|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin IV. Alkaloidy Vinca minor L.
Vítovcová, Aneta ; Ločárek, Miroslav (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Vítovcová, A.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin IV. Alkaloidy Vinca minor L. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2016. Extrakt Vinca minor L. byl rozdělen na frakce sloupcovou chromatografií. Flash chromatografie, preparativní TLC a krystalizace vedly k izolaci 2 alkaloidů z frakce č. 2 a č. 5. Alkaloidy byly identifikovány pomocí GC/MS jako (+)-vinkaminorin a vinkorin. Tyto alkaloidy byly testovány na inhibiční aktivitu IC50 vůči cholinesterázám (AChE a BuChE). Získané aktivity IC50 byly porovnávány se standardy (galantamin, huperzin A). Nejzajímavější aktivitu oproti galantaminu (AChE 1,710 ± 0,065 µM, BuChE 42,30 ± 1,30 µM) a huperzinu A (AChE 0,033 ± 0,001 µM, BuChE > 1000 µM) vykazoval vinkorin (AChE > 1000 µM, BuChE 9,75 ± 0,45 µM). Jeho aktivita vůči BuChE je vyšší, než aktivita obou standardů. Inhibiční aktivity (+)-vinkaminorinu (AChE 746,5 ± 84,13 µM, BuChE 684,32 ± 70,66 µM) jsou zanedbatelné. Klíčová slova: Alzheimerova choroba, cholinesteráza, Apocynaceae, Vinca minor L., indolové alkaloidy
|
|
|
Farmakognostická studie Alnus spp.
Chlebek, Jakub ; Jahodář, Luděk (vedoucí práce) ; Karlíčková, Jana (oponent)
Karlova Univerzita v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické botaniky a ekologie Téma diplomové práce: Farmakognostická studie Alnus spp. Student: Jakub Chlebek Abstrakt Diplomová práce Farmakognostická studie Alnus spp. se skládá z teoretické a experimentální části. Teoretická část obsahuje botanickou charakteristiku třech domácích druhů (Alnus glutinosa, Alnus incana, Alnus rugosa) v České republice, fytochemický přehled sloučenin a jejich biologických aktivit v rodě Alnus. Experimentální část pojednává o fytochemické studii a biologické aktivitě látek v kořenech Alnus glutinosa. Sušené kořeny olše lepkavé (Alnus glutinosa) byly extrahovány roztokem aceton-voda (7:3). Souhrnný extrakt byl chromatografován přes silikagelovou kolonu využívající gradient MeOH-CHCl3 (0, 1, 2, 4, 8, 16, 32, 100 %). Celkově bylo odebráno 36 frakcí. Všechny separace byly analyzovány pomocí TLC (hexan-ethylacetát-methanol, 2:2:1). Steroly byly detekovány ve frakci č. 7 pomocí TLC, teploty tání a GC-MS. Z majoritních sterolů byly prokazány β-sitosterol a β-sitostanol, z minoritních sterolů campestanol, campesterol. Frakce č. 10 a 19 byly analyzovány pomocí HPLC. Antioxidační aktivita frakce č. 19, měřena pomocí DPPH radikálu, byla nízká (EC50 0,32 mg/ml). Zkušenosti z testovací silikagelové kolony byly...
