|
|
In vitro testing of cytotoxicity and hematotoxicity of drugs in development
Ďurinová, Anna ; Smutná, Lucie (vedoucí práce) ; Maixnerová, Jana (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Anna Ďurinová Školiteľ: PharmDr. Lucie Hyršová, Ph.D. Názov diplomové práce: In vitro testovanie cytotoxicity a hematotoxicity vyvíjaných liečiv Predklinické hodnotenie liečiv je dôležitou fázou zrodu nového lieku, popisuje testovania látok pred tým, ako sa podajú ľuďom. Táto práca sa zameriava na experimentálne meranie cytotoxicity a hematotoxicity, ktoré sú dôležitými súčasťami predklinického výskumu. Testy in vitro cytoxicity predstavujú jednu zo vstupných metód skúmania budúcich liekov. Viabilita, živitaschopnosť, bola sledovaná na modelovej bunkovej línii HepG2. Hodnotenie viability bolo prevádzané získaním parametru IC50, tj. koncentrácie látky, pri ktorom stráca životnosť polovica kultivovaných buniek. Ďalej bola študována stabilita červených krviniek potkanej krvi po podaní testovaných látok, čiže bola pozorovaná in vitro hemolýza, ktorá je dobrým ukazovateľom efektu a bezpečnosti látok. Pri stanovovaní hemolytického efektu sa sleduje hodnota EC50, ktorá spôsobí hemolytický účinok na 50 % skúšaných erytrocytoch. Taktiež boli pozorované najvyššie koncentrácie, ktoré nevyvolávali hemolytický účinok, teda kedy nedošlo k prekročeniu medze 10 % hemolytickej aktivity pozitívnej kontroly....
|
|
|
Studium transportu lékovými transportéry na buněčných modelech
Znamínková, Jana ; Smutná, Lucie (vedoucí práce) ; Trejtnar, František (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Jana Znamínková Školitel: PharmDr. Lucie Hyršová, Ph.D. Název diplomové práce: Studium transportu lékovými transportéry na buněčných modelech Játra jsou hlavním biotransformačním orgánem lidského organismu. Zdaleka ne všechny látky mohou přes hepatocytární membránu pronikat prostou difúzí. V těchto případech je jejich přenos přes membránu umožněn prostřednictvím specializovaných transportních proteinů. Uptakové transportéry lokalizované na bazolaterální membráně hepatocytů mají důležitou roli při přenosu látek z krve do jater, kde následně může docházet k jejich biotransformaci. Důležitým zástupcem této skupiny je OCT1 transportér, který přenáší organické kationty. Efluxní transportéry lokalizované na apikální membráně jsou naopak důležité pro přenos látek z jaterních buněk do žluče, čímž umožňují jejich eliminaci touto cestou. Příkladem takového transportéru je BCRP. Z důvodu široké substrátové specificity patří oba lékové transportéry mezi hlavní mechanismus vzniku lékových interakcí. Cílem této práce bylo využít substráty a inhibitory těchto dvou transportérů k ověření funkčnosti buněčného modelu. Byly použity psí jaterní buňky MDCK II stabilně transfekované lidskými transportéry OCT1 a/nebo...
|
|
|
Studium transportu proteinových molekul přes buněčné membrány
Hornová, Aneta ; Smutná, Lucie (vedoucí práce) ; Bárta, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Aneta Hornová Školitelka: PharmDr. Lucie Hyršová, Ph.D. Název diplomové práce: Studium transportu proteinových molekul přes buněčné membrány Transportéry v ledvinách se nachází především v proximálních tubulech a podílejí se na sekreci a reabsorpci endogenních i exogenních látek. Existuje velké množství ledvinných transportérů, nicméně tato diplomová práce je zaměřena především na megalin. Konkrétně jsme se zabývali stanovením transportu peptidů přes tento renální transportér v buněčných liniích HK-2 a JEG-3. Megalin je glykoprotein, jehož hlavní funkcí je tubulární reabsorpce glomerulárně filtrovaného albuminu a dalších vysokomolekulárních látek. Mezi endogenní substráty megalinu dále patří např. transkobalamin - vitamin B12, inzulin nebo lehké řetězce imunoglobulinů. Je také schopen transportovat některá léčiva, jako jsou aminoglykosidová a peptidová antibiotika. V rámci této práce jsme zkoumali vliv snížení exprese megalinu na transport albuminu a anti-VEGFR2 aptameru. Snížení exprese bylo dosaženo transfekcí buněk pomocí siRNA proti LRP2 genu. Nižší exprese LRP2 vede ke snížení transportu albuminu a anti- VEGFR2 aptameru, což bylo následně stanoveno pomocí akumulačních studií. Akumulace...
