|
|
Vývoj 3D sférických buněčných modelů odvozených od nádorových buněčných kultur vhodných pro studium fotodynamické terapie
Brieslingerová, Lenka ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Lenka Brieslingerová Školitel: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj 3D sférických buněčných modelů odvozených od nádorových buněčných kultur vhodných pro studium fotodynamické terapie Vzhledem k celosvětově narůstajícímu počtu nádorových onemocnění je stále velká snaha zefektivnit jejich léčbu. Běžně je testování nově vyvíjených léčiv prováděno na kulturách nádorových buněk rostoucích v monovrstvě. Použití 3D sféroidních modelů však poskytuje vhodnější způsob testování, jelikož tyto modely dokáží lépe napodobit vlastnosti in vivo nádorů a poskytnout tak reálnější odezvu na podaná léčiva. 3D sféroidní modely mohou být využity kromě testování nových cytostatik také jako nádorové modely pro studium účinku fotodynamické terapie (PDT), ač tento model stále není v tomto oboru příliš rozšířen. PDT je alternativní minimálně invazivní léčebná metoda nejen pro nádorová onemocnění. Využívá fotosenzitizéru (PS), molekulárního kyslíku (3 O2) a světla k tvorbě reaktivních forem kyslíku (ROS), které následně poškozují nádorovou tkáň. Tato práce se zabývala zhotovením 3D sféroidních buněčných kultur z HeLa buněčné linie, které byly následně použity k dalším pokusům, včetně PDT. Sféroidy byly...
|
|
|
Modulation of expression and activity of selected plant detoxifying enzymes by anthelmintics
Graňáková, Patrícia ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických vied Kandidát: Patrícia Graňáková Školiteľ: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Konzultant: RNDr. Radka Podlipná, Ph.D. Názov diplomovej práce: Modulácia expresie a aktivity vybraných detoxikačných enzýmov rastlín anthelmintikami Anthelmintické liečiva kontaminujúce životné prostredie predstavujú rizikový faktor pre necieľové organizmy zahrňujúce rastliny, ktoré s týmito liečivami prichádzajú do kontaktu na poliach prostredníctvom hnojenia hnojom od liečených zvierat alebo na pastvinách prostredníctvom exkrementov liečených zvierat. Po prijatí rastlinou môžu tieto látky zvyšovať produkciu reaktívnych druhov kyslíka, s čím súvisí riziko oxidačného stresu a poškodenia rastliny a taktiež môžu ovplyvniť antioxidačné enzýmy. Cieľom tejto práce bolo sledovať vplyv dvoch široko využívaných anthelmintík ivermektínu a fenbendazolu na aktivitu a expresiu vybraných antioxidačných enzýmov u Sóje fazuľovej (Glycine max). Sója bola vypestovaná v skleníku a zalievaná 10 µM roztokom vybraného liečiva. Zmena aktivity a génovej expresie antioxidačných enzýmov bola sledovaná vo vzorkách z koreňov, listov, strukov a semienok. Výsledky ukazujú, že obe anthelmintiká spôsobili signifikantný pokles aktivity superoxiddismutázy,...
|
|
|
Molekulární mechanismy rezistence nádorových buněk k protinádorové léčbě
Koropecká, Magdalena ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Ambrož, Martin (oponent)
Univerzita Karlova V Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Titul, jméno, příjmení kandidáta: Magdalena Koropecká Titul, jméno, příjmení školitele: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Název bakalářské práce: Molekulární mechanismy rezistence nádorových buněk k protinádorové léčbě Nádorová rezistence stále představuje nejčastější důvod selhání protinádorové léčby. Předkládaná bakalářská práce je rešerší odborných článků, zabývajících se jednotlivými mechanismy rezistence nádorových buněk k protinádorové léčbě. Detailně jsou zde popsány vybrané mechanismy, a to zvýšená inaktivace léčiva, změna terapeutického cíle, snížený příjem léčiva do buňky, zvýšený eflux léčiva z buňky, oprava poškozené DNA, inhibice buněčné smrti, epiteliálně-mezenchymální tranzice a metastázování a epigenetické vlivy. Studium a pochopení těchto mechanismů odehrávajících se v nádorových buňkách je zásadní volbu pro správné terapie a její úspěšnost.