|
|
|
In vitro studium mechanismu protinádorového účinku montaninových alkaloidů čeledi Amaryllidaceae
Koutová, Darja ; Havelek, Radim (vedoucí práce) ; Tichý, Aleš (oponent) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Souhrn Možnosti současné terapie nádorových onemocnění jsou široké, přesto však tato onemocnění stále patří mezi nejčastější příčiny úmrtí. Dosavadní poznatky biomedicínského výzkumu se čím dál tím více uplatňují v léčebné strategii tohoto typu onemocnění. Pochopení molekulárních drah spojených se vznikem nádorových buněk, jejich progresí a metastází vedl k objevu nových protinádorových léčiv a rozvoji cílené léčby. Současně také poznání molekulárního mechanismu účinku protinádorových léčiv získaných z rostlin či jejich semisyntetických derivátů umožnuje rozšířit portfolio dosud používaných cytostatik. Cílem disertační práce bylo studium cytotoxického a cytostatického účinku dosud neprozkoumaných isochinolinových alkaloidů montaninového typu in vitro s použitím panelu nádorových buněčných linií a nenádorové buněčné linie lidských plicních fibroblastů. V počáteční fázi studie byly základní typy montaninových alkaloidů - montanin a pankracin - izolovány, dále podrobeny screeningu cytotoxicity s použitím panelu devíti nádorových buněčných linií odlišného histotypu a jedné nenádorové buněčné linie plicních fibroblastů. Byly stanoveny hodnoty 50 % inhibiční koncentrace IC50. Pankracin, parentní alkaloid čeledi Amaryllidaceae, byl komplexně prostudován s cílem pochopit molekulární mechanismus jeho účinku,...
|
|
|
Využití separačních technik ve fytochemické analýze
Víchová, Simona ; Jenčo, Jaroslav (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra farmaceutické botaniky Kandidát: Simona Víchová Školitel: RNDr. Jaroslav Jenčo, Ph.D. Název diplomové práce: Využití separačních technik ve fytochemické analýze Alkaloidní extrakt získaný z nati s nezralými tobolkami z rostliny Papaver rhoeas L. byl podroben fytochemické studii. Sumární extrakt byl rozdělen na jednotlivé frakce pomocí Flash chromatografie. Po provedení biologických testů inhibičních aktivit vůči acetylcholinesteráze a butyrylcholinesteráze byla vybrána frakce PPR-11 a PPR-12, která vykazovala nejvyšší aktivitu vůči butyrylcholinesteráze (95,55 ± 0,96 a 97,03 ± 0,79 % inhibice butyrylcholinesterázy při 50 µg/ml). Spojená frakce PPR 11-12 byla purifikována pomocí preparativní chromatografie na jednotlivé podfrakce, které byly přečištěny pomocí preparativní tenkovrstvé chromatografie. Z podfrakce PPR 11-12Fr#8-A byla získána monokomponentní krystalická látka alkaloidního charakteru. Na základě instrumentálních metod byl analyt identifikován jako alkaloid aporfinového typu (+)-kaaverin. U (+)-kaaverinu byly stanovené inhibiční aktivity vůči acetylcholinesteráze a butyrylcholinesteráze, a porovnány s rutinně využívanými fytofarmaky k léčbě Alzheimrovy choroby. Naměřené hodnoty byly vyjádřeny jako IC50. Klíčová...
|
|
|
Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L.
Faschingbauer, Jakub ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Šafratová, Marcela (oponent)
Faschingbauer J.: Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L.. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2019. V rámci screeningu biologicky aktivních sekundárních metabolitů rostlin, prováděné na katedře farmaceutické botaniky FAF UK, byly zkoumány vybrané taxony rodu Centaurea (Asteraceae). Tato studie se zabývá základním fytochemickým výzkumem extraktů připravených z nažek druhů Centaurea cyanus, Centaurea jacea, Centaurea scabiosa, Centaurea pseudophrygia,Centuarea stoebe, Centaurea solstitialis a Centaurea benedicta. Pro objasnění jednotlivých skupin sekundárních metabolitů byly připravené extrakty podrobené důkazovým reakcím na TLC a MS analýze (EI, ESI). Ethyl-acetátové i sumární ethanolové extrakty byly zkoumány na potenciální inhibiční aktivitu vůči lidské erytrocytární acetylcholinesterase (AChE) a plazmové butyrylcholinesterase (BChE) a cytotoxictě vůči vybraným 9 nádorovým liniím. Zajímavou cholinesterasovou aktivitu vykazoval ethyl- acetátový extrakt C. cyanus, který selektivně inhiboval BChE (IC50 BChE = 22,62 ± 3,62 µg/ml; IC50 AChE = 221,50 ± 44,56 µg/ml). Ostatní ethyl-acetátové a ethanolové extrakty dalších vybraných druhů rodu Centaurea byly vůči...
|
|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita VIII.
