|
|
Syntéza lidských ω-O-acylceramidů a hodnocení jejich vlivu na bariérové vlastnosti kožních lipidových membrán
Opálka, Lukáš ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Hampl, František (oponent) ; Kučerka, Norbert (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra anorganické a organické chemie Kandidát: Mgr. Lukáš Opálka Školitel: doc. PharmDr. Kateřina Vávrová, Ph.D. Název disertační práce: Syntéza lidských ω-O-acylceramidů a hodnocení jejich vlivu na bariérové vlastnosti kožních lipidových membrán Hlavním cílem této práce bylo připravit a dále studovat lidské acylceramidy (acylCer, ceramidy typu EO) se zaměřením na objasnění vztahu mezi koncentrací acylCer, strukturou jejich polární hlavy, schopností tvořit lamelární fáze a permeabilitou modelových lipidových membrán. Dalším cílem bylo připravit ceramid-1-fosfáty pro studium jejich signalizační role v kožní bariéře a analog gangliosidu GM1 s kratším acylem jako standard pro analýzu těchto lipidů. Ceramidy (Cer) patří do rodiny sfingolipidů. Jsou to centrální molekuly v metabolismu sfingolipidů a podílejí se jak na regulačních procesech v buňkách, tak na bariérové funkci lidské kůže. Hlavní kožní bariéru představuje stratum corneum (SC), což je nejsvrchnější vrstva kůže. Účelem SC je udržet homeostázu vnitřního prostředí a zabránit průniku exogenních látek, alergenů a bakterií do organismu. AcylCer se skládají ze sfingoidní báze, která je acylována ultra-dlouhou (≥ 30C) kyselinou, na jejíž ω-hydroxylové skupině je vázaná kyselina...
|
|
|
Preparation and Evaluation of New Ligands Targeting Organic Cation Transporters in the Central Nervous System for the Treatment of Depression
Monteiro, Andrea ; Roh, Jaroslav (vedoucí práce) ; Vávrová, Kateřina (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra organické a bioorganické chemie Student: Andrea Monteiro Školitel: doc. PharmDr. Jaroslav Roh, Ph.D. Školitelé-specialisti: Nicolas Pietrancosta, Ph.D. Sophie Gautron, Ph.D. Název: Příprava a hodnocení nových ligandů transportérů organických kationtů v centrálním nervovém systému pro léčbu deprese Transportéry organických kationtů v mozku (OCT2, OCT3) jsou polyspecifické přenašeče, které zajišťují facilitovanou difúzi, regulují aminergní tonus a mají komplementární roli k vysokoafinitním monoaminovým transportérům (serotoninový transportér SERT, noradrenalinový transportér NET a dopaminový transportér DAT) při zpětném vychytávání monoaminů v mozku. Jejich komplementární charakteristika ve srovnání s vysokoafinitními transportéry (rozšířená distribuce, širší farmakologický profil) a jejich zapojení do funkcí souvisejících s náladou činí z OCT v mozku relevantní a originální cíle pro vývoj nových antidepresiv. Nově vyvinutý H2-cyanome je prekurzor cyanomu, který cílí na OCT. Toto proléčivo vykazovalo slibnou antidepresivní účinnost v myším modelu chronické deprese. Limitací v užití tohoto proléčiva je jeho vysoká afinita k 1 adrenergním receptorům, což může mít za následek kardiovaskulární nežádoucí účinky. Cílem tohoto...
|
|
|
Adoptivní transfer tumor-specifických lymfocytů v imunoterapii nádorových onemocnění
Vávrová, Kateřina
Karcinom prostaty je druhou nejčastější příčinou úmrtí mužů na rakovinu v Evropě a USA. V kontextu dosavadních preklinických experimentů a klinických studií existují předpoklady pro úspěšné uplatnění imunoterapie v jeho léčbě. Slibných výsledků je dosaženo převážně kombinací různých léčebných modalit, kdy dochází k jejich synergickému protinádorovému působení. Jednou z možností je využití protinádorových vakcín a adoptivního T buněčného transferu. Téma této dizertační práce navazuje na dlouhodobý výzkumný program pracoviště kandidátky v oblasti protinádorové imunoterapie. Obecná část dizertační práce podává základní přehled o mechanismech protinádorové imunity a o roli jednotlivých složek imunitního systému při jejím zajištění. Další části se věnují současným imunoterapeutickým přístupům s důrazem na metodu adoptivního T buněčného transferu a jejího uplatnění v léčbě karcinomu prostaty. Ve vlastní výzkumné části předkládá vypracovaný experimentální protokol pro adoptivní transfer tumor specifických T lymfocytů, a dále protokol zabývající se ex vivo obohacením buněčných populací o peptid-specifické T lymfocyty u pacientů s karcinomem prostaty. V rámci našeho výzkumu uvádíme též výsledky klinické studie, která si kladla za cíl ověřit biologickou bezpečnost, schopnost indukce imunitní protinádorové...
