|
|
Struktura a reaktivita aniontů aromatických uhlovodíků
Obluková, Michaela ; Čabala, Radomír (vedoucí práce) ; Jašík, Juraj (oponent)
Tato bakalářská práce se zabývá výzkumem reaktivity aniontů aromatických uhlovodíků, vyskytujících se v ionosféře Titanu - měsíce Saturnu. K experimentu byla použita metoda tandemové hmotnostní spektrometrie s elektrosprejovou ionizační technikou, kvadrupólovým hmotnostním analyzátorem a kolizní celou. Cílem bylo přispět k celkovému poznání procesů probíhajících v ionosféře Titanu. Konkrétně byla provedena experimentální studie, jak z kyseliny ftalové, isoftalové a tereftalové vytvořit příslušné isomery benzyn anion radikálů (o-, m-, p- C6H4˙- ), a bylo prozkoumáno, jakým způsobem reagují s vybranými neutrálními plyny v kolizní cele (C2H2, HC3N, CH3CN, SO2, O2).
|
|
|
Vývoj a optimalizace SPE metody pro prekoncentraci a stanovení fluorotelomerních alkoholů ve vodách
Ševčík, Václav ; Čabala, Radomír (vedoucí práce) ; Feltl, Ladislav (oponent)
V této práci byla vyvinuta a pokročilými statistickými metodami optimalizována GC metoda s hmotnostní detekcí a SPE prekoncentračním krokem pro stanovení fluorotelomerních alkoholů ve vodných vzorcích. Jako analyty byly zvoleny 1H,1H,2H,2H- perfluoro-1-oktanol (6:2 FTOH) a 1H,1H,2H,2H-perfluoro-1-dekanol (8:2 FTOH). V průběhu optimalizace metody pro GC byl současně testován vliv faktorů, jako je objem vzorku, tlak nosného plynu, počáteční teplota analýzy, čas dávkování vzorku a teplota injektoru na velikost odezvy. Pomocí statistického programu Minitab 16 a série měření byla nalezena optima významných faktorů a vhodný druh ionizace pro oba analyty. Limity detekce GC-MS metody jsou 0,24 ng/mL pro 6:2 FTOH a 0,42 ng/mL pro 8:2 FTOH. Pro SPE prekoncentraci byly testovány faktory jako druh kondicionačního činidla a jeho objem, rychlost kondicionace, rychlost průtoku vzorku, způsob sušení kolony, druh elučního činidla a jeho objem. Pomocí programu Minitab 16 byly určeny optimální hodnoty těchto faktorů. Sledováním závislosti výtěžku extrakce SPE na objemu a koncentraci zásobního roztoku bylo pro stanovení fluorotelomerních alkoholů za daných experimentálních podmínek určeno omezení maximálního objemu vzorku (400 mL) a minimální koncentrace roztoku (100 pg/mL).
|
|
|
Optimalizace podmínek derivatizace mastných a perfluorovaných organických kyselin methylchlormravenčanem
Hložek, Tomáš ; Čabala, Radomír (vedoucí práce) ; Feltl, Ladislav (oponent)
Statistickými metodami určenými pro optimalizace byly hledány a nalezeny optimální experimentální podmínky derivatizace jak perfluorovaných organických kyselin, PFA (C8, C10 ,C12), a mastných kyselin, FA (C8, C12, C14), tak i experimentální podmínky jejich derivatizace ve směsi. Pro všechny studované kyseliny byly proměřeny kalibrace a účinnost extrakce z acetonitrilu do heptanu. Z původní sady experimentálních parametrů byl metodou Plackett-Burmana proveden jejich screening a významné parametry byly podrobeny optimalizaci metodou CCD, zahrnující efekty druhého řádu a interakce mezi jednotlivými parametry. Byla nalezena optima podmínek derivatizace jednak samostatných FA a PFA, tak i pro jejich směsi. Principem hledání experimentálních podmínek derivatizace, kdy by bylo možno selektivně derivatizovat jednu ze skupiny kyselin, bylo hledání optima pro součet nebo rozdíl jejich odezev. Bylo zjištěno, že FA ovlivňují celkovou odezvu více než PFA a že v případě požadavku selektivní derivatizace PFA v přítomnosti FA je nejdůležitějším parametrem objem přidaného methylchlormravenčanu. Absolutní selektivity derivatizace pro tyto dvě skupiny analytů nebylo dosaženo, ovšem vhodnou volbou experimentálních podmínek lze do určitého stupně ovlivnit účinnost derivatizace jedné skupiny kyselin na úkor druhé....
