, bylo použito 10 µl vzorku a 3 ml mobilní fáze. Bylo využito izokratické eluce a průtoková rychlost byla nastavena na 8 μl.s-1 . Chromatografické píky všech látek vykazovaly dobrou symetrii a rozdělení. Za výše uvedených podmínek bylo dosaženo vysoké účinnosti separace, což ukazuje další možné využití sekvenční injekční chromatografie v analytické chemii. Klíčová slova: sekvenční injekční chromatografie, monolitické kolony, estrogeny
|
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení výbušniny diazodinitrofenolu
Ihnát, Lukáš ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatinský, PhD. Názov diplomovej práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení výbušniny diazodinitrofenolu Bola vyvinutá a optimalizovaná HPLC metóda pre stanovenie diazodinitrofenolu spolu s pikraminanom sodným. Použitá kolóna bola Ascentis® Express C18 10cm x3mm; 2,7µm častice. Látky boli detekované UV spektrofotometrom pri 220 nm. Izokratická elúcia prebiehala s mobilnou fázou o zložení 0,085% H3PO4 a acetonitrilom v pomere 70/30. Prietok mal rýchlosť 0,8 ml/min. Termostat bol nastavený na 50řC. Retenčné časy pri týchto podmienkach boli: tDDNP=1,324 min a tPikNa=4,012 min. Kľúčové slová: stanovenie, pikraminan sodný, diazodinitrofenol, HPLC, chromatografia, dinol, DDNP
|
|
|
Studium vlivu složení mobilní fáze na selektivitu a retenci analytů na HILIC stacionárních fázích
Štětková, Kateřina ; Vlčková, Hana (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Kateřina Štětková Školitel: RNDr. Hana Vlčková, Ph. D. Název diplomové práce: Studium vlivu složení mobilní fáze na selektivitu a retenci analytů na HILIC stacionárních fázích Tato diplomová práce se zabývá vlivem koncentrace ACN, pH a koncentrace pufru v mobilní fázi na retenci a selektivitu kolon Atlantis HILIC Silica (3 μm, 2,1 mm x 100 mm) a Luna NH2 (3 μm, 2,0 mm x 100 mm). Ke studii bylo vybráno celkem 35 analytů, které zahrnují látky neutrální, bazické a kyselé. Detekce byla provedena pomocí PDA detektoru při vlnové délce 245 nm. Všechna měření probíhala za podmínek izokratické eluce při průtoku 0,4 ml.min-1 s využitím směsi acetonitril/voda (pufr) jako mobilní fáze. Teplota na koloně byla nastavena na 30 řC, teplota autosampleru na 4 řC a použitý nastřikovaný objem byl 2 μl. Pro vyhodnocení výsledků byly z naměřených hodnot sestrojeny grafy a tabulky, které sloužily k hodnocení kolon z hlediska selektivity a retence jednotlivých skupin analytů. Kolona Atlantis HILIC Silica vykazovala chování typické pro HILIC chromatografii, tj. retence stoupala se zvyšující se koncentrací ACN v mobilní fázi a to především od >85% ACN. Kolona Luna NH2 kromě HILIC chování navíc vykazovala silnou retenci...
|
|
|
Využití systému přepínání kolon v HPLC pro stanovení vybraných mykotoxinů ve vzorcích piva na českém trhu
Lhotská, Ivona ; Ramos, María Carolina Fernández (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Ivona Lhotská Školitel, konzultant: María Carolina Fernández Ramos, Ph.D, Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Využití systému přepínání kolon v HPLC pro stanovení vybraných mykotoxinů ve vzorcích piva na českém trhu Byla vytvořena nová, rychlá a citlivá metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie pro současné stanovení mykotoxinů ochratoxinu A a citrininu v pivu za použití přepínání kolon pro on-line úpravu vzorku. 100 µl piva bylo přímo dávkováno do systému. Izolace analytů z matrice piva proběhla na předkoloně Ascentis Express RP-C18 (5 x 4,6 mm, 2,7 µm) promýváním methanolem - 0,5% vodným roztokem kyseliny octové (30:70, v/v) o průtoku 2 ml/min po dobu 2 minut. Po přepnutí ventilu byly látky dále separované na chromatografické koloně Ascentis Express Phenyl-Hexyl (100 x 4,6 mm, 2,7 µm) mobilní fází o průtoku 1 ml/min ve složení acetonitril - 0,5% vodný roztok kyseliny octové (45:55, v/v). V čase 3 - 5,5 minuty lineárně narůstá gradient na 75:25. Chromatografická kolona byla temperována na 50řC. Fluorimetrická detekce byla nastavena na vlnové délky Ex 335 nm, Em 497 nm. Analýza jednoho vzorku včetně on-line úpravy trvá 6 minut. Limit kvantifikace této metody je 0,01 µg/l...
