|
| |
|
|
Modulace exprese alfa-synukleinu pomocí působení 5-S-cysteinyldopaminu na buňky lidského neuroblastonu SH-SY5Y: možná úloha katecholthioetherů při neurodegeneraci
Hrabáková, Rita ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Mladěnka, Přemysl (oponent)
Souhrn -Synuklein je presynaptický protein, který hraje důležitou roli v etiopatogenezi Parkinsonovy choroby (Parkinson's disease - PD). Jeho přirozenou funkcí je udržování homeostázy dopaminu prostřednictvím inhibice tyrosinhydroxylázy, regulací dopaminového transportéru a potencionální rolí v uskladnění dopaminu do vezikul. Tento přirozeně rozvinutý protein může být vlivem toxických působků a oxidativního stresu více exprimován a agregován. Jeho agregace vede ke ztrátě funkce způsobující dysregulaci dopaminových drah s následným vzestupem dopaminu v cytosolu, který ještě zesiluje neurotoxický efekt synukleinových agregátů. 5-S-Cysteinyl-dopamin (Cys-DA), katecholthioetherový metabolit dopaminu, který byl nedávno objeven v dopaminergních oblastech mozku (zvláště v Substantia nigra), se zdá být pravděpodobným ukazatelem oxidativního stresu během stárnutí a neurodegenerace. Protože Cys-DA a jeho metabolity mohou být endogenními neurotoxiny zodpovědnými za neurodegeneraci u PD, cílem naší práce bylo určit, zda Cys-DA způsobuje overexpresi -synukleinu na translační i transkripční úrovni v buněčném modelu PD - buněčná linie lidského neuroblastomu SH-SY5Y. Buňky byly vystaveny toxickému působení Cys-DA a poté byla hodnocena exprese -synukleinu pomocí Western blotu a Real-time PCR. Cys- DA indukoval...
|
|
|
Proteomová analýza účinků protinádorových léčiv a charakterizace mechanismů nádorové rezistence
Hrabáková, Rita
Cílená onkologická léčba je namířena proti specifickým molekulám zodpovědným za karcinogenezi a růst nádorů. Účinek této efektivní terapie je však stejně jako u konvenční chemoterapie závislý na výbavě nádorových buněk, které mohou rozvíjet rezistenci. Pro studium mechanismů působení protinádorových léčiv a charakterizaci nádorové rezistence jsme využili modely lidských buněčných linií s různým fenotypem nádorového supresoru p53 a podrobily je kvantitativní proteomické analýze. Podařilo se nám identifikovat proteiny významně ovlivněné působením léčiv podobné struktury a také proteiny účastnící se rozvoje nádorové rezistence. Po ošetření buněk protinádorovými léčivy docházelo k bezprostřednímu ovlivnění buněčného metabolismu, který byl u rezistentních buněk modulován trvale. Zjistili jsme, že k rozvoji nádorové rezistence k působení inhibitorů Aurora kináz významně přispívá vysoká hladina proteinů serinhydroxymethyltransferázy, serpinu B5 a calretininu, které podporují progresi nádoru nezávisle na expresi proteinu p53. Voltage-dependent anion-selective channel protein 2 se účastní rozvoje rezistence pouze u nádorových buněk s funkčním p53 a tyto buňky vykazují také nízkou expresi elongačního faktoru 2. Buňky s mutovaným p53 pak během rozvoje rezistence posilují antioxidační mechanismy. Klíčovou...
|
|
|
Proteomová analýza účinků protinádorových léčiv a charakterizace mechanismů nádorové rezistence
Hrabáková, Rita ; Kovářová, Hana (vedoucí práce) ; Hernychová, Lenka (oponent) ; Šulc, Miroslav (oponent)
1 Abstrakt Cílená onkologická léčba je namířena proti specifickým molekulám zodpovědným za karcinogenezi a růst nádorů. Účinek této efektivní terapie je však stejně jako u konvenční chemoterapie závislý na výbavě nádorových buněk, které mohou rozvíjet rezistenci. Pro studium mechanismů působení protinádorových léčiv a charakterizaci nádorové rezistence jsme využili modely lidských buněčných linií s různým fenotypem nádorového supresoru p53 a podrobily je kvantitativní proteomické analýze. Podařilo se nám identifikovat proteiny významně ovlivněné působením léčiv podobné struktury a také proteiny účastnící se rozvoje nádorové rezistence. Po ošetření buněk protinádorovými léčivy docházelo k bezprostřednímu ovlivnění buněčného metabolismu, který byl u rezistentních buněk modulován trvale. Zjistili jsme, že k rozvoji nádorové rezistence k působení inhibitorů Aurora kináz významně přispívá vysoká hladina proteinů serinhydroxymethyltransferázy, serpinu B5 a calretininu, které podporují progresi nádoru nezávisle na expresi proteinu p53. Voltage-dependent anion-selective channel protein 2 se účastní rozvoje rezistence pouze u nádorových buněk s funkčním p53 a tyto buňky vykazují také nízkou expresi elongačního faktoru 2. Buňky s mutovaným p53 pak během rozvoje rezistence posilují antioxidační mechanismy. Klíčovou...
