|
|
Vývoj nové spektrofotometrické metodiky pro screening chelatace iontů zinku
Herbolt, Daniel ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce) ; Kučera, Radim (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Daniel Herbolt Školitel: Doc. PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D. Název rigorózní práce: Vývoj nové spektrofotometrické metodiky pro screening chelatace iontů zinku Zinek je jediný stopový kov, který je kofaktorem více než 300 funkčních enzymů. Je zastoupen ve všech tkáních a orgánech. Nedostatek zinku může způsobovat celou řadu onemocnění, jako např. diabetes, poruchy hemostázy a rakovinu. Toxicita zinku je sice obvykle považována za mírnou, ale dysbalance zinku, např. jeho přítomnost v extracelulárních placích u pacientů s Alzheimerovou chorobou naznačuje složitější vztah. Cílem předkládané práce bylo vytvořit novou spektrofotometrickou metodiku pro screening chelatace iontů zinku. Prvním krokem bylo proměření spekter vybraného indikátoru dithizonu a jeho komplexu se zinkem a zjištění ideální vlnové délky pro nejpřesnější lineární stanovení koncentrace iontů zinku. Následně byla ověřována linearita při dvou vybraných vlnových délkách. Poté se přešlo k porovnání stability dithizonu a jeho komplexu v závislosti na čase. Konečnou fází bylo ověřování metodiky na dvou známých chelátorech zinku, jimiž byly kyselina ethylendiamintetraoctová (EDTA) a N,N,N′,N′-tetrakis(2- pyridylmethyl)ethylenediamin...
|
|
|
Vývoj nové spektrofotometrické metodiky pro screening chelatace iontů zinku
Herbolt, Daniel ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce) ; Kučera, Radim (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Daniel Herbolt Školitel: Doc. PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D. Název rigorózní práce: Vývoj nové spektrofotometrické metodiky pro screening chelatace iontů zinku Zinek je jediný stopový kov, který je kofaktorem více než 300 funkčních enzymů. Je zastoupen ve všech tkáních a orgánech. Nedostatek zinku může způsobovat celou řadu onemocnění, jako např. diabetes, poruchy hemostázy a rakovinu. Toxicita zinku je sice obvykle považována za mírnou, ale dysbalance zinku, např. jeho přítomnost v extracelulárních placích u pacientů s Alzheimerovou chorobou naznačuje složitější vztah. Cílem předkládané práce bylo vytvořit novou spektrofotometrickou metodiku pro screening chelatace iontů zinku. Prvním krokem bylo proměření spekter vybraného indikátoru dithizonu a jeho komplexu se zinkem a zjištění ideální vlnové délky pro nejpřesnější lineární stanovení koncentrace iontů zinku. Následně byla ověřována linearita při dvou vybraných vlnových délkách. Poté se přešlo k porovnání stability dithizonu a jeho komplexu v závislosti na čase. Konečnou fází bylo ověřování metodiky na dvou známých chelátorech zinku, jimiž byly kyselina ethylendiamintetraoctová (EDTA) a N,N,N′,N′-tetrakis(2- pyridylmethyl)ethylenediamin...
|
|
|
Příprava savčích vektorů kódujících vybrané aldo-ketoreduktasy
Herbolt, Daniel ; Hofman, Jakub (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
1 Abstrakt Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Daniel Herbolt Školitel: RNDr. Jakub Hofman, Ph.D. Název diplomové práce: Příprava savčích vektorů kódujících vybrané aldo-ketoreduktasy Aldo-ketoreduktasy 1B1, 1B10 a 1C1 (AKR1B1, AKR1B10, AKR1C1) jsou NADPH-dependentní enzymy metabolizující celou řadu substrátů obsahujících karbonylovou skupinu. Tyto enzymy z nadrodiny aldo-ketoreduktas zprostředkovávají redukci endogenních látek, jako např. steroidních hormonů a cukrů, stejně tak jako mnoha různých xenobiotik a léčiv. Mimo svých fyziologických rolí se významnou měrou podílí na genezi několika závažných onemocnění (např. rakovina, diabetes aj.). Inhibice AKR1B1, AKR1B10 a AKR1C1 je považována za slibný terapeutický přístup pro léčbu těchto onemocnění. Cílem předkládané práce bylo připravit savčí vektory kódující AKR1B1, AKR1B10 a AKR1C1. Prvními kroky bylo navržení primerů a amplifikace cDNA klonovaných enzymů. Primery nesly sekvenci rozpoznávanou restrikčními endonukleasami přítomnými v multiklonovacím místě pCI plasmidu, což umožnilo vytvoření lepivých konců pomocí restrikce a následné spojení insertu a plasmidu za využití ligace. Připravené vektory byly transformovány do bakterií Escherichia coli HB101. U vybraných kolonií byla ověřena...
|
host ::
RSS.