|
|
Úloha Akt / protein kinázy B ve zdravém a hypertrofovaném srdci
Heleš, Mário ; Žurmanová, Jitka (vedoucí práce) ; Hrdlička, Jaroslav (oponent)
Protein kináza B, neboli Akt kináza je exprimována téměř ve všech tkáních. V srdci jsou zastoupeny převážně dvě izoformy Akt1 a Akt2, které jsou zodpovědné za regulaci metabolismu, růstu kardiomyocytů a jejich přežití. Akt kináza je mimo jiné stimulována signálními dráhami inzulínového receptoru a mechanoreceptorů a mezi její cíle, patří hlavně mTORC1, AMPK a GSK-3β. Akt je aktivována v případě chronického hemodynamického přetížení srdce. V závislosti na intenzitě a délce trvání zátěže se Akt a podílí buď na adaptační hypertrofii srdce, která je zcela reverzibilní, anebo na detrimentální nevratné formě hypertrofie, která poškozuje čerpací funkci srdce a může vést k srdečnímu selhání. Vedle Akt kinázy se na hypertrofii srdce podílí mnoho dalších faktorů, jejichž vzájemné interakce jsou vysoce komplexní. Klíčová slova: srdce, hypertrofie, Akt/protein kináza B, remodelace srdce, inzulínu podobný růstový faktor
|
|
| |
|
|
Genová exprese enzymů zapojených v regulaci apoptózy v myokardu potkana - vliv chronické a akutní hypoxie
Blahová, Tereza ; Žurmanová, Jitka (vedoucí práce) ; Kalous, Martin (oponent)
Adaptace na chronickou hypoxii zvyšuje odolnost srdce k ischemicko-reperfúznímu (IR) poškození. Kardioprotektivní účinky adaptace jsou závislé na intenzitě hypoxie, délce jejího trvání a denním režimu adaptace. Bylo prokázáno, že některé protektivní režimy adaptace na hypoxii aktivují proapoptotické signální dráhy. Výzkumy posledních let ukazují, že na regulaci apoptózy v srdci se mohou podílet i bioaktivní molekuly sfingolipidů. Cílem této práce bylo stanovit expresi mRNA transkriptu vybraných genů apoptotických drah a genů metabolismu sfingolipidů. Použili jsme dva hypoxické modely, kontinuální normobarickou hypoxii (CNH, 10% O2) v různých časových intervalech (4h, 48h, 120h, 21 dní), kde jsme analyzovali pravou a levou komoru (RV, LV) a intermitentní hypobarickou hypoxii (IHH, 7000 m, 8h/denně), kde byla analyzovaná pouze LV. Zjistili jsme, že CNH zvyšuje expresi proapoptotických genů převážně v RV a IHH v LV. Dále, v protektivních hypoxických režimech byla aktivace exprese proapoptotických genů doprovázena zvýšením exprese enzymů produkujících protektivní druhy sfingolipidů. Objasnění přesné úlohy apoptózy a signálních molekul sfingolipidů v endogenní protekci myokardu však vyžaduje další výzkum. Klíčová slova: apoptóza, sfingolipidy, hypoxie, myokard, Real time PCR, BioMark HD System...
|
|
|
Vliv chronické hypoxie na antioxidační kapacitu myokardu potkana.
