|
|
Vývoj kapilární elektromigrační metody pro stanovení obsahových látek silymarinu I.
Riasová, Petra ; Jáč, Pavel (vedoucí práce) ; Pospíšilová, Marie (oponent)
Univerzita Karlova v Prahe Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytickej chémie Kandidát: Petra Riasová Školiteľ: PharmDr. Pavel Jáč, Ph.D. Názov dipomovej práce: Vývoj kapilární elektromigrační metody pro stanovení obsahových látek silymarinu I. Táto diplomová práca sa venuje vývoju metódy na stanovenie jednotlivých flavonolignanov obsiahnutých v silymaríne pomocou micelárnej elektrokinetickej chromatografie. Optimalizácia metódy prebiehala testovaním vplyvu parametrov ako sú koncentrácia kyseliny boritej, koncetrácia dodecylsíranu sodného, koncetrácia cyklodextrínu, obsah organického modifikátora, pH a separačné napätie na separáciu. V priebehu optimalizácie bola najprv aplikovaná univariantná optimalizácia, ktorá ale neviedla k nájdeniu optimálnych separačných podmienok a tak bol v ďalšom priebehu práce použitý chemometrický prístup k vývoji separačnej metódy. Separácia prebiehala v kremennej kapiláre s priemerom 50 µm, s celkovou dĺžkou 47,2 cm a efektívnou dĺžkou 38,7 cm a neskôr bola metóda prevedená do kremennej kapiláry s vnútorným priemerom 25 µm (a s bublinovou detekčnou celou s priemerom 125 µm) s celkovou dĺžkou 48,5 cm a efektívnou dĺžkou 40 cm. UV detekcia prebiehala pri vlnových dĺžkach 200 a 320 nm. Kapilára bola termostatovaná na 25řC. K najoptimálnejšiemu rozdeleniu...
|
|
|
Analýza obsahových látek rodu Psilocybe I.
Kobrlová, Tereza ; Jahodář, Luděk (vedoucí práce) ; Jáč, Pavel (oponent)
1 ABSTRAKT Cílem této diplomové práce bylo stanovit obsahy dvou hlavních alkaloidů druhů r. Psilocybe vyskytujících se na území České republiky. Správnost určování druhů byla kontrolována odborníkem-mykologem. Kvalitativní a kvantitativní stanovení obsahových látek ve třech sbíraných druzích rodu Psilocybe bylo provedeno metodou LC-MSn (LIT). Vzorky hub byly nasbírány převážně na severu a severovýchodě Čech. Byly nalezeny tři druhy r. Psilocybe. Nejvíce nalézaným druhem byla P. serbica var. bohemica, dále P. semilanceata a P. serbica var. arcana byla objevena pouze na jednom nalezišti. Vzorky pocházejí z celkem 35 nalezišť v rámci 18 lokalit. Z kvalitativního hlediska byly oba hlavní alkaloidy potvrzeny ve všech vzorcích. Kvantitativní výsledky pro obsah psilocinu a psilocybinu (v tomto pořadí) jsou následující: P. bohemica 0,005 - 0,152 %, 0,000 - 0,048 %; P. semilanceata 0,087 - 0,337 %, 0,000 - 0,005 %; P. arcana 0,018 - 0,031 %, 0,003 - 0,022 %. Výsledky ve všech lokalitách jsou podobné a závislé spíše na druhu houby. Naše výsledky jsou vztaženy na suchou hmotu. Práce přinesla zásadní poznatky k budoucí optimalizaci analytické metody a předpoklady pro rozšíření projektu o další lokality a stanovení vedle hlavních obsahových látek i látek minoritních.
