|
|
Antimikrobiální peptidy při infekcích gramnegativními bakteriemi
Tocháčková, Petra ; Jílek, Petr (vedoucí práce) ; Andrýs, Ctirad (oponent)
Bc. Petra Tocháčková Antimikrobiální peptidy při infekcích gramnegativními bakteriemi Diplomová práce - abstrakt Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Cílem práce je vypracování metodiky a stanovení možné genové aktivace antimikrobiálních peptidů (beta defensinů 1 a 2 - pBD1 a pBD2) v ileu při infekci gnotobiotických selat gramnegativními bakteriemi. Jako zástupce gramnegativních bakterií různé virulence byla zvolena Salmonela enterica serovar Typhimurium, kmen LT2 a její R mutanty (rfaG- a rfaL-). Metody: 1) Návrh systémů pro stanovení prasečích pBD1 a pBD2 (software), 2) Purifikace celkové RNA (komerční kolony), kvantifikace (spektrofotometricky) a odhad její čistoty (poměr A280/A260), 3) Reverzní transkripce (směs náhodných n- merů a oligo d(T)m), 4) Kvantifikace cDNA (polymerázová řetězová reakce v reálném - LNA sondy) a 5) Normalizace genového přepisu pro pBD1 a pBD2 vůči beta aktinu, cyklofilinu A nebo oběma kontrolním genům zároveň. Výsledky: Pro purifikaci celkové RNA a syntézu cDNA jsme použili metody, které snižují riziko kontaminace genomovou DNA a tím i falešně pozitivních výsledků. Navrhli jsme detekční systémy pro stanovení pBD1 a pBD2, jejichž efektivita byla okolo 100% (srovnatelná s efektivitami systémů pro kontrolní geny). Transkripce pBD1...
|
|
| |
|
|
Receptory pro nebezpečné vzory a prozánětové molekuly v pupečníkové krvi - vztah k histologické chorioamnionitidě
Mitášová, Eva ; Andrýs, Ctirad (vedoucí práce) ; Procházka, Martin (oponent) ; Ulčová-Gallová, Zdeňka (oponent)
Souhrn Pupečníková krev představuje nejčasnější možný hematologický vzorek plodu/novorozence bez nutnosti invazivního zákroku a bez jakýchkoliv rizik pro matku i dítě, který nám může během krátké doby poskytnout řadu informací o jeho klinickém stavu. Zvýšené koncentrace prozánětových markerů v pupečníkové krvi jsou pozorovány u předčasného porodu zkomplikovaného přítomným zánětem. Na základě tohoto zjištění jsme se rozhodli vyšetřit v pupečníkové krvi koncentrace interleukinu IL-6, IL-8, matrixové metaloproteázy 8 (MMP-8), pentraxinu 3, solubilního Toll-like receptoru 2 a solubilního scavenger receptoru pro hemoglobin (sCD163) a určit jejich vztah k intraamniální infekci. Unikátnost předkládané práce spočívá v identifikaci koncentrací sTLR2, sCD163, PTX3 a MMP-8 v pupečníkové krvi ve vztahu k IAI, které zatím nikdy nebyly zkoumány. Ukázalo se, že hladiny IL-6 a sCD163 v pupečníkové krvi novorozenců žen s předčasným odtokem plodové vody (PPROM) a s histologickou chorioamnionitidou (HCA) byly významně zvýšené ve srovnání se vzorky bez intraamniálního zánětu (IAI). Ve skupině pacientek s PPROM a s funisitidou byly signifikantně navýšené koncentrace IL-6, IL-8, MMP-8 a sCD163 v pupečníkové krvi oproti skupině pacientek bez známek zánětu. Naopak v hodnotách sTLR2 a PTX3 nebyly zaznamenány výrazné změny mezi...