Závišková, Kristýna ; Nováková, Olga (vedoucí práce) ; Žurmanová, Jitka (oponent)
Adaptace na chronickou hypoxii aktivuje endogenní signální dráhy vedoucí ke zvýšené odolnosti srdce k akutnímu ischemicko/reperfúznímu (I/R) poškození. Molekulární mechanismus tohoto jevu není zatím zcela objasněn. Bylo však prokázáno, že se v signální dráze kardioprotekce indukované chronickou hypoxií uplatňují reaktivní formy kyslíku (ROS), jejichž zvýšená hladina musí být přísně regulována antioxidačním systémem buňky. Cílem diplomové práce bylo sledovat vliv intermitentní hypobarické hypoxie (IHH, 7 000 m) na relativní zastoupení antioxidačních enzymů (peroxiredoxin 6 - PRX6, thioredoxin 1 a 2 - TRX1 a TRX2, thioredoxinreduktáza 1 - TRXR1) a rovněž enzymů metabolismu železa (hemoxygenáza 1 a 2 - HO1 a HO2, akonitáza 1 a 2 - ACO1 a ACO2), které se podílí na regulaci redoxního stavu buňky. Současně jsme stanovili vliv adaptace na IHH a antioxidantu tempolu na relativní množství na kalciu nezávislé fosfolipázy A2 (iPLA2). iPLA2 se jednak podílí na odstraňování peroxidovaných mastných kyselin z membránových fosfolipidů, na druhou stranu za I/R podmínek buňku spíše poškozují. Všechny enzymy byly stanoveny metodou Western blot v homogenátu z normoxického a na IHH adaptovaného myokardu levé komory potkana. Zjistili jsme, že se po adaptaci na IHH snižuje relativní množství PRX6 a naopak se zvyšuje množství TRX1...
|
|
|
Farmakologické a metabolické ovlivnění funkce jaterních mitochondrií
Sobotka, Ondřej ; Červinková, Zuzana (vedoucí práce) ; Kuncová, Jitka (oponent) ; Žurmanová, Jitka (oponent)
Souhrn Jaterní mitochondrie hrají centrální úlohu v hlavních metabolických cestách lidského organismu. V této práci jsme studovali farmakologické ovlivnění jejich funkce in vitro pomocí dvou nových protinádorových léků: 3-brompyruvátu a α-tokoferylsukcinátu. Metabolické ovlivnění funkce jaterních mitochondrií bylo navozeno in vivo na potkanech krmených dietou s vysokým obsahem mastných kyselin a cholesterolu. Toxicita 3-brompyruvátu in vitro byla hodnocena v primárních kulturách hepatocytů potkana a myši. Účinek nových protinádorových léků na jaterní mitochondrie byl studován v suspenzi mitochondrií, homogenátu nebo permeabilizovaných buněk. Ke zhodnocení farmakologického a metabolického vlivu na mitochondriální funkce jater bylo využito respirometrie s vysokým rozlišením. 3-brompyruvát způsoboval morfologické i funkční postižení hepatocytů v kultuře. Toto poškození bylo doprovázeno zvýšenou tvorbou reaktivních forem kyslíku a poruchou mitochondriálních funkcí. 3-Brompyruvát snižoval konzumpci kyslíku mitochondrií energizovaných substráty pro komplexy I a II. α-Tokoferylsukcinát inhiboval sukcinát-dependentní respiraci jaterních mitochondrií. Stupeň inhibice byl závislý na použitém experimentálním modelu a na respiračním stavu. Nejvíce citlivé k účinkům α-tokoferylsukcinátu byly izolované mitochondrie v...
