|
|
Working performance of vertically aligned carbon nanotubes as platforms for future biosensing applications
Štipková, Tereza ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Jáč, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát: Tereza Štipková Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Školitel specialista: Assist. Prof. Gulnara Safina, Ph.D. Název diplomové práce: Charakteristika vertikálně uspořádaných uhlíkových nanotrubic jako platforem pro aplikace v oblasti biosenzorů Monitorování glukózy v krvi je nezbytnou součástí moderní terapie diabetu. V této práci byly použity mnohostěnné vertikálně uspořádané uhlíkové nanotrubice (CNT) pro konstrukci nového biosenzoru třetí generace. Hlavním zaměřením práce bylo zjištění možnosti uplatnění senzoru pro monitorování glukosy. Amperometrický biosenzor na bázi CNT byl vyvinut imobilizací celobiosadehydrogenasy z houby Corynascus thermophilus na povrch CNT pomocí fyzikální adsorpce. Vysoce hydrofobní povrch nanotrubic byl modifikován 0,0001% (w/v) polyvinylalkoholem (PVA) za účelem umožnění adsorpce enzymu. Výsledky měření pomocí rentgenové fotoelektronové spektroskopie potvrdily úspěšnou imobilizaci enzymu na povrch CNT modifikován PVA. Topografie povrchu a elementární složení nanomateriálu byly zkoumány rastrovacím elektronovým mikroskopem a metodou energiově disperzní spektroskopie. Optimální podmínky pro elektrochemické měření v průtokové cele s nástřiky glukosy zahrnovaly...
|
|
|
Využití kapilární elektroforézy s bezkontaktní vodivostní detekcí pro analýzu proteinů
Vatrasová, Kateřina ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Jáč, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Kateřina Vatrasová Školitel: doc. RNDr. Miroslav Polášek, CSc. Konzultant: PharmDr. Klára Petrů, Ph.D. Název diplomové práce: Využití kapilární elektroforézy s bezkontaktní vodivostní detekcí pro analýzu proteinů V současnosti existují různé způsoby stanovení bílkovin. Cílem této práce bylo vyvinout, optimalizovat a charakterizovat metodu kapilární elektroforézy s vodivostní detekcí pro analýzu modelové směsi proteinů (α-laktalbumin, β-laktoglobulin, karboanhydráza, lysozym a ribonukleáza) a porovnat s konvenční UV detekcí. Mezi zkoumané podmínky patřily vliv pokrytí vnitřní stěny kapiláry na adsorpci proteinů, dále složení a koncentrace vhodného separačního elektrolytu, vliv napětí a teploty. K analýze byla využita křemenná kapilára o délce 50 cm (efektivní délka pro vodivostní detektor 35cm, pro UV detektor 41,5 cm) a vnitřním průměru 50 μm. V případě UV detekce byla vybrána vlnová délka 210 nm. Vhodným způsobem úpravy kapiláry bylo statické pokrytí vnitřní stěny několikanásobnou vrstvou iontových polymerů (polybren-dextran sulfát- polybren). Rozdělení směsi pěti proteinů bylo dosaženo v základním elektrolytu 1,5M kyselině octové (pH 2). Separace probíhala při napětí -25 kV a teplotě 25 řC....
|
|
|
Analýza biologicky aktivních látek s využitím kapilárních elektromigračních metod
Jáč, Pavel ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Tesařová, Eva (oponent) ; Jokl, Vladimír (oponent)
Shrnutí Předkládaná dizertační práce se zabývá využitím kapilárních elektromigračních metod pro analýzu biologicky aktivních sloučenin. Teoretická část této dizertační práce se stručně zabývá historickým vývojem, instrumentálním zázemím a separačními mechanismy různých typů elektromigračních metod. Kromě těchto témat byl podán stručný přehled o možnostech chirálních separací pomocí CE a tvorbě komplexů za účelem ovlivnění selektivity. Poslední dvě kapitoly teoretické části stručně pojednávají o optimalizaci a validaci elektromigračních metod. Výsledková část je tvořena komentářem k publikovaným pracím, které jsou v plném znění uvedeny v přílohách. Tematicky lze výsledky prezentované v této dizertační práci rozdělit do dvou hlavních celků. Prvním okruhem je využití elektromigračních metod v analýze polyfenolů v rostlinném materiálu a druhým tematickým celkem je vývoj, optimalizace a validace elektromigračních metod pro kontrolu jakosti léčivých přípravků a/ nebo potravinových doplňků. V rámci prvního okruhu byla vypracována rešeršní práce shrnující trendy v analýze polyfenolů pomocí CE za období 1999-2005. Další publikací zabývající se analýzou polyfenolů je již původní práce zaměřená na využití komplexačního činidla - wolframanu sodného - jako aditiva v BGE pro analýzu polyfenolů v rostlinném materiálu....