|
|
| |
|
|
Vliv Goeckermanovy terapie na vybrané parametry imunity u pacientů s psoriázou
Kondělková, Kateřina ; Andrýs, Ctirad (vedoucí práce) ; Weigl, Evžen (oponent) ; Posová, Helena (oponent)
1 Souhrn Vliv Goeckermanovy terapie na vybrané parametry imunity u pacientů s psoriázou Psoriáza je systémová zánětlivá choroba s manifestací na kůži. Goeckermanova terapie (GT) představuje klasický přístup léčby psoriázy a je založena na denní aplikaci farmaceutického uhelného dehtu na zasaženou pokožku s následnou expozicí UV světla. Cílem této práce bylo sledovat vybrané imunologické markery a populace buněk u pacientů s psoriázou a zkoumat vliv GT na tyto parametry. Hodnotili jsme počty T regulačních lymfocytů (Treg), membránovou expresi vychytávacího receptoru CD163 na monocytech, hladiny solubilní CD163 (sCD163), membránovou expresi TLR2 a TLR4 na monocytech a solubilní TLR2 v séru (sTLR2). Imunofluorescenční analýza byla provedena na zlyzované periferní krvi pomocí průtokového cytometru FC500 Cytomics (Beckman Coulter) and FACSCalibur (Becton Dickinson). Hladina solubilních markerů byla stanovena pomocí ELISA kitů. Nenašli jsme žádné významné rozdíly v relativních počtech Treg lymfocytů v periferní krvi kontrolní skupiny a pacientů s psoriázou před zahájením léčby GT. Po GT došlo k výraznému vzestupu v relativním počtu Treg lymfocytů. V porovnání s hodnotami u kontrolní skupiny byly hodnoty jak CD163 tak sCD163 u pacientů s psoriázou před GT signifikantně vyšší. sCD163 byla u pacientů po terapii...
|
|
|
Vybrané faktory komplementového systému v diagnostice intraamniálního zánětu u pacientek s předčasným porodem spojeným s předčasným odtokem plodové vody
Sejkorová, Ilona ; Andrýs, Ctirad (vedoucí práce) ; Kopřivová, Kateřina (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Ilona Sejkorová Vedoucí rigorózní práce: prof. RNDr. Ctirad Andrýs, Ph.D. Název rigorózní práce: Vybrané faktory komplementového systému v diagnostice intraamniálního zánětu u pacientek s předčasným porodem spojeným s předčasným odtokem plodové vody (PPROM) Cíl: Cílem práce bylo stanovit koncentrace vybraných složek komplementu v plodové vodě u pacientek s těhotenstvím komplikovaným PPROM s ohledem na mikrobiální invazi do amniální dutiny (MIAC), intraamniální zánět (IAI) a intraamniální infekci. Mezi hodnocené biomarkery byla zařazena složka komplementového systému C8, terminální komplex komplementu (TCC) a regulační bílkovina komplementového systému protektin (CD59). Metody: Do studie bylo zařazeno 164 žen s jednočetným těhotenstvím komplikovaným PPROM. Vzorky plodové vody byly odebrány transabdominální aminocentézou. Koncentrace vybraných molekul byla stanovena pomocí imunoenzymatické reakce (ELISA). Přítomnost bakterií v plodové vodě byla stanovena pomocí polymerázové řetězové reakce, imunochromatograficky byla stanovena koncentrace interleukinu 6 v plodové vodě. Intraamniální zánět byl definován koncentrací IL-6 >745 pg/ml. Intraamniální infekce je charakterizována přítomností MIAC a...
|
|
|
Změny imunity indukované intraamniálním zánětem
Souček, Ondřej ; Andrýs, Ctirad (vedoucí práce) ; Lokaj, Jindřich (oponent) ; Šimetka, Ondřej (oponent)
Změny imunity indukované intraamniálním zánětem Abstrakt Intraamniální infekce hraje významnou roli v etiologii předčasného porodu a může vést k vážnému ohrožení zdraví plodu. Diagnostický přístup představuje přímý mikrobiologický průkaz infekčního agens či nepřímý průkaz pomocí stanovení rozličných biomarkerů, jejichž koncentrace se během intraamniální infekce zvyšuje. Vzhledem k povaze infekce probíhá stanovení těchto parametrů z plodové vody, což činí tuto diagnostiku náročnou pro lékaře i rodičku a rutinně nedostupnou. Disertační práce komentuje publikované výsledky vědeckého týmu, jehož cílem bylo vytipování vhodných markerů infekce, stanovení jejich koncentrace v plodové vodě a u pozitivních nálezů otestovat jejich diagnostický potenciál v cervikální tekutině, tedy v biologickém materiálu, jež může být odebrán neinvazivním způsobem. Vzorky plodové vody a cervikální tekutiny pocházely od žen s jednočetným těhotenstvím, které bylo ukončeno předčasným porodem, a které bylo u části kohorty komplikováno intraamniálním zánětem a infekcí. Bylo zjištěno, že z testovaných molekul je u intraamniální infekce statisticky vyšší koncentrace kalretikulinu, katepsinu G, CD11b, FcgammaBP a MIP1α v plodové vodě. V cervikální tekutině byla prokázána významně vyšší hladina FcgammaBP u pacientek s intraamniální infekcí...