|
|
|
Studium kinetiky trypsinového štěpení peptidů a chirálních separací biologicky aktivních látek metodou HPLC
Šlechtová, Tereza ; Tesařová, Eva (vedoucí práce) ; Čabala, Radomír (oponent) ; Mikšík, Ivan (oponent)
Dizertační práce se skládá ze dvou tematických částí; první část se zabývá charakterizací trypsinu, enzymu využívaného v proteomickém výzkumu k identifikaci proteinových sekvencí, a rychlostí trypsinového štěpení peptidů. Druhá část je zaměřena na chirální separace biologicky aktivních látek. V první části projektu byla studována kinetika štěpení syntetických peptidů trypsinema vyvinuta metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) pro detekci těchto peptidů a jejich fragmentů. Za použití enzymové reakce v roztoku a metody HPLC byly stanoveny relativní rychlostní konstanty štěpné reakce problematických sekvenčních motivů. Bylo objasněno, které aminokyseliny v okolí štěpného místa zpomalují enzymovou reakci a v jaké poloze vůči štěpnému místu je jejich vliv největší. Dále bylo zjištěno, že trypsin je schopen nízké exopeptidázové aktivity, především při štěpení na konci peptidového řetězce. Dále byly zjištěny a porovnány účinnosti tří chromatografických kolon s imobilizovaným trypsinem. Imobilizace na pevný nosič se využívá pro zvýšení množství enzymu účastnícího se katalytické reakce a pro zajištění lepší opakovatelnosti a reprodukovatelnosti výsledků. Účinnost kolony syntetizované na University of North Carolina at Chapel Hill byla porovnána s účinností dvou komerčně dostupných kolon. Jako...
|
|
| |
|
|
Analýza vybraných pterinů a jejich extraktů z integumentu Pyrrhocoris apterus metodou HPLC-MS/MS
Vejvodová, Tereza ; Bosáková, Zuzana (vedoucí práce) ; Čabala, Radomír (oponent)
Tato diplomová práce byla zaměřena na vývoj separační metody pro kvalitativní analýzu dvanácti vybraných pterinových derivátů pomocí hydrofilní interakční kapalinové chromatografie (HILIC) ve spojení s tandemovou hmotnostní detekcí. Pro separaci byly použity dvě zwiterionické kolony, kde na silikagelovém nosiči byl navázán buď sulfobetainový ligand (kolona ZIC-HILIC) nebo fosforylcholin jako ligand (kolona ZIC- cHILIC). Optimalizace separačních podmínek byla vedena s cílem zajistit dostatečnou separaci analytů v akceptovatelném čase. Byl sledován vliv obsahu organického modifikátoru a vliv koncentrace soli a jejího pH ve vodné složce mobilní fáze na separaci analytů. Optimalizované separační podmínky (kolona ZIC-HILIC, mobilní fáze o složení 83/17 (v/v) acetonitril/10 mM octan amonný, pH 6,8) byly aplikovány pro analýzu extraktů z integumentu ploštice Pyrrhocoris apterus. Extrakty byly získány pomocí pěti rozdílných extrakčních činidel, konkrétně acetonitrilu, methanolu, dimethylsulfoxidu (DMSO) a dvou typů tzv. deep eutectic solvents obsahujících směs cholinchloridu a mléčné kyseliny (DES 1) a směs cholinchloridu a ethylenglykolu (DES 2). Jako nejúčinnější extrakční činidlo se, s celkovým počtem osmi extrahovaných derivátů z dvanácti studovaných, ukázal být DMSO, a naopak nejméně vhodnou extrakční...