|
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení 6-gingerolu, kapsaicinu, 8-gingerolu, 6-shogaolu a 10 gingerolu ve vzorcích zázvorovníku lékařského
Urbanová, Martina ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Martina Urbanová Školitel: PharmDr. Lucie Havlíková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení 6-gingerolu, kapsaicinu, 8-gingerolu, 6-shogaolu a 10-gingerolu ve vzorcích zázvorovníku lékařského Diplomová práce byla zaměřena na vývoj HPLC metody pro stanovení 6-gingerolu, kapsaicinu, 8-gingerolu, 6-shogaolu a 10-gingerolu ve vzorcích zázvorovníku lékařského. Nejprve byly zvoleny vzorky z čerstvě připraveného oddenku zázvoru pravého. Dále byly hodnoceny hladiny analytů v modelových vzorcích sušeného Zázvoru mletého. Ve vzorcích oddenků zázvoru pravého i vzorcích sušeného Zázvoru mletého měl vždy nejvyšší odezvu 6-gingerol. Kapsaicin nebyl nalezen v žádném vzorku. 6-shogaol byl nalezen pouze ve vzorcích sušeného Zázvoru mletého. Extrakce ostatních látek závisely na způsobech přípravy jednotlivých vzorků. Během optimalizace metody bylo vyzkoušeno několik mobilních a stacionárních fází. Vhodnou mobilní fází byla mobilní fáze acetonitril - voda v poměru 50/50 (v/v). Zvolenou stacionární fází pro analýzu byla chromatografická kolona Ascentis® Express Phenyl-Hexyl (100 x 4,6 mm; 2,7 µm), která byla použita i pro částečnou validaci metody. Průtok mobilní fáze byl nastaven na 1 ml/min a...
|
|
| |
|
|
Využití UHPLC-MS/MS metody pro hodnocení vlivu ochucovadel na obsah katechinů v čajích a na matricové efekty
Pavlík, Jakub ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Jakub Pavlík Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph. D. Název diplomové práce: Využití UHPLC-MS/MS metody pro hodnocení vlivu ochucovadel na obsah katechinů v čajích a na matricové efekty Tato diplomová práce vychází z poznatků uveřejněných v časopise Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis [1], ve kterém je popsán výskyt matricových efektů v několika vzorcích ochucených čajových nálevů. Naměřené matricové efekty nebyly příliš vysoké (od -5.3 % do +10,4 %), stejně jako počet hodnocených vzorků. V rámci výzkumu v této diplomové práci k analýze komerčně dostupný čajů, přičemž se jednalo o čaj sáčkový (Pickwick) a sypaný (Basilur). Sypaný čaj byl použit pro tvorbu vlastních lépe definovaných směsí. Pro výzkum bylo použito 11 různých ochucovadel, která jsou běžně využívána. Jednalo se o: plod brusinky, list máty, plod šípku, citrónovou kůru, pomerančovou kůru, kořen zázvoru, květ růže, skořicovou kůru, citrónovou trávu, květ jasmínu a vanilku. Analýza probíhala na přístroji ACQUITY Ultra Performance LC (Waters) s kolonou - ACQUITY CSH C18 2,1 x 100 mm, 1,7 μm (Waters)a s využitím podmínek popsaných v článku [1]. Byl hodnocen obsah katechinů a matricové efekty, a to v ochucených i...
|
host ::
RSS.