|
|
In vitro saturation study of 99mTc-HYNIC-ramucirumab on PC-3 cell line
Lach, František ; Bárta, Pavel (vedoucí práce) ; Hyršová, Lucie (oponent)
Abstakt v slovenskom jazyku Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikálni chemie Študent: František Lach Školiteľ: Mgr. Pavel Bárta, PhD Konzultant: Mgr. Lucie Hyršová Názov diplomovej práce: In vitro saturačné štúdie 99m Tc-HYNIC-ramucirumabu na PC- 3 bunkách V posledných rokoch sa zvyšuje počet zhubných nádorov v populácií. Z dôvodu častých vážnych nežiadúcich účinkov chemoterapeutických liečiv na celý organizmus sa do popredia dostáva cielená protinádorová terapia. Vďaka svojmu špecifickému účinku na regulačné a signálne dráhy proteínových štruktúr, sú k cieľovej protinádorovej terapii využívané monoklonálne protilátky. Medzi základné vlastnosti rastúceho nádoru patria vaskulogenéza (schopnosť novotvorby ciev z endoteliálnych prekurzorov) a angiogenéza (proces vlastnej novotvorby ciev). Medzi endoteliálne progenitory nádoru patri vaskulárny endoteliálny rastový faktor (VEGF). VEGF svoj biologický účinok aktivuje prostredníctvom väzby na svoje transmembránové tyrozínkinázové receptory VEGFR. Práve inhibícia receptorov vaskulárneho endotelového faktoru je cieľom niektorých monoklonálnych protilátok. Ramucirumab je monoklonálna protilátka, ktorá selektívne inhibuje VEGF receptor typu 2 (VEGFR-2) a tým blokuje aktivačné a signalizačné dráhy. Cieľom...
|
|
|
In vitro saturation study of 99mTc-HYNIC-ramucirumab on SKOV3 cell line
Klimová, Juliána ; Bárta, Pavel (vedoucí práce) ; Maixnerová, Jana (oponent)
v slovenskom jazyku Univerzita Karlova v Prahe Farmaceutická fakulta v Hradci Králové
Katedra fyziky a fyzikálnej chémie
Študentka: Juliána Klimová Školitel: Mgr. Pavel Bárta, Ph.D.
Názov diplomovej práce: In vitro saturačné štúdie 99m Tc-HYNIC-ramucirumab na SKOV3 bunkách. Pasívna imunoterapia spočíva v podávaní už hotových výkonných tzv. efektorových zložiek imunitného systému (monoklonálne protilátky), ktoré v organizme plnia svoju funkciu v rámci likvidácie nádorovej bunky. Aktívna imunoterapia sa snaží vhodnou formou imunizácie vyvolať u pacienta účinnú protinádorovú odpoveď. Po naviazaní monoklonálnej protilátky na nádorovú bunku sa takáto bunka stáva značeným terčom pre následnú likvidáciu. Zvýšiť protinádorový účinok monoklonálnych protilátok je možné tým, že sa na ne naviažu cytostatiká, toxíny alebo rádioaktívne nuklidy. Predkladaná diplomová práca sa zamerala na radioaktívne značenie monoklonálnej protilátky ramucirumab cielenej na receptor pre vaskulárny endoteliálny faktor typu 2 (VEGFR-2), ktorý je hojne prítomný na bunkách niektorých typov nádorových ochorení. V rámci experimentálnej práce sa vykonala najprv konjugácia chelatačného činidla succinimidyl- 6-hydrazino-nicotinamidu (HYNIC) na monoklonálnu protilátku, následne sa naviazal radionuklid 99m Tc na predom pripravený...