|
|
|
Vztah mezi stavem kompenzace a renálními funkcemi u pacientů s diabetes mellitus II. typu
Vondráčková, Helena ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Bc. Helena Vondráčková Školitelka: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Specialista konzultant: MUDr. Pavel Pick Vztah mezi stavem kompenzace a renálními funkcemi u pacientů s diabetes mellitus II. typu Diabetes mellitus je chronické onemocnění doprovázené řadou komplikací. Mezi nejčastější a současně nejzávažnější patří onemocnění ledvin, které ve svém důsledku často vede až k jejich selhání. Tito pacienti jsou pak odkázáni na doživotní dialyzační léčbu nebo případnou transplantaci ledviny. Účinnou kompenzací diabetes mellitus lze rozvoj komplikací snížit nebo alespoň oddálit. K posouzení stavu kompenzace slouží hladina glukózy v krvi měřená nalačno a po jídle a hladina glykovaného hemoglobinu. Funkce ledvin posuzujeme dle vyšetření albuminu a proteinů v moči, koncentrace kreatininu v séru a odhad glomerulární filtrace. Cílem práce bylo zjistit, zda existuje vztah mezi úrovní kompenzace diabetes mellitus a funkcí ledvin. Byla vyhodnocena data od 70 pacientů s diagnózou diabetes mellitus II. typu pravidelně kontrolovaných v diabetologické poradně. Vzorky byly zpracovány na analyzátorech - G7 a BS 480 od firmy Medesa s.r.o. K vyhodnocení dat byla použita regresní analýza. Vztah mezi úrovní kompenzace...
|
|
|
Vliv vybraných bicyklických monoterpenů na aktivitu a expresi antioxidačních enzymů v lidských játrech
Křížová, Anna ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Uchazečka: Anna Křížová Školitelka: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv vybraných bicyklických monoterpenů na aktivitu a expresi antioxidačních enzymů v lidských játrech Monoterpeny jsou sekundární metabolity rostlin, které jsou díky své vůni a chuti využívány jako dochucovadla či aromata v potravinářství. Nenahraditelnou roli představují i v kosmetickém a farmaceutickém průmyslu. Jedná se o látky s širokým spektrem biologické aktivity. Vykazují například antimikrobiální, protizánětlivé, antioxidační, hypotenzní a analgetické účinky. Kromě pozitivních účinků těchto látek jsou známy i případy jejich toxického působení v různých orgánech, zejména v játrech. Monoterpeny mají také vliv na aktivitu a expresi antioxidačních enzymů. Cílem této práce bylo zjistit, jaký je vliv pěti vybraných bicyklických monoterpenů, (+)-kafru, (-)-kafru, (-)-fenchonu, kamfenu a (-)-α-thujonu, na aktivitu a expresi antioxidačních enzymů. Z těchto enzymů byly studovány glutathion-S-transferasa (GST), glutathionperoxidasa (GPx), glutathionreduktasa (GR), superoxiddismutasa (SOD) a katalasa (CAT). Nejprve byl hodnocen účinek monoterpenů v koncentraci 100 µM na aktivitu antioxidačních enzymů v subcelulárních frakcích...