|
|
|
Optimalizace experimentálních podmínek měření perfluorovaných organických kyselin metodou GC
Ston, Martin ; Čabala, Radomír (vedoucí práce) ; Coufal, Pavel (oponent)
Komerční software Pro ezGC byl použit pro výpočet optimálního teplotního programu měření isobutylesterů perfluorovaných organických kyselin (C6 až C12) na plynovém chromatografu s plamenově ionizačním detektorem. Optimalizace byla provedena z hlediska dosažení úplného rozlišení všech píků analytů. Vypočtený teplotní program byl také použit pro měření stejných látek na GC-MS. Vypočtené a naměřené hodnoty byly srovnány, přičemž se ukázalo, že prakticky dosažená rozlišení jsou vyšší než ta vypočtená. Klíčová slova: perfluorované organické kyseliny, isobutylestery, rozlišení píků Předmětová hesla: plynová chromatografie, numerická optimalizace
|
|
|
Vývoj analytických metod pro stanovení fosforylovaných složek bakteriálních buněčných membrán
Mikulecká, Jana ; Čabala, Radomír (vedoucí práce) ; Feltl, Ladislav (oponent)
Fosfolipidy jsou dominantními komponentami bakteriálních buněčných membrán, v nichž tvoří fosfolipidové dvojvrstvy. Bakterie se liší svým fosfolipidovým složením, což umožňuje stanovení a identifikaci významných skupin mikroorganismů. Lze však sledovat i změnu fosfolipidového zastoupení u bakterií stejného druhu, protože složení je ovlivněno celou řadou environmentálních podmínek. K identifikaci a stanovení bakteriálních fosfolipidů se běžně využívá tenkovrstvá chromatografie zejména pro svou minimální instrumentaci. Nevýhodou této metody je časová náročnost a požadavky na pečlivost a zručnost pracovníka. Rostoucí zájmem o fosfolipidové dvojvrstvy napomáhá k podrobnějšímu prozkoumání složení mastných kyselin, neboť detailnější analýzy umožňují zjistit o mikroorganismech ještě více. Pro tyto účely se zdá být tou nejlepší volbou plynová chromatografie spojená s hmotnostní spektrometrií. Metoda slouží jak k identifikaci, tak k určení celkového zastoupení mastných kyselin v molekule fosfolipidu. Dále je využívána k určení polohy a počtu izomerií dvojných vazeb a funkčních skupin na uhlovodíkovém řetězci. Zatímco pro identifikaci a stanovení nepolárních částí fosfolipidů již existuje vhodná a osvědčená analytická ...
|
|
| |
|
|
Stanovení niacinu a jeho metabolitů metodou HPLC-MS
Pultarová, Kamila ; Čabala, Radomír (vedoucí práce) ; Staňková, Barbora (oponent)
1 Abstrakt Kyselina nikotinová je hypolipidemikum s příznivými účinky na plazmatické lipoproteiny. Léková forma se prodlouženým uvolňováním vede k pyrimidinovým metabolitům, které představují zvýšené riziko hepatotoxicity, proto je nutné jejich monitorování. Úkolem předkládané práce bylo vyvinout metodu HPLC-MS pro stanovení kyseliny nikotinové (NA), nikotinamidu (NAM), kyseliny nikotinurové (NUA), 1-methyl- nikotiamidu (MNA), nikotinamid-N-oxidu (NNO), 1-methyl-2-pyridon-5-karboxamidu (2-Pyr) a 1-methyl-4-pyridon-5-karboxamidu (4-Pyr) v krevní plazmě, která by byla dobře využitelná pro monitorování hypolipidemické léčby niacinem. Byly srovnány kalibrační závislosti jednotlivých metabolitů na kolonách Hypercarb (grafitový uhlík) a Hypersil Silica (silikagel). Na obou kolonách byla zjištěna lineární kalibrační závislost každého analytu kromě MNA v koncentračním rozsahu 10- 2000 ng/ml pro čisté látky; kalibrace v lidské krevní plazmě na koloně Hypersil Silica byla lineární v rozsahu 20-4000 ng/ml pro všechny analyty. Korelační koeficient se pohyboval v rozmezí 0,9400-0,9997. Délka analýzy byla 15 minut na koloně Hypercarb a 27 minut na koloně Hypersil Silica. Biologické vzorky byly extrahovány na pevné fázi se sulfonylovou skupinou. Reprodukovatelnost pro biologické vzorky se pohybovala od 0,06% do 19,97...
|
host ::
RSS.