|
|
Laboratorní diagnostika microRNA u různých diagnostických skupin
Hrachovcová, Eliška ; Urbánková Rathouská, Jana (vedoucí práce) ; Tripská, Katarína (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Student: Bc. Eliška Hrachovcová Vedoucí diplomové práce: PharmDr. Jana Rathouská, Ph.D. Konzultant diplomové práce: doc. RNDr. Pavlína Kušnierová, Ph.D. Název diplomové práce: Laboratorní diagnostika microRNA u různých diagnostických skupin Cíl práce: Identifikace potenciálních miRNA cílů pro diferenciální diagnostiku pacientů s aterosklerózou a demencí. Porovnání exprese a záchytu miRNA ve vzorcích séra se vzorky mozkomíšního moku. Výběr vhodných miRNA v rámci diferenciální diagnostiky u pacientů s aterosklerózou a s demencí. Dále také výběr miRNA cílů s co nejvýraznější fold-change a zároveň co nejnižší p-hodnotou pro následnou validační studii. Metody: Pro identifikaci potenciálních miRNA byly přijaté vzorky centrifugovány, alikvotovány a skladovány při - 80C. miRNA byla izolována pomocí kitu iCatcher Circulating cfRNA 1000 kit a izolátoru CatchGene. Poté byla provedena reverzní transkripce a amplifikace s detekcí. Data byla zpracována v Excelu a následně statisticky zpracována v programu GenEx pomocí Mann- Whitney testu. Výsledky: Výsledky byly hodnoceny pro 2 skupiny pacientů: skupinu A (vzorky pacientů s Parkinsonovou nemocí a demencí) a skupina B (s aterosklerózou a demencí). Byla hodnocena...
|
|
|
Vliv atorvastatinu na expresi a funkci endoglinu u endotelové dysfunkce indukované hyperlipidémií
Holadová, Adéla ; Tripská, Katarína (vedoucí práce) ; Fikrová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Název diplomové práce: Vliv atorvastatinu na expresi a funkci endoglinu u endotelové dysfunkce indukované hyperlipidémií Autor: Adéla Holadová Vedoucí diplomové práce: PharmDr. Katarína Tripská, Ph.D. Cíl práce: Cílem této diplomové práce bylo zjistit, jakým způsobem atorvastatin ovlivňuje expresi a funkci endoglinu a s ním souvisejících biomarkerů zánětu/endotelové dysfunkce v různých koncentracích a časech u lidských endotelových buněk z aorty, u kterých byla indukovaná hyperlipidémie pomocí kyseliny palmitové. Metody: V diplomové práci jsme pracovaly s lidskými aortálními endotelovými buňkami. Ty jsme premedikovaly atorvastatinem/kyselinou palmitovou v různých časech a koncentracích. Za využití průtokové cytometrie jsme měřily proteinovou expresi endoglinu. Dále jsme využívaly metodu qRT-PCR ke zjištění míry mRNA exprese endoglinu, jeho transkripčních faktorů a biomarkerů zánětu. Pomocí metody ELISA, jsme detekovaly hladiny solubilního endoglinu. Výsledky: Prokázaly jsme, že atorvastatin o koncentraci 5μM po 16h premedikaci signifikantně zvýšil mRNA expresi endoteliální syntázy oxidu dusnatého, a naopak snížil expresi CCL2 (C-C motif chemokine ligand 2). Dále jsme zjistily, že 25μM koncentrace...