|
|
|
Studium ledvinného transportu radiofarmak
Kaňoková, Jana ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Jana Kaňoková Školitel: Doc. PharmDr. František Trejtnar, CSc. Název diplomové práce: Studium ledvinného transportu radiofarmak Radioaktivně značené receptorově specifické peptidy ze skupiny derivátů gastrinu a bombesinu jsou v současné době látky intenzivně zkoumané z hlediska targetingu některých nádorů. Hlavním limitem jejich použití je intenzivní ledvinná kumulace a následná radiotoxicita. Cílem této experimentální studie bylo stanovit a následně vzájemně porovnat ledvinný uptake DOTA-bombesinu a jednoho z derivátů gastrinu - DOTA-sargastrinu, značených indiem-111 nebo luteciem-177. Dále bylo cílem posoudit možnou úlohu megalinového systému pro aktivní endocytózu při ledvinné akumulaci těchto látek. Jako experimentální model byly použity izolované ledvinné buňky potkana, které byly získány kolagenázovou perfúzní metodou. Uptake studovaných radiopeptidů byl dále porovnán s mírou akumulace vybraných komparátorů s různou ledvinnou akumulací (99m Tc-DTPA, 99m Tc-MAG3). Výsledky akumulačních studií ukázaly, že značené deriváty DOTA- sargastrinu mají relativně vyšší akumulaci v ledvinných potkaních buňkách než deriváty DOTA-bombesinu. Přitom 111 In-DOTA-sargastrin měl signifikantně vyšší...
|
|
|
Stanovení plazmatické vazebnosti nově vyvíjených radiodiagnostik Alzheimerovy nemoci
Hyršová, Lucie ; Lázníček, Milan (vedoucí práce) ; Melicharová, Ludmila (oponent)
UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Farmakologie a toxikologie Studentka: Lucie Hyršová Školitel: Prof. PharmDr. Ing. Milan Lázníček CSc. Název diplomové práce: Stanovení plazmatické vazebnosti nově vyvíjených radiodiagnostik Alzheimerovy nemoci Abstrakt: Stanovení vazebnosti na bílkoviny krevní plazmy u nově zkoumaných léčiv patří mezi základní parametry, které se provádějí již v raných stádiích klinického testování. Vazebnost léčiv totiž ovlivňuje veškeré farmakokinetické parametry a samozřejmě má vliv i na farmakodynamiku. V této práci je zkoumána vazebnost látek 99m Tc-5C-2-BOC a 99m Tc-5C-5-BOC, které patří mezi potenciální radiodiagnostika Alzheimerovy nemoci. Testována je krevní plazma čtyř živočišných druhů (jmenovitě lidská, králičí, hovězí a potkaní plazma) a je provedeno jejich vzájemné porovnání. Vazebnost byla v obou případech stanovována pomocí dvou metod - rovnovážné dialýzy a ultrafiltrace. S využitím metody rovnovážné dialýzy byla určena nejnižší vazebnost obou látek v lidské a hovězí plazmě. Vazebnost 99m Tc-5C-2-BOC stanovená metodou ultrafiltrace je nejnižší v hovězí plazmě a jenom o málo vyšší v lidské, vazebnost látky 99m Tc-5C-5-BOC je nejnižší v lidské plazmě. Z dosažených výsledků vyplývá, že vazebnost studovaných látek na plazmatické bílkoviny...
|
|
|
Studium ledvinného transportu léčiv in vitro
Loužecká, Jana ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Pourová, Jana (oponent)
1 ABSTRAKT 2 Zjištění zvýšené exprese určitých typů receptorů pro regulační peptidy v některých nádorech vedlo ke zkoumání analogů regulačních peptidů jako potencionálních receptorově-specifických radiofarmak pro zobrazování a cílenou terapii nádorů. Jednou z perspektivních skupin těchto peptidů jsou analogy gastrinu a cholecystokininu. Avšak kumulace radiopeptidů v ledvinné tkáni může způsobit radiotoxické poškození ledvin a limitovat jejich klinické využití. Studium ledvinných mechanismů je tedy základním předpokladem dalšího vývoje v této skupině. Cílem této práce bylo sledovat in vitro míru akumulace derivátů gastrinu - DOTA-minigastrinů (DOTA-MG) značených indiem-111 a zkoumat mechanismus jejich uptake v ledvinných buňkách. Za využití ledvinného buněčného modelu byla hodnocena akumulace tří sloučenin - 111 In-DOTA-MG11, 111 In-DOTA-MG45 a 111 In- DOTA-MG46. Experimenty byly prováděny za použití izolovaných ledvinných buněk potkana získaných z nativní ledvinné tkáně. Ledvinné buňky byly využity ke sledování míry akumulace 111 In-minigastrinů. Pro posouzení podílu aktivních a pasivních transportních mechanismů na ledvinném uptake byla stanovena akumulace za fyziologické a za snížené teploty. Pro posouzení kvantity akumulace 111 In-DOTA-minigastrinů byla jako srovnávací látka použita 99m...
