|
|
Databázový systém pro správu biologických dat
Drlík, Radovan ; Burgetová, Ivana (oponent) ; Jaša, Petr (vedoucí práce)
Práce se zabývá problematikou uchovávání a správy biologických dat, především enzymů halogenalkan dehalogenáz. Dále se zaměřuje na projekt HADES (HAloalkane DEhalogenase databaSe) iniciovaný proteinovými inženýry Loschmidtových laboratoří Masarykovy univerzity v Brně. Jedná se o projekt, jehož hlavním cílem je jednoduše ukládat, uchovávat a zobrazovat různorodá data o proteinech. Výsledkem práce je flexibilní databázový systém umožňující snadnou rozšiřitelnost a udržovatelnost, který je postavený na technologiích Apache, PostgreSQL a PHP s využitím Zend Frameworku.
|
|
|
Shlukování proteinových sekvencí na základě podobnosti primární struktury
Jurásek, Petr ; Stryka, Lukáš (oponent) ; Burgetová, Ivana (vedoucí práce)
Diplomová práce je zaměřena na shlukování proteinových sekvencí na základě podobnosti primárních struktur. Seznamuje s daty v podobě aminokyselin, které tvoří primární strukturu proteinů. Představuje základní algoritmy pro porovnávání podobnosti proteinových sekvencí. Popisuje shlukovou analýzu a metody shlukování. Praktickou část práce představuje návrh vzdálenostní funkce pro proteiny a implementace metod shlukování AGNES, k-means, k-medoids v jazyce Python.
|
|
|
Techniky pro porovnávání biologických sekvencí
Sladký, Roman ; Křivka, Zbyněk (oponent) ; Burgetová, Ivana (vedoucí práce)
V práci se seznámíme se výstavbou a funkcí základních biologických jednotek DNA, RNA a proteinů. Data, která poskytují, se uchovávají v biologických databázích, které jsou celosvětově propojeny pro lepší komunikaci a dostupnost veškerých informací při vědeckém bádání. Tajemství života je skryto v genech. Geny jsou kódovány sekvencemi nukleotidů a dávají vznik proteinům, které jsou tvořeny sekvencemi aminokyselin. Nejrozšířenějšími technikami pro porovnávání sekvencí jsou algoritmy FASTA a BLAST. V práci je popsán program PSProt, který je založen na bázi zmíněných algoritmů. Slouží k porovnávání sekvencí proteinů. Porovnávaný protein se ale nejdříve pomyslně syntetizuje ze zadaného oligonukleotidu DNA, který kóduje potenciální protein. Nejpodobnější proteiny jsou pak vyhledány heuristikou hitbodů a poté algoritmem semiglobálního zarovnání upraveno jejich výsledné skóre rozhodující pro vyhledávání.
|
|
|
Kinetoplastids biology, from the group phylogeny and evolution into the secrets of the mitochondrion of one representative: \kur{Trypanosoma brucei}, the model organism in which new roles of the evolutionary conserved genes can be explored
TÝČ, Jiří
This thesis is composed of two topics, for which trypanosomatids and evolution are common denominators. First part deals with phylogenetic relationships among monoxenous trypanosomatids, with emphasis on flagellates parasitizing dipteran hosts, analyzed mainly from biogeographical and evolutionary perspectives. Second part focuses on the trypanosomatid Trypanosoma brucei, causative agent of severe diseases, which serves as a model organism for functional studies of evolutionary conserved mitochondrial proteins, in particular those involved in replication, maintenance and expression of the mitochondrial genome, also termed the kinetoplast. This thesis identified the mtHsp70/mtHsp40 chaperone machinery as an essential component of replication and maintenance of the kinetoplast, and also identified numerous conditions under which mtHsp70 has a tendency to aggregate. Moreover, several conserved proteins, previously identified to be part of the mitochondrial ribosome, were shown to be important for translation of the mitochondrial transcripts.