|
|
|
Cardioprotective effect of adaptations to hypoxia and cold: Connexin 43 and hexokinase 2
Kohútová, Jana ; Žurmanová, Jitka (vedoucí práce) ; Radošinská, Jana (oponent) ; Barančík, Miroslav (oponent)
Ventrikulárne arytmie sú hlavnou príčinou úmrtí v celosvetovom meradle. Zvýšený výskyt arytmií v srdci cicavcov je sprevádzaný remodeláciou bunkovej distribúcie gap junction kanálov tvorených hlavne konexínom 43 (Cx43). V poslednej dobe sa preukazuje významný vplyv mitochondrií a ich asociácia s arytmogenézou. Za rôznych patologických stavov dochádza k zmene v expresii a/alebo distribúcii Cx43 v závislosti na fosforylačnom stave. Taktiež dochádza k zmene asociácie hexokinázy s mitochondriami, ktorá tak znižuje pravdepodobnosť aktivácie apoptózy. Adaptácia na intermitentnú hypobarickú hypoxiu potencuje endogénne ochranné cesty redukujúce výskyt ventrikulárnych arytmií, zatiaľ čo kontinuálna normbarická hypoxia tento efekt nemá. Ďalším študovaným modelom je aklimatizácia na chlad, ktorá je známa priaznivými účinkami na ľudské zdravie už niekoľko desaťročí. Avšak štúdie na srdci na týchto modeloch vo vzťahu ku Cx43 chýbajú. Naším cieľom bolo určiť expresiu Cx43, fosforylovaného Cx43 (p-Cx43) a hexokinázy (HK1, HK2), a ich distribúciu v kardiomyocytoch. Okrem toho bola analyzovaná expresia Cx43 upstream kináz, proteínkinázy A, proteínkinázy G, kazeínkinázy 1 v normoxických a hypoxických ľavých komorách potkanov spolu s distribúciou Cx43 počas krátkej ischémie a reperfúzneho poškodenia. Samce potkanov...
|
|
|
The role of adipose tissue in the whole-body energy metabolism in mice with different genetic background
Funda, Jiří ; Janovská, Petra (vedoucí práce) ; Pecina, Petr (oponent) ; Žurmanová, Jitka (oponent)
(in Czech) Tuková tkáň značně přispívá k udržování celotělové energetické homeostázy. Bílá tuková tkáň je nejdůležitějším úložištěm metabolické energie, zatímco hnědá tuková tkáň přeměňuje metabolickou energii na teplo a tím umožňuje organizmu přežít v chladném prostředí. Bílý i hnědý tuk zastávají zásadní úlohu v kontrole celotělových hladin mastných kyselin, což je nezbytné pro udržování energetické homeostázy a pro ochranu ostatních tkání před lipotoxickým poškozením. Nadbytečné ukládání lipidů může vést k rozvoji obezity, což je často spojeno s poškozením metabolických funkcí tukové tkáně a s metabolickými poruchami, jako je diabetes 2. typu. Zdravá tuková tkáň chrání před rozvojem metabolických poruch spojených s obezitou tím, že ukládá nadbytečné živiny a reguluje jejich hladiny. Klíčovými procesy pro účinnou regulaci hladin mastných kyselin jsou prázdné metabolické cyklování mezi triacylglyceroly a mastnými kyselinami (TAG/MK cyklování) a oxidace mastných kyselin. Tyto procesy probíhají v bílém i ve hnědém tuku a jejich obrat je z velké části ovlivněn transkripčními regulátory, zejména jadernými receptory PPAR a jejich koaktivátory. Bioaktivní molekuly jako jsou hormony, polynenasycené mastné kyseliny (PUFA) nebo léčiva, například thiazolidinediony (TZD) mohou ovlivňovat aktivitu...