|
|
|
Úloha radiologického asistenta při scintigrafii skeletu
Tejnorová, Kristýna ; Táborská, Kateřina (vedoucí práce) ; Vlček, Petr (oponent)
Kostní scintigrafie je jednoduchá neinvazivní metoda. Hlavní úlohou je zobrazení změn kostního metabolismu díky záchytu radiofarmaka. Nejčastěji používanými radiofarmaky jsou difosfonáty značené 99mTechneciem (99mTc). Distribuce těchto indikátorů zobrazuje jednak krevní zásobení, jednak kostní obrat. Indikátor, který není vázán ve skeletu, je vylučován ledvinami. Nejčastějšími indikacemi pro scintigrafii skeletu jsou primární a sekundární kostní nádory, osteomyelitidy, fraktury. Kontraindikací je těhotenství. Nevýhodou kostní scintigrafie je nízká specificita vyšetření. Práce přibližuje pracovní náplň radiologického asistenta na oddělení nukleární medicíny. Je popsána příprava pacienta a techniky provedení. Součástí kostní scintigrafie může být radionuklidová angiografie a fáze krevního poolu ( zobrazení měkkých tkání) v časné fázi, které jsou následovány pozdní kostní fází. Tato technika se nazývá třífázová scintigrafie. Standardní kostní scan se provádí za 2-5 hodin po intravenózní aplikaci radiofarmaka. Po inspekci celotělového zobrazení může lékař nukleární medicíny rozhodnout o doplnění dalšího vyšetření -jednofotonové emisní výpočetní tomografie (SPECT) nebo na novějších přístrojích i SPECT/CT. Tyto techniky poskytují lepší anatomickou lokalizaci a mohou zlepšit diagnostickou přesnost kostní...
|
|
|
Studium membránového transportu albuminu v ledvinách in vitro
Suchan, Martin ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Lázníček, Milan (oponent)
Mgr. Martin Suchan 2010 Hradec Králové Doc. PharmDr. František Trejtnar, CSc. Katedra farmakologie a toxikologie Abstrakt Cíl: Práce byla zaměřena na studium transportu albuminu in vitro pomocí akumulačních buněčných studií a s využitím dvou typů albuminu - albuminu značeného techneciem- 99m a FITC-albuminu značeného fluorescenční sondou. Součástí práce bylo ověření optimální přípravy a hodnocení kvality 99m Tc-albuminu. Cílem bylo porovnat akumulaci obou typů albuminu v ledvinných buňkách, zjistit vliv vybraných faktorů na akumulaci albuminu, stanovit typ mechanismu transmembránového transportu albuminu a zpracovat získané výsledky do formy odborného vědeckého sdělení. Metody: Ke značení albuminu techneciem-99 bylo použito optimalizovaného postupu za použití nízkého pH, vysoké koncentrace albuminu a optimální koncentrace cínatých iontů. Radiochemická čistota 99m Tc-albuminu byla ověřována chromatografií na papíře. Jako buněčné in vitro modely byly použity izolované nativní ledvinné buňky potkana a standardní linie ledvinných tubulárních buněk prasete LLC-PK1. V akumulačních studiích byl sledován uptake albuminu v závislosti na teplotě, čase, složení inkubační směsi, přítomnosti inhibitoru transportu a byl hodnocen vliv experimentálního modelu. U LLC-PK1 buněk byl též testován vliv stáří buněk na míru...