|
|
| |
|
| |
|
|
Využití nanokompozitů jako povrchů pro SALDI-MS.
Böhmová, Eva ; Jáč, Pavel (oponent) ; Solich, Petr (vedoucí práce)
Ionizace laserem za účasti matrice (matrix-assisted laser desorption/ionization, MALDI) patří mezi měkké (šetrné) ionizační techniky hmotnostní spektrometrie a je důležitá zejména pro analýzu biomolekul a syntetických makromolekul. Použití MALDI pro analýzu nízkomolekulárních sloučenin je však obtížné, protože ionty matrice interferují s analýzou malých molekul. Jako řešení tohoto problému bylo vyvinuto několik metod, které využívají ionizaci laserem za účasti povrchu (surface- assisted laser desorption/ionization, SALDI). Předmětem výzkumu této práce byly možnosti využití nanokompozitů složených z polylaktidu a nanočástic halloysitu, hydroxyapatitu, oxidu hořečnatého, montmorillonitu, oxidu křemičitého, nitridu křemičitého, oxidu titaničitého a grafitizovaných sazí (graphitized carbon black, GCB) jako povrchů pro SALDI. Intenzity signálů tří léčiv, acebutololu, karbamazepinu a propranololu, získané z těchto povrchů byly porovnány s intenzitami signálů získaných bez použití matrice z nerezové destičky pro MALDI. Intenzita signálu byla zvýšena pouze, když byly použity tyto tři nanokompozity: nanokompozit s obsahem 30% GCB, nanokompozit s 10% nitridu křemičitého a nanokompozit s 10% oxidu titaničitého, a analyty v koncentraci 150 ppm. Díky tomu, že polylaktid je biodegradabilní a lze ho získat z...
|
|
|
Porovnání APCI a ESI ionizace při vývoji UPLC-MS/MS metodiky pro stanovení steroidních látek ze skupiny estrogenů a progestinů
Rabatinová, Martina ; Jáč, Pavel (oponent) ; Nováková, Lucie (vedoucí práce)
Sledovanými látkami v této diplomové práci jsou ženské pohlavní hormony, jejichž prob- lematika v environmentální analýze nabývá na významu. Vliv hormonálně aktivních látek na životní prostřední a člověka má rostoucí tendenci. Již v 80. letech 20. století byly pozorovány deformity na rybách vyskytujících se v řekách. Mezi sloučeniny vykazující tyto účinky patří kromě steroidních hormonů také pesticidy, tenzidy a plastifikátory. Estrogeny, jak přirozené tak syntetické, jsou sloučeniny s vysokou hormonální aktivi- tou. Tyto sloučeniny zapříčiňují rakovinu prsu, abnormality v oblasti pohlavních orgánů a snížení početu spermií. Jsou také příčinou feminizace, hermafroditizmu a klesající plod- nosti u zvířat. Stoupající riziko znečištění vod nutí analytické laboratoře vyvíjet nejdokon- alajší instrumentální metody ke stanovení steroidních látek. Vliv estrogenů na životní prostředí byl pozorován již při koncentracích v pg/ml. Tato práce se zabývá vývojem metody pro kvalitativní a kvantitativní analýzu deseti látek steroidní povahy ze skupiny ženských pohlavních hormonů pomocí ultravysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostním spektrometrem typu trojitého kva- drupólu s možností tandemové hmotnostní detekce (UHPLC-MS/MS). Separace byla provedena na koloně BEH Phenyl. Jako mobilní fáze byl...