|
|
| |
|
|
Making Transgenic \kur{C. elegans} with Polycistronic mCherry Vector
FARKA, Dominik
Creation of transgenic animals has become a popular method to analyse gene function. In the nematode Ceanorhabditis elegans transformation is widely used and can be achieved by microinjection. For functional analyses, transgene constructs typically contain a promoter driving the expression of the protein of interest that is fused to a fluorescent protein. However, as this fusion of proteins can lead to misfolding of the protein of interest and may not reflect proper function, a modification of the expression vector has been developed; introducing a short sequence of non-coding DNA in-between the sequences of the two proteins and making the construct compatible with a polycistronic operon system. In this study, four different polycistronic constructs were introduced into C. elegans by means of microinjection in order to provide new tools for the analyses of gene function. Tissue specific promoters wrt-2 (seam cells), grl-21 (hyp7), and egl-17 (vulval precursor cells) were used to over-express either NHR-25 or SMO-1 in the corresponding tissues and the expression was visualized by independently translated mCherry red fluorescent. 10 independent transformed C. elegans strains were established and corresponding tissue-specific promoter activities were confirmed. Furthermore, in some cases, ectopic behaviour was observed e.g. ectopic mCherry expression in different tissues or specific cell differentiation defects that was most likely caused by the overexpression of NHR-25 or SMO-1. This study was the first case in our laboratory to generate transformed C. elegans utilizing the polycistronic mCherry vector system. New genetic tools were introduced in the laboratory useful for further analyses of gene function.
|
|
|
Metodika identifikace původců fuzarióz klasu pomocí PCR
Sumíková, Taťána ; Gabrielová-Slezáková, Ludmila ; Žabka, Martin
Cílem navrhované metodiky je uvedení kompletních protokolů k detekci následujících druhů r. Fusarium - F. avenaceum, F. culmorum, F. poae, F. graminearum, F. pseudograminearum, F. sporotrichioides - pomocí multiplex PCR. Sekvence použitých druhově specifických primerů jsou převzaté z literatury a byly vybrány tak, aby bylo možné je vzájemně a libovolně kombinovat, což umožňuje detekci jednoho nebo až všech šesti výše uvedených druhů v jedné PCR reakci. Reakce jsou optimalizovány pro použití v běžné laboratoři molekulární biologie. V metodice je nově zavedena technika pěstování mikromycet ve formě povrchových kultur na celofánu. Tato technika je speciálně určena pro následnou izolaci DNA z houbového mycelia. Technika pěstování povrchových kultur na celofánu umožňuje optimální manipulaci s napěstovaným myceliem, které se z celofánu snadno odstraní pomocí skalpelu, přičemž nedochází k nežádoucí kontaminaci vzorku agarovým kultivačním médiem nebo nečistotami z přirozeného substrátu (z napadeného vzorku).
Plný text:  PDF
|
|
|
Structural and Functional Study on Transient Receptor Potential Vanilloid 1 (TRPV1) and Ankyrin Receptor (TRPA1) Channels
SAMAD, Abdul
Investigations of structural and functional relationships of rat transient receptor potential cation channel, subfamily V, member 1 (TRPV1), also known as the capsaicin receptor, and human transient receptor potential cation channel, subfamily A, member 1, also known as TRPA1, are presented. Capsaicin induced Ca2+ -dependent desensitization of rat TRPV1 channel is studied and lead to the identification of key amino acid residues in the C- terminal domain of TRPV1 interacting with the membrane phospholipid PIP2 and an intradomain interaction that controls the open and desensitized state of the TRPV1 channel. Further the molecular basis of agonist AITC- and voltage-dependent gating on TRPA1 is explained. Hereby, residue P949 located near the center of the sixth transmembrane spanning helix (S6) is structurally required for normal functioning of the receptor and the distal bi-glycine G958XXXG962 motif controls its activation/deactivation properties. Furthermore, the gating region is extended towards the cytoplasmic part of the channel, putatively located near the inner mouth of the channel pore. A following series of experiments lead to the identification of a limited number of residues that appear important for allosteric regulation of the channel by chemical and voltage stimuli (K969, R975, K989, K1009, K1046, K1071, K1092 and K1099). In addition, three charge-neutralizing `gain-of- function{\crq} mutants (R975A, K988A, and K989A) which exhibited higher sensitivity to depolarizing voltages were characterized, indicating that these residues are directly involved in voltage-dependent modulation of TRPA1.
|
|
|
Symposium molekulární biologie sinic /7./
Komenda, Josef ; Flores, E. ; Nixon, P. J. ; Waleron, K. ; Maršálek, Blahoslav
Konference byla věnována nedávným pokrokům v molekulární biologii sinic, zejména v oblasti struktury a funkce proteinů a jejich komplexů, v regulaci genové exprese, buněčné diferenciaci, buněčném metabolismu a molekulární ekologii a taxonomii. Konference měla 170 účastníků, kteří presentovali 101 plakátových sdělení, 12 zvaných a 29 vybraných přednášek včetně počítačového bioinformatického sezení
|
|
| |
host ::
RSS.