|
|
|
Příprava analogů ceramidů a dihydroceramidů a hodnocení jejich vlivu na bariérovou funkci kůže
Jandovská, Kateřina ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Roh, Jaroslav (oponent)
Jandovská, Kateřina: Příprava analogů ceramidů a hodnocení jejich vlivu na bariérovou funkci kůže. Ceramidy patří mezi sfingolipidy, jejichž molekulu tvoří sfingoidní báze a dlouhá mastná kyselina. Jsou dosud známy nejenom jako důležití druzí poslové hrající významnou úlohu v buněčné diferenciaci, proliferaci a apoptóze, ale zároveň i jako podstatná složka funkční kožní bariéry. Ačkoli jsou tyto molekuly intenzivně studovány, přesný vliv jejich struktury na bariérovou funkci kůže není znám. Cílem mé práce bylo studovat vliv délky acylu a stereochemie na C3 u dihydroceramidů (tedy ceramidů bez dvojné vazby v poloze 4) na prostupnost modelových membrán simulujících kožní bariéru. Mým úkolem byla syntéza tří ceramidů s krátkým acylovým řetězcem o čtyřech uhlících (odvozených od dihydrosfingosinu (dS), L-threo-dihydrosfingosinu (L-dS)‚ a L-threo-sfingosinu (L-S)), příprava modelových membrán stratum corneum (SC) obsahujících dihydroceramidy s délkami acylu C2, C4, C6, C8 a C24 a připravené stereoizomery C4-ceramidů a C4-dihydroceramidů a následné hodnocení jejich elektrické impedance a permeability pro dvě modelová léčiva. Vliv připravených produktů nanesených na modelové membrány na permeabilitu těchto membrán byl hodnocen ve Franzových difuzních celách pomocí měření elektrické impedance a dvou...
|
|
|
Studium transdermální a dermální absorpce acyklických nukleosidfosfonátů ze skupiny 2,6-diaminopurinu
Diblíková, Denisa ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Zbytovská, Jarmila (oponent)
Acyklické nukleosidfosfonáty (ANP) jsou látky patřící do skupiny širokospektrých antivirotik s vysokým účinkem na herpes-, hepadna- a retroviry. Vykazují také rozsáhlou cytostatickou, antiparasitickou a imunomodulační aktivitu. Transdermální aplikací těchto látek se nabízí atraktivní a výhodná cesta podání, která je ovšem limitována polárním charakterem sloučenin, zejména jejich fosfonátovou skupinou. Cílem práce bylo studovat možnosti transdermální i dermální aplikace látek ze série 2,6-diaminopurinu, konkrétně (R)-PMPDAP a (S)-PMPDAP, (S)-HPMPDAP, 8-aza-(S)- HPMPDAP, cyklického (S)-HPMPDAP a dále lipofilních proléčiv hexadecyloxypropyl (HDP) esterů (R)-HDP-PMPDAP a (S)-HDP-HPMPDAP. Schopnost ANP procházet samostatně kůží je však velmi nízká. Z tohoto důvodu jsme studovali také vliv permeačního akcelerantu dodecylesteru kyseliny 6-(dimethylamino)hexanové (DDAK) na prostup těchto látek přes i do kůže. Hodnocení bylo prováděno in vitro za použití Franzových difúzních cel a vzorků lidské kůže. Výsledky práce potvrdily, že ANP (60 mM v 60 % propylenglykolu) procházejí v malém množství kůží (flux 0,53-1,40 nmol/cm2 /h), kromě lipofilních proléčiv (R)-HDP- PMPDAP a (S)-HDP-HPMPDAP, které jsme v akceptorové fázi vůbec nedetekovali. Nepozorovali jsme žádný rozdíl mezi (R) a (S) enantiomery. 1 % DDAK...