|
|
|
Separace chirálních pesticidů pomocí cyklodextrinů kapilární elektroforézou
Denková, Barbora ; Polášek, Miroslav (oponent) ; Jáč, Pavel (vedoucí práce)
V této diplomové práci je představena předběžná studie využití EKC-PF (s cyklodextrinem, jako chirálním selektorem) pro separaci chirálních pesticidů. Úvodem jsou prezentovány teoretické informace týkající se přístrojového vybavení, teorie elektroforézy jakož i různých elektroforetických technik. Dále je zmíněna problematika chirálních separací pomocí CE, využití cyklodextrinů jako chirálních selektorů v CE a možnosti techniky částečného plnění kapiláry. Nakonec jsou definovány chirální pesticidy a uvedeny informace o separaci jejich enantiomerů. Experimentální část se zabývá hodnocením separace enantiomerů některých pesticidů (trichlorphon, cyprokonazol, hexakonazol, imazalil, myklobutanil, penkonazol, tebukonazol, propikonazol, a benalaxyl) pomocí CM-β-CD, jako chirálního selektoru. Nejprve byla provedena univariantní optimalizace separačních podmínek (doba nástřiku CM- β-CD, napětí, teplota, pH, povaha a koncentrace elektrolytu) u benalaxylu. Dále byl realizován screening efektu nástřikového času CM-β-CD na rozlišení a migrační časy u ostatních pesticidů se záměrem zjistit potenciál tohoto CD jako chirálního selektoru pro enantioselektivní separaci tohoto typu analytů.
|
|
|
Analýza protichřipkových léčiv s využitím elektroforetických metod
Kubíková, Drahomíra ; Jáč, Pavel (oponent) ; Pospíšilová, Marie (vedoucí práce)
V této práci je zachycen vývoj metody pro separaci a stanovení paracetamolu (PA), kofeinu (CO), kyseliny askorbové (AA) a fenylefrinu (FE) v léčivém přípravku pomocí micelární elektrokinetické kapilární chromatografie (MEKC). Separace probíhala v nepotažené křemenné kapiláře (31,2 cm x 50 m, efektivní délka 21 cm) při 20 kV. Detekce probíhala při vlnových délkách 190 nm a 265 nm. Optimální základní elektrolyt měl složení: 100 mM kyselina boritá s obsahem 100 mM sodecylsíranu sodného (SDS) v 10 % methanolu. pH* elektrolytu bylo upraveno na hodnotu 7,8 pomocí 50 mM tetraboritanu sodného. Jako vnitřní standard byl použit methylparaben (MP). Validovaná metoda byla úspěšně použita pro analýzu léčivého přípravku (Coldrex tbl.).
|
|
|
Využití UHPLC s různými typy detekce v oblasti environmentální a potravinové analýzy
Rejman, David ; Jáč, Pavel (oponent) ; Nováková, Lucie (vedoucí práce)
Využití UHPLC s různými typy detekce v oblasti environmentální a potravinové analýzy Abstrakt Cílem práce bylo seznámení s možnostmi využití UHPLC instrumentace ve spojení s různými typy detekce při chromatografických separacích látek v oblasti environmentální a potravinové analýzy. Dalším cílem bylo vyhledat a prostudovat větší počet odborných článků týkajících se UHPLC metodiky, které jsou v současnosti dostupné v internetových databázích ScienceDirect a Web of Science. Na základě informací z odborných článků je v práci uveden grafický přehled týkající se počtu vyhledaných článků a skupin analyzovaných látek v jednotlivých letech. V úvodu práce jsou zmíněny van Deemterova, Giddingsova a Knoxova teorie pro účinnost chromatografického systému. Jedná se o teorie, které jsou podstatné pro pochopení principu účinnosti chromatografické separace. Následující kapitoly se zabývají problematikou vývoje chromatografie v posledních desetiletích především v oblasti délky a typu analytických kolon, velikosti náplňových částic či teploty a tlaku v chromatografickém systému. Vývoj dospěl v dnešní době až ke kolonám o rozměrech 50 x 1 mm, které jsou plněny částicemi menšími než 2 μm a jsou schopny pracovat za tlaků kolem 100 MPa. V dalších kapitolách je zmíněna problematika týkající se hmotnostní spektrometrie,...
|
host ::
RSS.