|
|
|
Antiproliferativní a anthelmintické účinky extraktů z kapradin
Turoňová, Petra ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Petra Turoňová Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, PhD. Název diplomové práce: Antiproliferativní a anthelmintické účinky extraktů z kapradin Kapradiny patří mezi vyšší výtrusné cévnaté rostliny. V této práci byly zkoumány antiproliferativní a anthelmintické účinky extraktů vybraných druhů kapradin. Antiproliferativní účinky extraktů byly testovány na buněčné linii SW480. Jedná se o buněčnou linii původně získanou z primárního adenokarcinomu tlustého střeva. Anthelmintické účinky extraktů byly studovány na larvách L3 Haemonchus contortus, což je nejrozšířenější vnitřní parazit ovcí a koz. Pro zjištění antiproliferativní aktivity extraktů byl nejprve proveden úvodní screening více druhů kapradin o dvou koncentracích. Cytotoxicita byla vyhodnocena změřením absorbance na spektrofotometru Tecan. Čtyři druhy kapradin, které vykazovaly nejslibnější antiproliferativní aktivitu byly podrobeny testování ve třech časových intervalech a čtyřech koncentracích. Larvy L3 H. contortus byly vystaveny extraktům kapradin po dobu 7 dnů a pomocí mikroskopie bylo stanoveno procento vyvinutých larev L4 z celkového množství použitých larev stádia L3. Nejvyšší antiproliferativní a anthelmintickou aktivitu vykazovaly druhy...
|
|
|
ln vitro characterization of acetylcholinesterase modulators
Múčková, Ľubica ; Jun, Daniel (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent) ; Štětina, Rudolf (oponent)
Pro hodnocení toxicity látek a jejího mechanismu v počátečních fázích procesu vývoje nových chemických entit jsou dostupné různé in vitro přístupy. Tyto systémy se využívají hlavně pro účely screeningu a umožňují komplexně hodnotit toxikologické profily nově syntetizovaných sloučenin. Předkládaná práce je zaměřena na in vitro hodnocení látek modulujících aktivitu acetylcholinesterasy. Tento enzym sehrává klíčovou roli v nervovém systému a vyskytuje se především na cholinergních synapsích a neuromuskulárních spojích. Jeho hlavní biologickou rolí je terminace nervového impulzu na těchto synapsích, a to rychlou hydrolýzou neurotransmiteru acetylcholinu na cholin a acetát. Acetylcholinesterasa je cílovým enzymem pro mnohé léčivá, např. Na Alzheimerovu chorobu nebo jiná neurodegeneratívní onemocnění. Nejčastěji se používají její reverzibilní a pseudoreverzibilní inhibitory. Taktéž sehrává úlohu při otravách chemickými bojovými látkami ze skupiny nervově paralytických látek a organofosfátovými pesticidy. U těchto otrav se jako antidota využívají právě reaktivátory acetylcholinesterasy. Reaktivátory (asoxim, pralidoxim, obidoxim, trimedoxim, metoxim a oximy K027, K048, K074, K075 a K203) a inhibitory (pyridostigmin, galantamin, rivastigmin, donepezil, takrin, 7-metoxytkarin a 6-chlorotakrin)...
|
|
|
In vitro effects of 3-hydroxytyrosol on renal hypoxia and inflammation
Kamasová, Terézia ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Macháček, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických vied Kandidát: Terézia Kamasová Školitel: Doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Prof. Alice Santos-Silva Maria João Valente, Ph.D. Názov diplomovej práce: Účinky 3-hydroxytyrosolu na renální hypoxii a zánět in vitro Chronické zlyhanie obličiek je spôsobené heterogénnou skupinou ochorení postihujúcich obličky. Renálna hypoxia a hypoxiou-vyvolaný oxidatívny stres, renálna fibróza a zápal, sú veľmi častými sprievodnými javmi v postihnutej obličke, prispievajúcimi k zhoršovaniu chronického zlyhania obličiek. Látky rastlinného pôvodu sú neoddeliteľnou súčasťou modernej medicíny v terapií rôznych ochorení. 3-Hydroxytyrosol, fenolická zlúčenina získaná extrakciou z olív a olivových produktov ako napríklad olivový olej, je nositeľom silnej antioxidačnej, protizápalovej, antitrombotickej, baktericídnej a baktériostatickej aktivity. Cieľom tejto práce bolo stanoviť preventívny efekt 3-hydroxytyrosolu v renálnych bunkách a určiť jeho efekt na hypoxiou-vyvolaný zápal, oxidatívny stres a renálnu fibrózu a tak zhrnúť prínos tejto fenolickej zlúčeniny ako sľubného moderného terapeutického prístupu v liečbe chronického zlyhania obličiek. Na skúmanie efektu chemicky-indukovanej hypoxie a hypoxiou vyvolaného zápalu, oxidatívneho stresu,...