|
|
|
Syntéza a studium ceramidů s deuterovaným acylem
Hudská, Klára ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Nováková, Veronika (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra anorganické a organické chemie Kandidát: Klára Hudská Školitel: Doc. PharmDr. Kateřina Vávrová, Ph.D. Název diplomové práce: Syntéza a studium ceramidů s deuterovaným acylem Ceramidy jsou komplexní skupina lipidů patřící mezi sfingolipidy. Tvoří nejdůležitější složku stratum corneum a zásadně se podílejí na ochraně kůže před nadměrnými ztrátami vody a dalšími vnějšími vlivy. Přestože jsou ceramidy předmětem intenzivního výzkumu, přesný vliv jejich struktury na bariérovou funkci kůže nebyl dosud zcela objasněn. Cílem této diplomové práce byla příprava série ceramidů odvozených od sfingosinu s deuterovanými acyly o délce 4, 16 a 24 uhlíků a jejich studium pomocí infračervené spektroskopie pro porozumění chování ceramidů v SC a pochopení vztahů mezi jejich strukturou a účinkem. Studium připravených ceramidů pomocí ATR-FTIR spektroskopie prokázalo, že za fyziologické teploty kůže zaujímají řetězce lipidů orthorombické uspořádání převážně s all-trans konformací. Zatímco CerNS24 upřednostňuje v připravených lipidických směsích otevřenou konformaci, kdy je acyl CerNS24 asociovaný s acylem LA a cholesterol je asociovaný se sfingosinovým řetězcem, CerNS16 se s LA nemísí a zaujímá buď sponkovou konformaci nebo otevřenou konformaci s...
|
|
|
Studium topického podání Cidofoviru in vitro
Sedláčková, Martina ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Kováčik, Andrej (oponent)
Martina Sedláčková Studium topického podání cidofoviru in vitro Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Univerzita Karlova Abstrakt Cidofovir (CDV), antivirotikum ze skupiny acyklických nukleosidfosfonátů, je velmi účinnou látkou v léčbě různých infekcí virového původu. Nízké využití tohoto léčiva v topické terapii virových infekcí kůže je způsobeno jeho vysokou cenou. Tato práce se zabývá možnostmi zvýšení koncentrace a dostupnosti CDV v kůži, které by vedlo ke snížení nákladů na výrobu léčivých prostředků s tímto léčivem. Cílem práce bylo studium vlivu koncentrace CDV aplikovaného na kůži na jeho množství v různých vrstvách kůže. Dále byl zkoumán vliv přidání akcelerantu transdermální permeace dodecylesteru kyseliny 6-dimethylaminohexanové na prostup CDV do kůže. Oba vlivy byly zkoumány in vitro pomocí modifikovaných Franzových difúzních cel jak na vzorcích lidské kůže zdravé, tak i modelově poškozené (metodou tape stripping). Z námi zvolených kombinací výchozích vzorků 0,3%, 1% a 3% CDV s a bez použití akcelerantu dosahovalo nejvyšších koncentrací CDV v epidermis použití donorového vzorku 3% CDV v kombinaci s 1 % akcelerantu. Po použití tohoto vzorku byla koncentrace CDV v epidermis 1115 µg na gram, což je 1,45krát více než bez použití akcelerantu. Při použití kůže poškozené byla koncentrace CDV zvýšena...
|
|
|
Studium deplece cholesterolu v lidské kožní bariéře
Jančálková, Pavla ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Nováková, Veronika (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra organické a bioorganické chemie Pavla Audrlická Školitel: prof. PharmDr. Kateřina Vávrová, Ph.D. Název diplomové práce: Studium deplece cholesterolu v lidské kožní bariéře Kožní bariéra člověka spočívá v mezibuněčné lipidové matrix nejsvrchnější vrstvy kůže, stratum corneum (SC). Tuto lipidovou matrix tvoří přibližně ekvimolární směs ceramidů (Cer), volných mastných kyselin (MK) a cholesterolu (Chol).1 Cholesterol je nutný pro organizaci lipidů a tvorbu funkční bariéry. Není však znám důvod jeho přítomnosti v množství tak vysokém, že se s ostatními lipidy již nemísí a tvoří separované domény.2 Experimenty na syntetických membránách se sníženým obsahem Chol ukázaly, že pro tvorbu a komplexní funkci lipidové bariéry je dostačující molární poměr Cer:MK:Chol 1:1:0,4.3 Cílem této práce bylo snížit obsah Chol v ex vivo lidském SC a zkoumat vliv takového zásahu na permeabilitu a mikrostrukturu SC. Byla vyvinuta metoda selektivní extrakce Chol ze SC ex vivo od zdravých dárců pomocí methyl--cyklodextrinu (MCD). Obsah Chol byl snížen na 78 % původního množství, extrahované SC nejevilo změny v obsahu Cer a MK. Permeabilita byla studována pomocí měření transepidermální ztráty vody (TEWL), elektrické impedance (EI) a propustnosti pro theofylin...