Hojgrová, Veronika ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Šafratová, Marcela (oponent)
V. Hojgrová: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita VIII. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky. Počet stran 69. Tato diplomová práce se zabývá izolací alkaloidů z Vinca minor L. z čeledi Apocynaceae. Separace alkaloidů z vybrané frakce (VM 215-258), respektive z jejich podfrakcí (VM 34-41, VM 86, VM 87-113) probíhala pomocí preparativní TLC. Podařilo se izolovat dva čisté alkaloidy z podfrakce (VH 34-41). První alkaloid VH-1, který nebyl doposud izolován a druhý alkaloid VH-2: (-)-raukubainin. Alkaloidy byly identifikovány na základě EI-MS, LC-MS, NMR a optické otáčivosti a byly porovnány s daty v odborné literatuře. Izolované alkaloidy byly testovány na inhibiční aktivitu vůči acetylcholinesterase (AChE), butyrylcholinesterase (BuChE) a prolyloligopeptidase (POP) a na cytotoxicitu. Obě látky nevykazovaly po změření významnou cholinesterasovou inhibiční aktivitu IC50 vůči AChE, vůči BuChE vykazoval mírnou aktivitu pouze (-)-raukubainin (IC50 = 94 ± 7 μM), VH-1 byl shledán jako neaktivní (IC50 >100 μM). Inhibiční aktivita vůči POP byla testována zatím pouze u (-)-raukubaininu; byl shledán neaktivním (IC50 > 1000 µM). Výsledky cytotoxické aktivity alkaloidů (-)-raukubaininu a VH-1 v době odevzdávání této diplomové...
|
|
|
Vinca minor L. alkaloids and their biological activity II.
Pavuková, Simona ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Pavuková, S.: Alkaloidy Vinca minor L. a ich biologická aktivita II. Diplomová práca, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutickej botaniky, Hradec Králové 2021. Vinca minor L. je druh kvitnúceho polokru, pôvodom hlavne zo strednej a južnej Európy, ktorý obsahuje viac než 50 indolových alkaloidov. Pri screeningu potenciálnych rastlinných inhibítorov namierených proti ľudskej AChE a BuChE, preukázal alkaloidný extrakt zo sušených nadzemných častí Vinca minor silnú a selektívnu inhibičnú aktivitu namierenú voči BuChE s hodnotou IC50 13,60 ± 0,83 µg/ml avšak proti AChE bol neaktívny (hodnota IC50 >100 µg/ml). Vybraná frakcia VM 323 - 327 (4,72 g) bola rozdelená pomocou stĺpcovej chromatografie na silikagelu stupňovitou elúciou za použitia chloroformu a etanolu a celkovo sa získalo 7 spojených frakcií. Opakovaná preparatívna TLC na silikagelu viedla k izolácii troch zlúčenín; novo vyizolovanej látky SP-1, (-)-pikrininu (SP-2) a deacetylakuammilinu (SP-3). K objasneniu ich štruktúry bola použitá hmotnostná spektrometria (ESI), NMR a optická otáčavosť. Izolované alkaloidy boli podrobené testom inhibičných aktivít voči AChE, BuChE, POP a GSK-3β, ezýmom zohrávajúcim dôležitú úlohu v patofyziológii AD. Ukázalo sa, že všetky izolované látky boli v porovnaní so štandardmi...
|
|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II.