|
|
|
Úloha beta 1 adrenergních receptorů v srdci chladově adaptovaného potkana
Liptáková, Andrea ; Žurmanová, Jitka (vedoucí práce) ; Nováková, Olga (oponent)
V průběhu chladové adaptace dochází k posunu v produkci tepla od třesové termogeneze k netřesové termogenezi, která je zprostředkována adrenergní signalizací. Bylo též pozorováno, že chladová adaptace zvyšuje odolnost organismu vůči patologickým podnětům a může ovlivnit funkční parametry kardiovaskulárního systému. Avšak akutní expozice velkému chladu je často spojována s detrimentálními účinky na organismus. Nedávno jsme ukázali, že chronická expozice chladu zvyšuje odolnost srdce k ischemicko-reperfúznímu poškození bez negativních vedlejších účinků, pokud použijeme mírné teploty, avšak mechanismus protekce není dosud znám. Cílem této práce bylo zjistit: i) zda se mění citlivost srdce k ischemii již po prvním dni chladové expozice a nevykazuje případné negativní účinky, ii) zda β1-adrenergní signalizace hraje úlohu v kardioprotekci vyvolané chronickým chladem. Výsledky této práce ukázaly, že i) jednodenní expozice mírnému chladu nemění citlivost srdce k ischemii a ii) podání metoprololu snížilo velikost infarktu u kontrolní skupiny, avšak nemělo vliv na srdce chladově adaptovaných potkanů. Klíčová slova: Srdce, potkan, beta 1 adrenergní receptory, chladová adaptace
|
|
|
Úloha metabolismu laktátu v ischemicko-reperfúzním poškození srdce potkana adaptovaného na chronickou hypoxii
Kolář, David ; Žurmanová, Jitka (vedoucí práce) ; Nováková, Olga (oponent)
Adaptace na hypoxii je známý fenomén, který zvyšuje odolnost myokardu k ischemicko-reperfúznímu (I/R) poškození, podobně jako přiměřená fyzická zátěž, která zlepšuje kontraktilní funkce srdce. Laktát je významným energetickým substrátem pro srdeční sval při fyzické zátěži a v hypoxii. Metabolizmus laktátu byl a stále je spojován se svalovou únavou, avšak v posledním desetiletí se uvažuje o jeho významné modulační funkci metabolismu při zátěži na úrovni buněčné i celého organismu. Bylo prokázáno, že jeho účinky mohou být obdobné jako působení hypoxie a jeho oxidovaná forma, pyruvát, má kardioprotektivní účinky. Cílem této práce bylo porovnat expresi izoforem laktátdehydrogenázy LDHA a LDHB v levé a pravé komoře srdeční v kardioprotektivním režimu adaptace na hypoxii. Dalším cílem bylo zjistit odpověď levé komory na I/R inzult na modelu perfundovaného srdce adaptovaného na hypoxii ve srovnání s normoxickými kontrolami na úrovni exprese obou LDH izoforem. Naše výsledky ukázali rozdíly v levé i pravé komoře u LDHA izoformy a zvýšenou odpověď levé komory na I/R inzult u potkanů adaptovaných na hypoxii na úrovni exprese obou izoforem. Klíčová slova: srdce, hypoxie, metabolismus, laktát, monokarboxylový transportér, hypoxií inducibilní faktor, laktátdehydrogenáza, laktátový výměník
|
|
|
Calcium homeostasis and modulation of nociceptive synaptic transmission
Sojka, David ; Paleček, Jiří (vedoucí práce) ; Žurmanová, Jitka (oponent) ; Krůšek, Jan (oponent)
3 transient induced by control dorsal root stimulation. Using this model together with transgenic labeling of specific neuronal populations could be useful in the future, especially for pharmacological testing of new analgesic drugs. SOUHRN PRÁCE Předkládaná disertační práce má za cíl přispět k objasnění míšních mechanismů nocicepce. Jedním z důležitých mechanismů podílejících se na vzniku a průběhu řady chronických bolestivých stavů je tzv. centrální sensitizace. Jedná se o formu dlouhodobé modulace synaptického přenosu na míšní úrovni, neboli synaptické plasticity. Tato studie se ve své hlavní části zabývá vývojem metody, která by s využitím techniky Ca imagingu umožnila studovat mechanismy centrální sensitizace in vitro na populaci neuronů zadního míšního rohu. V pokusech provedených na akutních míšních řezech jsme snímali změny fluorescence u Ca-senzitivní sondy FLUO-4 v neuronech zadního míšního rohu. Analýza změn intracelulární koncentrace Ca, ke kterým docházelo během synaptického přenosu vyvolaného stimulací zadního kořene míšního, odhalila dva odlišné typy Ca odpovědí. První typ odpovědi byl synchronizovaný s elektrickou stimulací, zatímco druhý typ, odpovídající uvolnění Ca z vnitřních Ca zdrojů, následoval po určité časové prodlevě po stimulaci. Tyto pozdní Ca odpovědi, nezávislé na aktivaci...
|
host ::
RSS.