|
|
Role železa ve virulenci Acanthamoeba castellanii
Šimáčková, Aneta ; Šuťák, Róbert (vedoucí práce) ; Krijt, Matyáš (oponent)
Železo je nezbytná živina pro všechny živé organismy. Má zásadní úlohu ve virulenci patogenních bakterií i parazitických eukaryot. I když je železo hojným prvkem v organismu hostitele, není pro parazita snadné ho získat. Schopnost parazitů vyvolat onemocnění závisí z velké části na tom, jak účinné mechanismy pro zisk železa vyvinuli. Tato práce se zabývá vlivem železa na virulenci Acanthamoeba castellanii. Je to volně žijící améba, která za výjimečných situací může u člověka vyvolat smrtelné zánětlivé onemocnění mozku nebo člověku poškodit zrak. Kultivací se savčími buňkami se nám povedlo prokázat vliv železa na virulenci améby za využití průtokové cytometrie. Na základě fluorescenčního značení jsme lokalizovali protein AC_IDIP (Iron-Deprivation Induced Protein) v cytosolu. Tento protein byl také izolován a byla proti němu vytvořena polyklonální protilátka, která byla použita ke sledování vlivu dostupnosti železa na hladinu AC_IDIP. Pomocí komparativní proteomické analýzy jsme byli schopni sledovat změny v proteomu A. castellanii v závislosti na zdroji živin. Identifikovali jsme velké množství proteinů, jež měly změněnou hladinu za podmínky, kde zdrojem živin byly savčí buňky. Jednalo se zejména o cytoskeletální proteiny. Oproti tomu zastoupení proteinů obsahujících železo, nebo se na jeho...
|
|
|
Význam morfologických, ultrastrukturních a molekulárních analýz pro vyšší systematiku nálevníků
Šimáčková, Aneta ; Čepička, Ivan (vedoucí práce) ; Hampl, Vladimír (oponent)
Nálevníci jsou jednou z největších skupin protist. Mají tři charakteristické vlastnosti - (1). přítomnost mnoha bičíků, jimiž je pokryta buňka, (2). jaderný dualismus a (3). konjugaci. Systematika kmene Ciliophora se od jeho založení velmi změnila. To zapříčinil rozvoj nových metod, kterými se nálevníci mohli studovat. První systémy byly založeny na základě morfologie struktur v orální oblasti. Na základě těchto struktur vydali Levine a kolektiv v roce 1980 systém nálevníků, v kterém rozdělili nálevníky do tří tříd. Zjistilo se, že tento systém není přirozený, jelikož orální struktury jsou variabilní. Jako lepší znak pro evoluci nálevníků se osvědčila somatická ultrastruktura. Systém na základě ní vydali Small a Lynn, kteří vytvořili v kmenu Ciliophora tři podkmeny a osm tříd. Molekulární analýzy tento systém nepotvrdily. Na základě nich se ukázala existence pouze dvou podkmenů (Postciliodesmatophora a Intramacronucleata) a počet tříd se zvýšil na jedenáct. Od té doby bylo definováno dalších 6 nových tříd nálevníků. Tyto třídy byly vytvořeny především na základě fylogenomických a fylogenetických analýz. V podkmenu Intramacronucleata byly pomocí fylogenomických analýz odhaleny tři evoluční linie SAL, CONthreeP a Protocruziea. Klíčová slova: nálevník, systém, orální ciliatura, somatická ciliatura,...
|
host ::
RSS.