|
|
|
COVID-19 v Domově ve Břevnici
Myslivcová, Lenka ; Andrýs, Ctirad (vedoucí práce) ; Jankovičová, Karolína (oponent)
Cílem této diplomové práce bylo popsat informace týkající se viru SARS-CoV-2 a koronavirové nemoci (COVID-19), zhodnotit průběh onemocnění v Domově se zvláštním režimem v Břevnici, kde nemoc proběhla na počátku první vlny pandemie COVID-19 na jaře roku 2020. Dalším cílem bylo provést analýzu protilátek a zhodnotit získaná data. Diplomovou práci jsem rozdělila do tří hlavních částí: teoretické, experimentální a diskusní. V teoretické části jsem pracovala s odbornou literaturou a popsala informace týkající se nejen nemoci COVID-19, ale i dalších závažných infekcí způsobených lidskými koronaviry. V experimentální části, kterou jsem vykonala v imunologické laboratoři Oddělení společných laboratoří v havlíčkobrodské nemocnici, jsem se zabývala problematikou klinického průběhu onemocnění, závažnosti onemocnění a případnými následky po prodělané infekci. Dále jsem se zabývala metodami pro stanovení protilátek, jejichž principy jsou popsány v kapitole 4.5 Použité diagnostické metody a postupy jsou popsány v kapitole 5.3 Laboratorní stanovení. Ze získaných dat jsem vypracovala grafy a tabulky a zpracovala data o klinickém průběhu infekce v břevnickém Domově, a to jak u klientů, tak u zaměstnanců postižených infekcí na jaře roku 2020. V diskusní části jsem shrnula zjištěná data s Domova v Břevnici a...
|
|
|
Senzibilizační profil u pacientů s respiračními formami alergického zánětu hodnocený pomocí multiplexové metody ISAC
Porubová, Petra ; Andrýs, Ctirad (vedoucí práce) ; Drahošová, Marcela (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Autor: Bc. Petra Porubová Vedoucí práce: prof. RNDr. Ctirad Andrýs, Ph.D. Název diplomové práce: Senzibilizační profil u pacientů s respiračními formami alergického zánětu hodnocený pomocí multiplexové metody ISAC Klíčová slova: alergický zánět, specifické IgE protilátky, molekulární alergeny, multiplexová metoda, ISAC Cíl: Cílem práce bylo zhodnocení senzibilizačního profilu u pacientů s alergickou rhinitidou a/nebo s astmatem bronchiale a zjištění možných rozdílů mezi pacienty s různou závažností onemocnění. Metody: Pro stanovení specifických IgE protilátek proti 112 alergenním komponentám byla využita metoda ImmunoCAP ISAC. Hodnocený soubor zahrnoval 152 pacientů (57,9 % žen) z alergologické ambulance Ústavu klinické imunologie a alergologie Fakultní nemocnice Hradec Králové. Výsledky: Nejčastějšími alergeny v daném souboru pacientů s respiračními formami alergického zánětu byly komponenty Phl p 1 (68,4 %) a Bet v 1 (65,1 %). Rozdíly v počtu pozitivních a negativních reakcí byly prokázány mezi pacienty s různou závažností alergické rhinitidy. Byly nalezeny korelace mezi počty pozitivních/negativních reakcí a závažností astmatu bronchiale. Nejvyšší hladiny specifických IgE byly naměřeny u komponent...
|
|
|
Bazotesty a lymfocytární transformační testy s vazbou na lékové intolerance
Honsárková, Tereza ; Krčmová, Irena (vedoucí práce) ; Andrýs, Ctirad (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Bc. Tereza Honsárková Školitel: prim. MUDr. Irena Krčmová, CSc. Název diplomové práce: Bazotesty a lymfocytární transformační testy s vazbou na lékové intolerance Bazotesty a lymfocytární transformační testy jsou vyšetření, která napomáhají komplexní diagnostice pacienta se suspekci lékové alergie. Správná diagnostika je důležitá pro volbu vhodného opatření, má však svá úskalí. Léková alergie je nejčastěji spojována s β-laktamy, především s peniciliny. Hlavním cílem diplomové práce bylo vypracování aktuální statistiky na základě dokumentace vybraného souboru pacientů. Jednalo se o nemocné, kteří byli kompletně klinicky a laboratorně vyšetřeni. Hlavní podmínkou výběru bylo provedení kožních testů pro suspekci na lékovou alergii indikovanou antibiotiky penicilinové řady za rok 2017 na ambulanci Ústavu klinické imunologie a alergologie Fakultní nemocnice Hradec Králové. Byla zpracována jejich data týkající se anamnézy, laboratorních vyšetření se zaměřením na bazotesty a lymfocytární transformační testy a také výsledky kožních testů. Zpracování dat 25 pacientů poukázalo na přínosné nálezy. Zajímavým zjištěním byl fakt, že v anamnéze pacientů převládá výskyt pozdních projevů (63 %). Při statistickém...
|
host ::
RSS.