|
|
| |
|
|
Working performance of vertically aligned carbon nanotubes as platforms for future biosensing applications
Štipková, Tereza ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Jáč, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát: Tereza Štipková Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Školitel specialista: Assist. Prof. Gulnara Safina, Ph.D. Název diplomové práce: Charakteristika vertikálně uspořádaných uhlíkových nanotrubic jako platforem pro aplikace v oblasti biosenzorů Monitorování glukózy v krvi je nezbytnou součástí moderní terapie diabetu. V této práci byly použity mnohostěnné vertikálně uspořádané uhlíkové nanotrubice (CNT) pro konstrukci nového biosenzoru třetí generace. Hlavním zaměřením práce bylo zjištění možnosti uplatnění senzoru pro monitorování glukosy. Amperometrický biosenzor na bázi CNT byl vyvinut imobilizací celobiosadehydrogenasy z houby Corynascus thermophilus na povrch CNT pomocí fyzikální adsorpce. Vysoce hydrofobní povrch nanotrubic byl modifikován 0,0001% (w/v) polyvinylalkoholem (PVA) za účelem umožnění adsorpce enzymu. Výsledky měření pomocí rentgenové fotoelektronové spektroskopie potvrdily úspěšnou imobilizaci enzymu na povrch CNT modifikován PVA. Topografie povrchu a elementární složení nanomateriálu byly zkoumány rastrovacím elektronovým mikroskopem a metodou energiově disperzní spektroskopie. Optimální podmínky pro elektrochemické měření v průtokové cele s nástřiky glukosy zahrnovaly...
|
|
|
Využití kapilární elektroforézy s bezkontaktní vodivostní detekcí pro analýzu proteinů
Vatrasová, Kateřina ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Jáč, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Kateřina Vatrasová Školitel: doc. RNDr. Miroslav Polášek, CSc. Konzultant: PharmDr. Klára Petrů, Ph.D. Název diplomové práce: Využití kapilární elektroforézy s bezkontaktní vodivostní detekcí pro analýzu proteinů V současnosti existují různé způsoby stanovení bílkovin. Cílem této práce bylo vyvinout, optimalizovat a charakterizovat metodu kapilární elektroforézy s vodivostní detekcí pro analýzu modelové směsi proteinů (α-laktalbumin, β-laktoglobulin, karboanhydráza, lysozym a ribonukleáza) a porovnat s konvenční UV detekcí. Mezi zkoumané podmínky patřily vliv pokrytí vnitřní stěny kapiláry na adsorpci proteinů, dále složení a koncentrace vhodného separačního elektrolytu, vliv napětí a teploty. K analýze byla využita křemenná kapilára o délce 50 cm (efektivní délka pro vodivostní detektor 35cm, pro UV detektor 41,5 cm) a vnitřním průměru 50 μm. V případě UV detekce byla vybrána vlnová délka 210 nm. Vhodným způsobem úpravy kapiláry bylo statické pokrytí vnitřní stěny několikanásobnou vrstvou iontových polymerů (polybren-dextran sulfát- polybren). Rozdělení směsi pěti proteinů bylo dosaženo v základním elektrolytu 1,5M kyselině octové (pH 2). Separace probíhala při napětí -25 kV a teplotě 25 řC....
|
|
|
Analýza biologicky aktivních látek s využitím kapilárních elektromigračních metod
Jáč, Pavel ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Tesařová, Eva (oponent) ; Jokl, Vladimír (oponent)
Shrnutí Předkládaná dizertační práce se zabývá využitím kapilárních elektromigračních metod pro analýzu biologicky aktivních sloučenin. Teoretická část této dizertační práce se stručně zabývá historickým vývojem, instrumentálním zázemím a separačními mechanismy různých typů elektromigračních metod. Kromě těchto témat byl podán stručný přehled o možnostech chirálních separací pomocí CE a tvorbě komplexů za účelem ovlivnění selektivity. Poslední dvě kapitoly teoretické části stručně pojednávají o optimalizaci a validaci elektromigračních metod. Výsledková část je tvořena komentářem k publikovaným pracím, které jsou v plném znění uvedeny v přílohách. Tematicky lze výsledky prezentované v této dizertační práci rozdělit do dvou hlavních celků. Prvním okruhem je využití elektromigračních metod v analýze polyfenolů v rostlinném materiálu a druhým tematickým celkem je vývoj, optimalizace a validace elektromigračních metod pro kontrolu jakosti léčivých přípravků a/ nebo potravinových doplňků. V rámci prvního okruhu byla vypracována rešeršní práce shrnující trendy v analýze polyfenolů pomocí CE za období 1999-2005. Další publikací zabývající se analýzou polyfenolů je již původní práce zaměřená na využití komplexačního činidla - wolframanu sodného - jako aditiva v BGE pro analýzu polyfenolů v rostlinném materiálu....
|
|
| |
|
| |
|
|
Využití nanokompozitů jako povrchů pro SALDI-MS.
