|
|
Role signálních drah a redoxních dějů v biologii nádorových buněk
Vališ, Karel ; Kovář, Jan (vedoucí práce) ; Anděra, Ladislav (oponent) ; Kozubík, Alois (oponent)
4 Souhrn Specifická indukce apoptózy v nádorových buňkách představuje nadějný způsob protinádorové terapie, který je současně netoxický pro zdravé tkáně. Z tohoto důvodu je důležité pátrat po molekulárních cílech schopných specificky indukovat apoptózu v nádorových buňkách, neboť ty mohou otevřít cestu k novým a efektivním protinádorovým terapiím. Jedním z nadějných cílů se jeví metabolismus nádorových buněk (1) a to zejména metabolismus mitochondriální (2). Mitochondrie jsou organely zásadní pro život buňky, ale současně mohou aktivovat buněčnou smrt, která je často spojená se zvýšenou produkcí volných kyslíkových radikálů (ROS; reactive oxygen species). V této práci jsme identifikovali analogy vitamínu E jako inhibitory komplexu II a potentní induktory mitochondriálních ROS v nádorových buňkách in vitro i in vivo. Dále jsme prokázali aktivaci konzervované Hippo/Mst1 kinázy účinkem analogů vitamínu E, která má za následek translokaci FoxO1 proteinu do jádra, transaktivaci NOXA genu, aktivaci Bak proteinu, permeabilizaci mitochondrií a aktivaci apotózy. Dále jsem pátrali po membránových proteinech jejichž exprese je aktivována v nádorových buňkách během deprivace železa, neboť tyto proteiny mohou hrát důležitou úlohu v metabolismu železa nádorových buněk, který se jeví jako efektivní cíl protinádorové...
|
|
|
Role onkogenu erbB-2 v biologii rakovinných kmenových buněk
Prokopová, Kateřina ; Neužil, Jiří (vedoucí práce) ; Anděra, Ladislav (oponent)
Nedávné výzkumy ukazují na přítomnost minoritní frakce nádorových buněk, která vykazuje určité "kmenové" vlastnosti. Tyto tzv. rakovinné kmenové buňky (RKB) se vyznačují relativně vyšší odolností k léčbě, tradičně zaměřené na diferencované a rychle se dělící buňky a proto mohou být příčinou relapsů nádorových onemocnění. RKB sdílejí specifickou expresi genů a deregulaci signálních drah. Jednou ze známých deregulací je zvýšená exprese receptoru erbB-2 (HER2), vyskytující se u ~25-30% případů rakoviny prsu. Zvýšená exprese erbB-2 receptoru je spojená se špatnou prognózou, zvýšeným proliferačním potenciálem a s rezistencí vůči chemoterapii. Dle nedávných výzkumů se při zvýšení hladiny erbB-2 zvyšuje i procento RKB v populaci nádorových buněk. V této diplomové práci jsme jako model RKB rakoviny prsu in vitro studovali tzv. mammosféry, rostoucí v médiu bez obsahu séra, do něhož jsou buňky postupně převáděny. Tyto buňky jsou CD44+ , vyznačují se zvýšenou expresí ABCG-2, Sox-2, Vimentinu a také vysokými hladinami erbB-2. Dále jsme připravili stabilní linii MCF7 buněk se sníženou hladinou erbB-2 pomocí shRNA plazmidu. V erbB-2- buňkách jsme charakterizovali expresi sady markerů RKB a sledovali schopnost těchto buněk iniciovat tvorbu nádoru v nahé myši pomocí ultrazvuku. Klíčová slova Rakovinné kmenové...
|
|
|
Immunogenní smrt nádorových buněk způsobená volným a na polymer navázaným doxorubicinem
Kabešová, Martina ; Kovář, Lubomír (vedoucí práce) ; Anděra, Ladislav (oponent)
Imunogenní smrt nádorových buněk způsobená volným a na polymer navázaným doxorubicinem Polymerní vodorozpustné nosiče léčiv založené na N-(2-hydroxypropyl)methakrylamidu (HPMA) byly vyvinuty tak, aby omezily nežádoucí vedlejší účinky volných, systémově působících cytostatických léčiv. Konjugáty na bázi HPMA se samy pasivně akumulují v nádorové tkáni díky efektu zvýšené propustnosti nově vznikajících cév a omezené tvorbě lymfatické drenáže v nádoru (EPR, Enhanced Permeability and Retention Effect). Aktivní akumulace můžeme docílit tím, že na polymerní kostru navážeme směrující strukturu, která rozpoznává nádorově specifický ligand. Konjugace volného doxorubicinu na polymerní nosič HPMA podstatně snižuje jeho nespecifické vedlejší účinky in vivo při zachování efektivního protinádorového účinku in vitro a in vivo. Mimo přímé cytotoxické účinky na nádorové buňky mají HPMA kopolymery s doxorubicinem i imunostimulační vlastnosti a dokážou navodit dlouhodobou protinádorovou imunitu u léčených myší Nedávné studie ukázaly, že volný doxorubicin indukuje v nádorových buňkách imunogenní apoptózu. Takto zabité buňky umírají buněčnou smrtí, která nese charakteristické znaky apoptózy, ale jsou schopny aktivovat imunitní systém a vyvolat tak protinádorovou imunitní reakci. Tento jev byl popsán jako klíčový pro...