|
|
|
Vliv glipizidu na expresi a funkci endoglinu a s ním souvisejících biomarkerů endotelové dysfunkce u diabetu mellitu II. typu
Vochozková, Iva ; Tripská, Katarína (vedoucí práce) ; Urbánková Rathouská, Jana (oponent)
6 ABSTRAKT Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Název diplomové práce: Vliv glipizidu na expresi a funkci endoglinu a sním souvisejících biomarkerů endotelové dysfunkce u diabetu mellitu II.typu Autor: Iva Vochozková Vedoucí diplomové práce: PharmDr. Katarína Tripská, Ph.D. Cíl práce: Cílem této diplomové práce bylo zjistit, jak glipizid ovlivňuje expresi a funkci endoglinu, jeho transkripčních faktorů a souvisejících biomarkerů endotelové dysfunkce, hladinu solubilního endoglinu a adhezi monocytů na lidské diabetické endotelové buňky koronárních artérií. Metody: V této diplomové práci jsme pracovali s lidskými diabetickými endotelovými buňkami koronárních artérií. Ty jsme v různých časech a koncentracích premedikovali glipizidem. Pomocí průtokové cytometrie jsme měřili proteinovou expresi endoglinu a biomarkerů endotelové dysfunkce. Pomocí průtokové cytometrie jsme měřili také adhezi monocytů k endotelovým buňkám. ELISA metodou jsme detekovali hladiny solubilního endoglinu a pomocí PCR jsme měřili mRNA expresi endoglinu, jeho transkripčních faktorů a markerů zánětu. Výsledky: Prokázali jsme, že premedikace 200µM koncentrací glipizidu vedla ke snížení proteinové exprese endoglinu po 24 i 48 hodinách. Po 24 hodinách došlo taktéž ke zvýšení...
|
|
|
Effect of endoglin blockage on inflammation-induced endothelial dysfunction in human aortic endothelial cells
Škubová, Andrea ; Tripská, Katarína (vedoucí práce) ; Svobodová, Zuzana (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Názov diplomovej práce: Vplyv blokácie endoglínu na zápalom indukovanú endotelovú dysfunkciu u ľudských aortálnych endotelových buniek Autor: Andrea Škubová Vedúci diplomovej práce: PharmDr. Katarína Tripská, Ph.D. Cieľ práce: Cieľom tejto diplomovej práce bolo popísať vplyv zápalu indukovaného prostredníctvom TNF-α a LPS na expresiu endoglínu a jeho transkripčných faktorov, expresiu biomarkerov endotelovej dysfunkcie, hladinu solubilného endoglínu a adhéziu a transmigráciu monocytov cez ľudské aortálne endotelové bunky. Ďalej sme chceli objasniť vplyv blokácie endoglínu prostredníctvom monoklonálnej protilátky TRC105 (carotuximab) na tieto procesy. Metódy: V tejto diplomovej práci boli použité ľudské aortálne endotelové bunky (HAEC), ktoré boli vystavené po dobu 16 hodín pôsobeniu TNF-α (10 ng/ml) a LPS (100 ng/ml) a po dobu 12 hodín pôsobeniu TRC105 (300 µg/ml). Metódou real-time qRT-PCR sme merali mRNA expresiu endoglínu a jeho transkripčných faktorov (KLF6, RelA, NR1H3), mRNA expresiu zápalových adhéznych molekúl (ICAM-1, VCAM-1, SELE) a mRNA expresiu enzýmu MMP- 14. Pomocou prietokovej cytometrie sme detekovali proteínové hladiny endoglínu, proteínové hladiny zápalových adhéznych molekúl (ICAM-1,...
|
|
|
Effect of endoglin blockage on inflammation-induced endothelial dysfunction in human aortic endothelial cells
Škubová, Andrea ; Tripská, Katarína (vedoucí práce) ; Svobodová, Zuzana (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Názov diplomovej práce: Vplyv blokácie endoglínu na zápalom indukovanú endotelovú dysfunkciu u ľudských aortálnych endotelových buniek Autor: Andrea Škubová Vedúci diplomovej práce: PharmDr. Katarína Tripská, Ph.D. Cieľ práce: Cieľom tejto diplomovej práce bolo popísať vplyv zápalu indukovaného prostredníctvom TNF-α a LPS na expresiu endoglínu a jeho transkripčných faktorov, expresiu biomarkerov endotelovej dysfunkcie, hladinu solubilného endoglínu a adhéziu a transmigráciu monocytov cez ľudské aortálne endotelové bunky. Ďalej sme chceli objasniť vplyv blokácie endoglínu prostredníctvom monoklonálnej protilátky TRC105 (carotuximab) na tieto procesy. Metódy: V tejto diplomovej práci boli použité ľudské aortálne endotelové bunky (HAEC), ktoré boli vystavené po dobu 16 hodín pôsobeniu TNF-α (10 ng/ml) a LPS (100 ng/ml) a po dobu 12 hodín pôsobeniu TRC105 (300 µg/ml). Metódou real-time qRT-PCR sme merali mRNA expresiu endoglínu a jeho transkripčných faktorov (KLF6, RelA, NR1H3), mRNA expresiu zápalových adhéznych molekúl (ICAM-1, VCAM-1, SELE) a mRNA expresiu enzýmu MMP- 14. Pomocou prietokovej cytometrie sme detekovali proteínové hladiny endoglínu, proteínové hladiny zápalových adhéznych molekúl (ICAM-1,...