|
|
|
In vitro saturation study of gallium-67 and zirconium-89 labelled monoclonal antibody ramucirumab on SKOV-3 cell line
Holodňáková, Nikola ; Bárta, Pavel (vedoucí práce) ; Smutná, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra fyziky a fyzikálnej chémie Študentka: Nikola Holodňáková Školiteľ: Mgr. Pavel Bárta, Ph.D. Názov diplomovej práce: In vitro saturačné štúdie gáliom-67 a zirkóniom-89 značenej monoklonálnej protilátky ramucirumab na SKOV-3 bunkovej línii Vývojom nových liečebných postupov v onkológii má čoraz väčšie postavenie cielená biologická liečba, ktorá stimuluje imunitný systém k boju s nádorovými bunkami. Významným pokrokom v cielení nádorov bolo zavedenie monoklonálnych protilátok, ktoré predstavujú jednu z novších možností využiteľných v diagnostike i terapii nádorov. Využíva sa schopnosť monoklonálnych protilátok rozpoznať a viazať sa špecificky na antigény nádorových buniek, akým je aj receptor pre VEGF typu 2 (VEGFR-2), na ktorý sa viaže monoklonálna protilátka ramucirumab. Blokáciou tohto receptoru sa inhibuje angiogenéza, a tým sa zabráni rastu nádorov. Spojením monoklonálnej protilátky s inou molekulou (rádionuklid, toxín, cytostatikum) za tvorby konjugátov je možné zvýšiť jej protinádorový účinok, čo pre diagnostické i terapeutické účely využíva i odbor nukleárna medicína. Cieľom predloženej práce bolo metódou nepriameho značenia pomocou chelátoru deferoxamínu (DFO) pripraviť rádioaktívnymi nuklidmi (67 Ga a 89 Zr) značený...
|
|
|
Molekulární podstata lékových interakcí -interace konstitutivního androstanového receptoru s vybranými stilbenoidy
Linhartová, Lenka ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Smutná, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Lenka Linhartová Školitel: Prof. PharmDr. Petr Pávek, Ph.D. Název diplomové práce: Molekulární podstata lékových interakcí - interakce konstitutivního androstanového receptoru s vybranými stilbenoidy Konstitutivní androstanový receptor (CAR), člen rodiny nukleárních receptorů, je významným regulátorem exprese enzymů I. a II. fáze eliminace endobiotik a xenobiotik. Ovlivnění jeho aktivity může vést ke vzniku farmakokinetických lékových interakcí, neúčinku terapie nebo zvýšení toxicity léčiv podaných spolu s jeho ligandy. V relativně nedávné době byl objeven i vliv tohoto receptoru na homeostázu žlučových kyselin, lipidů a glukózy a je na něj teď nahlíženo jako na potenciální cíl léčiv u metabolických onemocnění. Stilbenoidy jsou malou skupinou rostlinných polyfenolů s charakteristickým 1,2- difenylethylenovým jádrem. Nejznámějším zástupcem je bezpochyby resveratrol, kterému je věnována velká pozornost díky jeho antioxidačním, protizánětlivým, antiproliferativním a kardioprotektivním účinkům. Ukazuje se, že i další látky této skupiny jako pterostilben, piceatannol nebo pinosylvin mají obdobně příznivé účinky na lidské zdraví. Cílem této práce bylo otestovat 12 látek ze skupiny stilbenoidů jako...