|
|
|
Příprava radioaktivně značeného albuminu
Suchan, Martin ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Lázníček, Milan (oponent)
Cíl: Tato diplomová práce byla zaměřena na vypracování pro naše podmínky optimální metody značení albuminu vybraným radionuklidem - techneciem 99m Tc. Naším úkolem bylo zvládnout příslušné metodiky potřebné k vypracování vhodného postupu značení albuminu uvedeným radioizotopem a rovněž otestovat i biologické chování značeného albuminu in vitro v buněčném experimentu s čerstvě izolovanými potkaními ledvinnými buňkami. Cílem diplomové práce bylo následně vyhodnotit provedené experimenty, porovnat získané výsledky s dalšími známými metodami značení albuminu techneciem 99m Tc a zpracovat získané výsledky do formy odborného vědeckého sdělení. Metody: Ke značení albuminu bylo použito nízkého pH a vysoké koncentrace albuminu. K redukci technecistanu 99m Tc bylo použito roztoku SnCl2.2H2O. Přečištění značeného albuminu proběhlo gelovou permeační chromatografií za použití Sephadexu G-50. Bicinchoninovou metodou byla stanovena poloha peaku albuminu ve frakcích. Stanovením chromatografického spektra samotného technecistanu byla stanovena poloha peaku technecistanu. Kontrola značení proběhla stanovením elučního spektra. Radiochemická čistota značeného albuminu byla ověřena chromatografií na papíře a následnou detekcí. K buněčnému experimentu byl použit čerstvě označený albumin. Byla sledována akumulace...
|
|
|
Hodnoty akumulace Tc-99m-DMSA v ledvinách u dětí
HOMOLKOVÁ, Markéta
Scintigrafická vyšetření ledvin a močových cest umožňují získat řadu informací o stavu uropoetického traktu. Hlavním přínosem dnešní nukleární medicíny je možnost zobrazení a přesného kvantitativního zhodnocení jednotlivých funkcí ledvin a močových cest. V současné době se pro statickou scintigrafii a SPECT ledvin používá Tc-99mDMSA neboli dimerkaptojantarová kyselina. U dětí se aplikuje Tc99m-DMSA o aktivitě minimálně 20 MBq. Statická scintigrafie se nejčastěji provádí k prokázání akutní pyelonefritidy. Při takovéto nemoci ledvin vzniká jedno nebo více ložisek se sníženou akumulací radiofarmaka, přičemž jizvy se jeví jako klínovitý defekt, který nemá pravidelné okraje a orgán ztrácí na objemu. Další z nemocí, pro jejíž diagnostiku je volena metoda statické scintigrafie, je tzv. hypoplastická ledvina, jež má hladký zevní okraj bez defektů v kůře. Výše uvedená diagnostická metoda je rovněž využívána k posouzení lokálních změn u transplantovaných ledvin. Cílem praktické části této práce bylo zodpovězení následující otázky: "Jaké jsou normální hodnoty akumulace Tc-99m-DMSA v ledvinách u dětí?". Odpověď jsem získala prostřednictvím zkoumání a vyhodnocení výsledků vyšetření metodou statické scintigrafie referenčního souboru 28 ledvin u dětí Oddělení nukleární medicíny nemocnice v Českých Budějovicích. Referenční soubor byl sbírán od září 2014 do března 2015 a tvořen pacienty ve věku do 18 let. Lékař zhodnotil ledviny jednotlivých pacientů a pro výzkum vybral takové, které nejeví známky poruchy polohy nebo ložiskové změny, či poruchy funkce. Pracovala jsem v programu pro statickou scintigrafii ledvin. Zadávala jsem specifikující údaje o jednotlivých pacientech a následně zakreslila oblasti zájmu u pravé i levé ledviny každého z nich. Program vyhodnotil procento akumulace Tc-99m-DMSA jednotlivě pro každou ledvinu zkoumaného vzorku pacientů. Takto získané hodnoty jsem zapsala do tabulky v programu Microsoft Excel a prostřednictvím statistických výpočtů určila normální hodnoty akumulace Tc-99m-DMSA v ledvinách dětí. Pro statistické vyhodnocení jsem použila vzorce pro průměr, směrodatnou odchylku a percentil. Z takto zpracovaných hodnot lze uvést, že normální hodnota akumulace Tc-99m-DMSA v ledvinách dětí se pohybuje v rozmezí od 10,9 % do 32,9 %.
|
|
| |
host ::
RSS.