|
|
|
Current trends in dyslipidemia therapy
Krupová, Tatiana ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Tripská, Katarína (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lekárskych vied Názov diplomovej práce: Súčasné trendy v terapii dyslipidémií Autor: Tatiana Krupová Vedúci diplomovej práce: prof. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Cieľ práce: Cieľom tejto diplomovej práce je popísať možnosti terapie rôznych typov dyslipidémií so zameraním na súčasné trendy a nové poznatky v tejto oblasti. Hlavné poznatky: Diplomová práca zdôrazňuje dôležitosť správnej liečby dyslipidémie za využitia známych aj nových skupín liečiv, aby bolo možné predchádzať chorobám srdcovo- cievneho systému, ktoré dnes radíme medzi najčastejšie príčiny mortality na svete. Vývoj nových molekúl je markantný, významné sú tieto liečivá najmä u pacientov, u ktorých nedosahujeme želané výsledky pomocou už známych látok. Záver: Informácie získané pre vypracovanie diplomovej práce potvrdzujú, že vývoj nových typov liečby dyslipidémie výrazne napreduje a umožňuje tak lepšie predchádzať komplikáciám, ktoré sa najčastejšie manifestujú rozvojom kardiovaskulárnych ochorení. Kľúčové slová: cholesterol, lipidy, lipoproteíny, dyslipidémia, ischemická choroba srdca, statíny, fibráty, sekvestranty, ezetimib, niacín, omega-3 mastné kyseliny, fytosteroly, vláknina, PCSK9 inhibítory, kyselina bempedoová, mipomersen, volanesorsen,...
|
|
|
Effect of dapagliflozin on the expression and function of endoglin and related biomarkers of endothelial dysfunction in human diabetic coronary endothelial cells
Vavreková, Valéria ; Tripská, Katarína (vedoucí práce) ; Fikrová, Petra (oponent)
6 ABSTRAKT Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Názov diplomovej práce: Vplyv dapagliflozínu na expresiu a funkciu endoglínu a s ním súvisiacich biomarkerov endotelovej dysfunkcie u ľudských diabetických koronárnych endotelových buniek Autor: Valéria Vavreková Vedúci diplomovej práce: PharmDr. Katarína Tripská, Ph.D. Cieľ práce: Cieľom tejto diplomovej práce bolo zistiť, ako dapagliflozín vplýva na expresiu a funkciu endoglínu (Eng) a s ním súvisiacich biomarkerov endotelovej dysfunkcie v rôznych časoch a koncentráciách u ľudských diabetických buniek. Metódy: V tejto diplomovej práci sme pracovali s ľudskými diabetickými koronárnymi endotelovými bunkami. Tie sme premedikovali dapagliflozínom v rôznych časoch a koncentráciách, a dimethylsulfoxid bol použitý ako kontrola. Pomocou prietokovej cytometrie sme merali proteínovú expresiu Eng a biomarkerov endotelovej dysfunkcie. Pomocou prietokovej cytometrie sme tiež merali mieru adhézie monocytov k endotelovým bunkám. Za využitia metódy ELISA, sme detekovali hladiny solubilného endoglínu (sEng). Výsledky: Preukázali sme, že 1nM koncentrácia dapagliflozínu počas 12- hodinovej premedikácie viedla k zníženiu expresie proteínov adhéznych molekúl. Ďalej sme zistili, že aj proteínová expresia Eng sa významne...