|
|
|
Interakce vybraných anti-HCV léčiv s placentárním OCTN2 transportním proteinem
Machalová, Vanda ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Smutná, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Mgr. Vanda Machalová Školiteľ: doc. PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Názov rigoróznej práce: Interakcie vybraných anti-HCV liečiv s placentárnym OCTN2 transportným proteínom. Cieľom tejto rigoróznej práce bolo otestovať interakciu paritapreviru a daclatasviru, s placentárnym transportérom OCTN2, ktorý sprostredkováva transport L-karnitínu ako kofaktoru procesu oxidácie mastných kyselín pre získanie dostatočnej energie na správny vnútromaternicový rast plodu. Na liečbu chronickej hepatitídy C v tehotenstve zatiaľ nie sú schválené žiadne liečivá tejto skupiny, preto testovaním ich vplyvu na transport L-karnitínu cez OCTN2 tak pomôže vytvárať obraz ohľadom ich bezpečnosti pre plod i matku. V prvej časti štúdie sa testoval transport radioaktívne značeného L-karnitínu cez monovrstvu buniek BeWo b30 v prítomnosti paritapreviru a daclatasviru a stanovila sa zároveň aj koncentrácia radioaktívne značeného L-karnitínu vo vnútri bunkovej vrstvy. V druhej časti práce sme sa zamerali na hodnotenie vplyvu prítomnosti paritapreviru a daclatasviru na génovú expresiu karnitínových transportérov OCTN1 a OCTN2 (resp. ich kódujúcich génov SLC22A4 a SLC22A5) pomocou qRT-PCR. Výsledky transportných štúdií iba naznačili...
|
|
|
Transportní studie in vitro na 2D a 3D buněčné úrovni
Urbanová, Johana ; Ramos Mandíková, Jana (vedoucí práce) ; Smutná, Lucie (oponent)
Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Studentka: Johana Urbanová Školitelka: PharmDr. Jana Ramos Mandíková, Ph.D. Název diplomové práce: Transportní studie na 2D a 3D buněčné úrovni. Trojrozměrné (3D) buněčné modely lépe napodobují buněčné podmínky in vivo než tradičně používané dvourozměrné (2D) buněčné modely. Transportéry pro organické anionty (OATs) a kationty (OCTs) hrají důležitou úlohu v ledvinné eliminaci léčiv a mají vliv na jejich farmakokinetické vlastnosti. Cílem práce bylo vytvořit 2D a 3D buněčný model z embryonálních ledvinných buněk HEK293, oba modely přechodně transfekovat transportérem hOAT1, transfekci optimalizovat a provést transportní inhibiční studie s vybranými NSAIDs (diklofenakem, ibuprofenem, indometacinem a naproxenem). 2D buněčný model jsme vytvořili ve 24jamkové destičce ve formě monovrstvy, jako 3D buněčný model jsme používali sféroidy, které jsme zhotovili na Petriho misce metodou visící kapky. Při transportních studiích jsme buňky inkubovali s radioaktivním substrátem OATs p-aminohippurovou kyselinou ([3 H]PAH) s nebo bez příslušného inhibitoru. Inhibiční vliv NSAIDs jsme porovnávali pomocí parametru IC50. 2D i 3D model z buněk HEK293 se nám povedlo vytvořit, ale následná transfekce byla úspěšná pouze v monovrstvě buněk. Funkčnost 3D modelu se pomocí transportní studie...
|
|
|
In vitro saturation study of 99mTc-HYNIC-ramucirumab on PC-3 cell line
Lach, František ; Bárta, Pavel (vedoucí práce) ; Smutná, Lucie (oponent)
Abstakt v slovenskom jazyku Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikálni chemie Študent: František Lach Školiteľ: Mgr. Pavel Bárta, PhD Konzultant: Mgr. Lucie Hyršová Názov diplomovej práce: In vitro saturačné štúdie 99m Tc-HYNIC-ramucirumabu na PC- 3 bunkách V posledných rokoch sa zvyšuje počet zhubných nádorov v populácií. Z dôvodu častých vážnych nežiadúcich účinkov chemoterapeutických liečiv na celý organizmus sa do popredia dostáva cielená protinádorová terapia. Vďaka svojmu špecifickému účinku na regulačné a signálne dráhy proteínových štruktúr, sú k cieľovej protinádorovej terapii využívané monoklonálne protilátky. Medzi základné vlastnosti rastúceho nádoru patria vaskulogenéza (schopnosť novotvorby ciev z endoteliálnych prekurzorov) a angiogenéza (proces vlastnej novotvorby ciev). Medzi endoteliálne progenitory nádoru patri vaskulárny endoteliálny rastový faktor (VEGF). VEGF svoj biologický účinok aktivuje prostredníctvom väzby na svoje transmembránové tyrozínkinázové receptory VEGFR. Práve inhibícia receptorov vaskulárneho endotelového faktoru je cieľom niektorých monoklonálnych protilátok. Ramucirumab je monoklonálna protilátka, ktorá selektívne inhibuje VEGF receptor typu 2 (VEGFR-2) a tým blokuje aktivačné a signalizačné dráhy. Cieľom...
|
|
| |
|
| |
host ::
RSS.