|
|
|
Adoptivní transfer tumor-specifických lymfocytů v imunoterapii nádorových onemocnění
Vávrová, Kateřina ; Bartůňková, Jiřina (vedoucí práce) ; Němečková, Šárka (oponent) ; Reiniš, Milan (oponent)
Karcinom prostaty je druhou nejčastější příčinou úmrtí mužů na rakovinu v Evropě a USA. V kontextu dosavadních preklinických experimentů a klinických studií existují předpoklady pro úspěšné uplatnění imunoterapie v jeho léčbě. Slibných výsledků je dosaženo převážně kombinací různých léčebných modalit, kdy dochází k jejich synergickému protinádorovému působení. Jednou z možností je využití protinádorových vakcín a adoptivního T buněčného transferu. Téma této dizertační práce navazuje na dlouhodobý výzkumný program pracoviště kandidátky v oblasti protinádorové imunoterapie. Obecná část dizertační práce podává základní přehled o mechanismech protinádorové imunity a o roli jednotlivých složek imunitního systému při jejím zajištění. Další části se věnují současným imunoterapeutickým přístupům s důrazem na metodu adoptivního T buněčného transferu a jejího uplatnění v léčbě karcinomu prostaty. Ve vlastní výzkumné části předkládá vypracovaný experimentální protokol pro adoptivní transfer tumor specifických T lymfocytů, a dále protokol zabývající se ex vivo obohacením buněčných populací o peptid-specifické T lymfocyty u pacientů s karcinomem prostaty. V rámci našeho výzkumu uvádíme též výsledky klinické studie, která si kladla za cíl ověřit biologickou bezpečnost, schopnost indukce imunitní protinádorové...
|
|
|
Studium azaftalocyaninů jako zhášečů fluorescence v oligodeoxynukleotidových sondách
Demuth, Jiří ; Nováková, Veronika (vedoucí práce) ; Hocek, Michal (oponent) ; Vávrová, Kateřina (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Kandidát: Mgr. Jiří Demuth Školitel: doc. PharmDr. Veronika Nováková, Ph.D. Konzultant: prof. PharmDr. Petr Zimčík, Ph.D. Disertační práce: Studium azaftalocyaninů jako zhášečů v oligo-deoxynukleotidových sondách Ftalocyaniny (Pcs) a azaftalocyaniny (AzaPcs) jsou planární makrocyklické sloučeniny, které mají čistě syntetický původ, byť jsou odvozeny od přírodních barviv - porfyrinů. Díky rozsáhlému 18 -elektronovému konjugovanému systému mají Pcs a AzaPcs velice zajímavé fotofyzikální vlastnosti, a proto nacházejí uplatnění v elektrotechnice, jako materiál v průmyslu či v medicinálních disciplínách. Oktaaminoalkyl substituované tetrapyrazinoporfyraziny (TPyzPzs), které patří do rodiny AzaPcs, mají díky extrémně rychlému intramolekulárnímu přenosu náboje prakticky nulovou vlastní fluorescenci. Využitím této schopnosti v oblasti vývoje fluorescenčních sond, kde se dají tyto TPyzPzs použít jako účinné zhášeče pro různé fluorofory, se zabývá tato disertační práce. Takovéto sondy mohou najít uplatnění v různorodých experimentech napříč vědními obory např. biochemie, forenzní či genetická analýza. Syntetická část disertační práce navazuje na předchozí studium TPyzPzs v naší výzkumné...
|
host ::
RSS.