Malý, Lukáš ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Malý, L.: Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2014, 49 s. Získaný diethyetherový extrakt Fumaria officinalis L. byl rozdělen na frakce sloupcovou chromatografií za použití lékařského benzínu, chloroformu a ethanolu. Preparativní TLC a krystalizace vedla k izolaci 5 alkaloidů ze zadané frakce. Alkaloidy byly identifikovány na základě GC-MS, 1 H a 13 C NMR spekter, optické otáčivosti a teploty tání jako protopin, kryptopin, (-)-fumaricin, (+)-fumarilin a (+)-parfumidin. Izolované alkaloidy byly testovány na jejich inhibiční aktivitu vůči acetyl- a butyrylcholinesterase a vůči prolyloligopeptidase a tyto aktivity IC50 byly porovnány se standardy. Nejzajímavější aktivitu oproti standardu galanthaminu (IC50 AChE 1,710 ± 0,065 µM, IC50 BuChE 42,30 ± 1,30 µM) vykazoval protopin (IC50 AChE 345,4 ± 24 µM, IC50 BuChE 239,6 ± 22,3 µM) a kryptopin (IC50 AChE 477,71 ± 47,33 µM, IC50 BuChE 270,82 ± 39,12 µM). Žádný z izolovaných alkaloidů nedosahuje takové inhibiční aktivity jako použité standardy. Nejvyšší inhibiční aktivitu POP vykazoval (+)-parfumidin (IC50 POP 99,2 µM), dosahující vyšší aktivity než přírodní...
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin X. Alkaloidy Vinca minor L.
Šípková, Pavla ; Hošťálková, Anna (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Šípková, P.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin X. Alkaloidy Vinca minor L. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové, 2019, 66 s. Klíčová slova: Apocynaceae, Vinca minor, alkaloidy, izolace, biologická aktivita, screening Alzheimerova choroba je progredující onemocnění mozku. Počet pacientů zasažených touto chorobou neustále roste. Tuto nemoc nelze léčit kauzálně, proto objevování a testování nových látek, které by mohly být potenciálně využity v léčbě, je velmi důležité. Pomocí flash chromatografie byla separována frakce po sloupcové chromatografii z rostliny Vinca minor L. Izolace jednotlivých alkaloidů byla provedena pomocí preparativní TLC. Na základě NMR a MS analýzy a následném porovnání s literaturou byly alkaloidy identifikovány jako vinkarubin a (-)-vinoxin. Izolované alkaloidy byly testovány na cholinesterasovou inhibiční aktivitu pomocí modifikované Ellmanovy metody. Acetylcholinesterasa (AChE) a butyrylcholinesterasa (BuChE) jsou enzymy, které hrají velmi důležitou roli v patofyziologii Alzheimerovy choroby. (-)-Vinoxin vykazoval poměrně vysokou inhibiční aktivitu vůči BuChE (IC50 = 24,61 ± 1,71 µM), inhibiční aktivita vůči AChE byla nevýznamná (IC50 > 1000µM). Vinkarubin nevykazoval...
|
|
|
Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L. II.
Miklová, Veronika ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Miklová V.: Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L. II. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2020. Diplomová práce zpracovávaná na katedře farmaceutické botaniky FAF UK je součástí screeningu biologicky aktivních sekundárních metabolitů rostlin vybraných taxonů rodů Centaurea L. a Psephellus L. z čeledi Asteraceae. Sekundární metabolity jsou zodpovědné za různé účinky na lidský organismus. Studie se zabývá fytochemickým výzkumem extraktů připravených z natí druhů Centaurea cyanus L., Centaurea stoebe L., Cyanus montanus (L.) Hill, Centaurea benedicta L., Centaurea jacea L., Centaurea macrocephala Muss. Puschk. ex. Willd, Centaurea solstitialis L., Centaurea nigra L., Centaurea scabiosa L., Psephellus bellus (Trautv.) Wagenitz, Centaurea pannonica (Heuff.) Hayek a Psephellus dealbatus (Willd) K. Koch. Pro detekci jednotlivých skupin sekundárních metabolitů byly připravené ethyl-acetátové i sumární ethanolové extrakty podrobeny důkazovým reakcím na tenkovrstvou chromatografii. V souladu s dříve publikovanými výsledky byly v extraktech detekovány seskviterpeny, flavonoidy, kumariny, fenolické sloučeniny, steroidy a terpeny. U extraktů druhu Centaurea benedicta...
|
host ::
RSS.