|
|
|
Účinek isomerů kafru na expresi biotransformačních enzymů v lidských jaterních buňkách
Smolíková, Michaela ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Ambrož, Martin (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemickýchvěd Kandidát: Bc. Michaela Smolíková, DiS. Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant:Mgr. Michaela Šadibolová Název diplomové práce: Účinek isomerů kafru na expresi biotransformačních enzymů v lidských jaterníchbuňkách Kafr je cyklický keton ze skupiny monoterpenů. V přírodě se vyskytují dva isomery kafru. V dnešní době se kafr využívá jako antiseptikum,analgetikum,rubefaciens i jakoprotizánětlivý přípravek. Kafr se užívá zejména v přípravcích pro lokální užití, kde působí mírným znecitlivujícím účinkem a pocitem tepla spolu s jeho charakteristicky pronikavou svěží vůní. Většina intoxikací kafrem je vyvolána nesprávným použitím či dávkováním.Cílem diplomové práce bylo zjistit účinekisomerů(+)-kafru a (-)-kafruna expresi vybraných enzymů I. i II. fáze biotransformace.Biologickýmmateriálembylyultratenké lidské jaterní řezypřipravené z tkáně celkem tří pacientů, dvou mužů a jedné ženy ve věkovém rozmezí 46 - 49 let. Jaterní řezy byly inkubovány s 10 µM a 50 µM (+)-kafrem a (-)-kafrem 24 hodin při 37řC. Proteinová exprese enzymů I. fáze (cytochromu P450 (CYP) 3A4, CYP2C, aldo-ketoreduktasy (AKR) 1C3) a II. fáze (glutathion-S-transferasy (GST) A) byla stanovena metodou western blotingu. Exprese mRNA enzymů I. fáze...
|
|
|
Protinádorová aktivita semisyntetických prenylflavonoidů v buněčné linii SW480
Blahová, Kateřina ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Skarková, Veronika (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Kateřina Blahová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Martin Ambrož, Ph.D. Název diplomové práce: Protinádorová aktivita semisyntetických derivátů prenylflavonoidů v buněčné linii SW480 Nádorová onemocnění patří mezi nejčastější příčiny mortality v rozvinutých zemích. V České republice je druhým nejčastějším nádorovým onemocněním kolorektální karcinom. Vzhledem ke vzniku rezistence na klasická cytostatika probíhá hledání nových léčebných strategií. Prenylflavonoidy patří mezi přírodní látky vykazující protinádorový účinek, často jsou zkoumány xanthohumol a prenylované deriváty naringeninu. V této diplomové práci byl testován protinádorový účinek naringeninu a pěti jeho prenylovaných semisyntetických derivátů v buněčné linii SW480, odvozené z kolorektálního karcinomu. Buněčná viabilita byla měřena pomocí testu s neutrální červení po 72 hodinách inkubace. U látek s výraznou protinádorovou aktivitou byla stanovena hodnota IC50, a pomocí průtokové cytometrie byl sledován vliv látek na buněčný cyklus. Výraznější antiproliferační účinek byl nalezen u čtyř látek (deriváty A, B, C a E), hodnoty IC50 těchto látek se pohybovaly v rozmezí 40,41 - 83,67 µM. Nejvyšší antiproliferační účinek...
|
host ::
RSS.