Böhmová, Eva ; Jáč, Pavel (oponent) ; Solich, Petr (vedoucí práce)
Ionizace laserem za účasti matrice (matrix-assisted laser desorption/ionization, MALDI) patří mezi měkké (šetrné) ionizační techniky hmotnostní spektrometrie a je důležitá zejména pro analýzu biomolekul a syntetických makromolekul. Použití MALDI pro analýzu nízkomolekulárních sloučenin je však obtížné, protože ionty matrice interferují s analýzou malých molekul. Jako řešení tohoto problému bylo vyvinuto několik metod, které využívají ionizaci laserem za účasti povrchu (surface- assisted laser desorption/ionization, SALDI). Předmětem výzkumu této práce byly možnosti využití nanokompozitů složených z polylaktidu a nanočástic halloysitu, hydroxyapatitu, oxidu hořečnatého, montmorillonitu, oxidu křemičitého, nitridu křemičitého, oxidu titaničitého a grafitizovaných sazí (graphitized carbon black, GCB) jako povrchů pro SALDI. Intenzity signálů tří léčiv, acebutololu, karbamazepinu a propranololu, získané z těchto povrchů byly porovnány s intenzitami signálů získaných bez použití matrice z nerezové destičky pro MALDI. Intenzita signálu byla zvýšena pouze, když byly použity tyto tři nanokompozity: nanokompozit s obsahem 30% GCB, nanokompozit s 10% nitridu křemičitého a nanokompozit s 10% oxidu titaničitého, a analyty v koncentraci 150 ppm. Díky tomu, že polylaktid je biodegradabilní a lze ho získat z...
|
|
|
Porovnání APCI a ESI ionizace při vývoji UPLC-MS/MS metodiky pro stanovení steroidních látek ze skupiny estrogenů a progestinů
Rabatinová, Martina ; Jáč, Pavel (oponent) ; Nováková, Lucie (vedoucí práce)
Sledovanými látkami v této diplomové práci jsou ženské pohlavní hormony, jejichž prob- lematika v environmentální analýze nabývá na významu. Vliv hormonálně aktivních látek na životní prostřední a člověka má rostoucí tendenci. Již v 80. letech 20. století byly pozorovány deformity na rybách vyskytujících se v řekách. Mezi sloučeniny vykazující tyto účinky patří kromě steroidních hormonů také pesticidy, tenzidy a plastifikátory. Estrogeny, jak přirozené tak syntetické, jsou sloučeniny s vysokou hormonální aktivi- tou. Tyto sloučeniny zapříčiňují rakovinu prsu, abnormality v oblasti pohlavních orgánů a snížení početu spermií. Jsou také příčinou feminizace, hermafroditizmu a klesající plod- nosti u zvířat. Stoupající riziko znečištění vod nutí analytické laboratoře vyvíjet nejdokon- alajší instrumentální metody ke stanovení steroidních látek. Vliv estrogenů na životní prostředí byl pozorován již při koncentracích v pg/ml. Tato práce se zabývá vývojem metody pro kvalitativní a kvantitativní analýzu deseti látek steroidní povahy ze skupiny ženských pohlavních hormonů pomocí ultravysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostním spektrometrem typu trojitého kva- drupólu s možností tandemové hmotnostní detekce (UHPLC-MS/MS). Separace byla provedena na koloně BEH Phenyl. Jako mobilní fáze byl...
|
host ::
RSS.