|
|
|
Možnosti ovlivnění exprese endoglinu u endotelových buněk
Tripská, Katarína ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Mladěnka, Přemysl (oponent) ; Vohnout, Branislav (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Doktorský študijný program: Farmakológia a toxikológia Kandidát: Mgr. Katarína Tripská Školiteľ: prof. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Názov dizertačnej práce: Možné zmeny expresie endoglínu v endotelových bunkách Endoglín (Eng) je ko-receptor pre ligandy zo superrodiny transformujúceho rastového faktora β. Viaceré štúdie preukázali, že Eng je spojený s patologickými stavmi súvisiacimi s metabolickým syndrómom, ako sú hypercholesterolémia, hyperglykémia, hypertenzia alebo obezita. Avšak presná úloha Eng pri týchto patologických stavoch stále nie je známa. Preto bolo hlavným cieľom tejto práce objasniť a zhrnúť úlohu membránového a solubilného Eng vo vybraných patologických stavoch spojených s metabolickým syndrómom. Preukázali sme, že hladiny solubilného Eng (sEng), spolu s plazmatickými lipidmi a markermi zápalu, sa po každej aferéze lipoproteínov znížili u pacientov s familiárnou hypercholesterolémiou. Tento výsledok v kombinácii s poznatkami získanými v prehľadovom článku naznačuje, že zvýšené hladiny sEng súvisia s kardiometabolickými ochoreniami. Pokiaľ ide o úlohu membránového Eng, ukázali sme, že blokovanie expresie Eng pomocou TRC105, má za následok zníženú hypercholesterolémiou- a...
|
|
|
Možnosti ovlivnění exprese endoglinu u endotelových buněk
Tripská, Katarína ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Mladěnka, Přemysl (oponent) ; Vohnout, Branislav (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Doktorský študijný program: Farmakológia a toxikológia Kandidát: Mgr. Katarína Tripská Školiteľ: prof. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Názov dizertačnej práce: Možné zmeny expresie endoglínu v endotelových bunkách Endoglín (Eng) je ko-receptor pre ligandy zo superrodiny transformujúceho rastového faktora β. Viaceré štúdie preukázali, že Eng je spojený s patologickými stavmi súvisiacimi s metabolickým syndrómom, ako sú hypercholesterolémia, hyperglykémia, hypertenzia alebo obezita. Avšak presná úloha Eng pri týchto patologických stavoch stále nie je známa. Preto bolo hlavným cieľom tejto práce objasniť a zhrnúť úlohu membránového a solubilného Eng vo vybraných patologických stavoch spojených s metabolickým syndrómom. Preukázali sme, že hladiny solubilného Eng (sEng), spolu s plazmatickými lipidmi a markermi zápalu, sa po každej aferéze lipoproteínov znížili u pacientov s familiárnou hypercholesterolémiou. Tento výsledok v kombinácii s poznatkami získanými v prehľadovom článku naznačuje, že zvýšené hladiny sEng súvisia s kardiometabolickými ochoreniami. Pokiaľ ide o úlohu membránového Eng, ukázali sme, že blokovanie expresie Eng pomocou TRC105, má za následok zníženú hypercholesterolémiou- a...
|
|
|
Hodnocení kvality protilátek určených pro detekci endoglinu v játrech
Kejzlarová, Eliška ; Svobodová, Zuzana (vedoucí práce) ; Tripská, Katarína (oponent)
Diplomová práce se zabývá endoglinem, transmembránovým glykoproteinem, který může být štěpen za vzniku tzv. solubilního endoglinu, jenž poté cirkuluje v krvi. V teoretické části práce jsou nejprve kapitoly věnující se kardiovaskulárním a jaterním onemocněním souvisejícím se změnami v expresi či hladině endoglinu v krvi, následují kapitoly shrnující dosavadní poznatky o tomto proteinu ve vztahu k různým onemocněním. Cílem experimentální části práce bylo vybrat vhodnou protilátku proti endoglinu určenou pro western blot (WB). K dispozici byly celkem čtyři primární protilátky od tří výrobců. Účelem bylo protilátky otestovat a určit, která z nich má nejlepší schopnost detekovat endoglin ve vzorcích myší tkáně, jako jsou játra nebo aorta na WB. Pro ověření jejich schopnosti vázat endoglin a také pro porovnání jejich afinit k tomuto proteinu byl použit affiblot. Nově vyvinuté a patentované zařízení fungujícího na bázi dot blotu. Vazba použitých protilátek na endoglin byla ověřena pomocí metody WB a poté byly výsledky obou metod porovnány. Ze získaných výsledků vyplynulo, že protilátka od Abcam má nejvhodnější parametry, co se týká specifity a citlivosti pro identifikaci endoglinu. Klíčová slova: endoglin, solubilní endoglin, NASH, cirhóza, nealkoholová steatohepatitida, protilátka, affiblot
|
host ::
RSS.