|
|
| |
|
|
Promyelocytic leukemia protein function in normal, tumor and senescent human cells
Rossmeislová, Lenka ; Hozák, Pavel (vedoucí práce) ; Forstová, Jitka (oponent) ; Anděra, Ladislav (oponent)
Protein promyelocytární leukémie (PML) gen kóduje jaderný protein lokalizovaný do nukleoplasmy. PML je nyní považováno za gen s tumor-supresivními vlastnostmi, protože je funkčně propojen s mnoha funkcemi, ovlivňujících jadernou buněčnou proliferaci, apoptózu a stárnutí. Předkládaná práce je součástí širšího projektu, jehož cílem je objasnit regulaci exprese promyelocytární leukémie proteinů a zkoumá roli PML bílkovin v buněčné stárnutí. Konkrétní cíle PhD. projektu bylo vyhodnocení nových in vitro modelů pro studium PML, objasnění vlivu inhibitorů histon deacetyláz PML na expresi genů.
|
|
|
Role of DD- and DED-containing adaptor proteins in apoptotic signaling
Čaja, Fabián ; Janštová, Vanda (oponent) ; Anděra, Ladislav (vedoucí práce)
Proteíny obsahujúce zväzok šiestich antiparalelných α-helixov, tzv. doménu smrti (death domain, DD) a jej podobné domény (DED, CARD), patria k významným regulátorom apoptotickej signalizácie. Zaraďujeme medzi ne povrchové receptory z rodiny TNFR, ktoré prijímajú proapoptotický signál, ale aj adapterové proteíny a ďalšie enzýmy ako proteíny a kinázy. Tieto receptory nazývané "receptory smrti" interagujú s adapterovými proteínmi obsahujúcimi DED alebo DD, ktoré následne prenášajú signál na iniciačné kaspázy a tie aktivujú ďalšie zložky apoptotickej signalizačnej kaskády. DEDs a DDs sú súčasťou aj ďalších proteínov, ktoré regulujú aktiváciu kaspázovej signalizácie alebo sa zúčastňujú iných neapoptotických signalizácií. Ako bolo popísané na viacerých experimentálnych modeloch, defekty a deregulácie proteínov obsahujúcich DDs a DEDs sú často veľmi závažné až letálne. Najčastejšie sa prejavujú nádorovým bujnením, imunodeficienciami, poruchou správneho vývoja mnohých orgánov a v neposlednom rade aj poruchami expresie určitých génov.
|
|
|
TRAIL-induced Apoptosis in Populations of Colon Cancer Cell Lines under Various Cultivation Conditions
Nevařil, Leonard ; Anděra, Ladislav (vedoucí práce) ; Neužil, Jiří (oponent)
Tumor Necrosis Factor-Related Apoptosis Inducing Ligand (TRAIL) is a cytokine of TNF family, which participates in the non-exclusive regulation of survival and proliferation of mainly hematopoietic cells. Shortly after its discovery it also brought significant attention as specific and potent inducer of apoptosis of cancer cells of various origins, and since then it has been investigated as a potential novel anti-tumor therapeutics. Recently, cancer stem cells (CSCs) were suggested to be a distinct subset of tumor cells that could be responsible at least in some tumors for their sustainment, recurrence and drug resistance. These cells in the "hierarchic" model of tumorigenesis thus represent an important and attractive target for efficient tumor therapy. In this study we use several colorectal adenocarcinoma cell lines as an experimental model for the analysis of CSC-prone cultivation conditions on TRAIL-induced apoptosis of these cells. For enrichment of eventual cancer stem cells we cultivated cell lines in a serum-free medium, originally developed for cultivation of neural stem cells, and assessed the expression of putative CSC markers CD133 and ABCG2 by flow cytometry (FACS). Simultaneously, we tested the expression of TRAIL receptors and susceptibility to TRAIL-induced apoptosis in these cells. We...
|
|
| |
|
| |
|
| |
host ::
RSS.