|
|
|
Proteomová analýza účinků protinádorových léčiv a charakterizace mechanismů nádorové rezistence
Hrabáková, Rita
Cílená onkologická léčba je namířena proti specifickým molekulám zodpovědným za karcinogenezi a růst nádorů. Účinek této efektivní terapie je však stejně jako u konvenční chemoterapie závislý na výbavě nádorových buněk, které mohou rozvíjet rezistenci. Pro studium mechanismů působení protinádorových léčiv a charakterizaci nádorové rezistence jsme využili modely lidských buněčných linií s různým fenotypem nádorového supresoru p53 a podrobily je kvantitativní proteomické analýze. Podařilo se nám identifikovat proteiny významně ovlivněné působením léčiv podobné struktury a také proteiny účastnící se rozvoje nádorové rezistence. Po ošetření buněk protinádorovými léčivy docházelo k bezprostřednímu ovlivnění buněčného metabolismu, který byl u rezistentních buněk modulován trvale. Zjistili jsme, že k rozvoji nádorové rezistence k působení inhibitorů Aurora kináz významně přispívá vysoká hladina proteinů serinhydroxymethyltransferázy, serpinu B5 a calretininu, které podporují progresi nádoru nezávisle na expresi proteinu p53. Voltage-dependent anion-selective channel protein 2 se účastní rozvoje rezistence pouze u nádorových buněk s funkčním p53 a tyto buňky vykazují také nízkou expresi elongačního faktoru 2. Buňky s mutovaným p53 pak během rozvoje rezistence posilují antioxidační mechanismy. Klíčovou...
|
|
|
Modulace exprese alfa-synukleinu pomocí působení 5-S-cysteinyldopaminu na buňky lidského neuroblastonu SH-SY5Y: možná úloha katecholthioetherů při neurodegeneraci
Hrabáková, Rita ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Mladěnka, Přemysl (oponent)
Souhrn -Synuklein je presynaptický protein, který hraje důležitou roli v etiopatogenezi Parkinsonovy choroby (Parkinson's disease - PD). Jeho přirozenou funkcí je udržování homeostázy dopaminu prostřednictvím inhibice tyrosinhydroxylázy, regulací dopaminového transportéru a potencionální rolí v uskladnění dopaminu do vezikul. Tento přirozeně rozvinutý protein může být vlivem toxických působků a oxidativního stresu více exprimován a agregován. Jeho agregace vede ke ztrátě funkce způsobující dysregulaci dopaminových drah s následným vzestupem dopaminu v cytosolu, který ještě zesiluje neurotoxický efekt synukleinových agregátů. 5-S-Cysteinyl-dopamin (Cys-DA), katecholthioetherový metabolit dopaminu, který byl nedávno objeven v dopaminergních oblastech mozku (zvláště v Substantia nigra), se zdá být pravděpodobným ukazatelem oxidativního stresu během stárnutí a neurodegenerace. Protože Cys-DA a jeho metabolity mohou být endogenními neurotoxiny zodpovědnými za neurodegeneraci u PD, cílem naší práce bylo určit, zda Cys-DA způsobuje overexpresi -synukleinu na translační i transkripční úrovni v buněčném modelu PD - buněčná linie lidského neuroblastomu SH-SY5Y. Buňky byly vystaveny toxickému působení Cys-DA a poté byla hodnocena exprese -synukleinu pomocí Western blotu a Real-time PCR. Cys- DA indukoval...
|
|
| |
host ::
RSS.