|
|
Optimization of the skin barrier model with isolated ceramides of human stratum corneum
Dulanská, Lucia ; Pullmannová, Petra (vedoucí práce) ; Zbytovská, Jarmila (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikálnej chémie Autor: Lucia Dulanská Školiteľ: Mgr. Petra Pullmannová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Optimalizácia modelu kožnej bariéry s obsahom ceramidov izolovaných z ľudského Stratum corneum Stratum corneum (SC), najvrchnejšia vrstva kože, reguluje transkutánne straty vody a chráni pred vonkajšími podmienkami a škodlivými látkami. Skladá sa z zrohovatelých buniek - korneocytov a extracelulárnej lipidovej matrix, ktorá je zodpovedná za bariérové funkcie. Korneocyty sú pokryté kovalentne viazanými lipidmi a vytvárajú tak korneocytárnu lipidovú obálku (CLE). CLE sa považuje za prepojenie extracelulárnych lipidov s korneocytmi a slúži ako predlohová matrica. Naším cieľom bolo optimalizovať model kožnej bariéry simulujúcim taktiež prítomnosť CLE. Lipidová časť modelu bola pripravená z ekvimolárnej zmesi izolovaných ceramidov ľudskej kože (hCer), cholesterolu a voľných mastných kyselín (FFA, buď protonovaných alebo deuterovaných) s 5 % (m/m) cholesterol-sulfátom. hCer sa extrahovali z izolovaného ľudského SC a purifikovali sa stĺpcovou chromatografiou. Zloženie hCer sa stanovilo vysokoúčinnou tenkovrstvovou chromatografiou. Častice silikagélu s reverznou a normálnou fázou slúžili ako model CLE a negatívna kontrola....
|
|
|
In vitro modely kožní bariéry
Šimek, Matěj ; Zbytovská, Jarmila (vedoucí práce) ; Pullmannová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické technologie Student: Matěj Šimek Školitel: doc. Dr. rer. nat. Mgr. Jarmila Zbytovská Název: In vitro modely kožní bariéry Cílem této diplomové práce je prostřednictvím odborné, ověřené a recenzované literatury podat informace o různých typech modelů kůže, na kterých se zkouší permeabilita léčiv, jejich toxicita, dráždivost a další charakteristiky, které je nezbytné znát pro zajištění optimální bezpečnosti, účinnosti a kvality transdermálně podávaných léčiv. Podání léčiv přes kůži skýtá mnoho benefitů oproti klasickému perorálnímu podání. Aplikace tímto způsobem je poměrně snadná a lze ji rychle přerušit, lze také obměnit místo aplikace, ve kterém se má léčivo uvolňovat a je snížené riziko předávkování. Transdermální podání dále umožňuje udržovat konstantní plazmatickou hladinu léčiva v krvi, prodloužit trvání účinku léčiv s krátkým poločasem díky konstantnímu uvolňování a především se takto podané léčivo vyhne "first-pass" efektu jater, tudíž můžeme snížit celkovou podanou dávku. Dále je omezeno riziko interakcí léčiv a jejich nežádoucích účinků, pacient má obvykle dobrou compliance (snadno zjistí, zda si léčivý přípravek nezapomněl vzít) a v neposlední řadě se jedná o vhodnou lékovou formu pro pacienty v bezvědomí, s...
|
|
|
Studium transdermální a dermální absorpce acyklických nukleosidfosfonátů ze skupiny 2,6-diaminopurinu
Diblíková, Denisa ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Zbytovská, Jarmila (oponent)
Acyklické nukleosidfosfonáty (ANP) jsou látky patřící do skupiny širokospektrých antivirotik s vysokým účinkem na herpes-, hepadna- a retroviry. Vykazují také rozsáhlou cytostatickou, antiparasitickou a imunomodulační aktivitu. Transdermální aplikací těchto látek se nabízí atraktivní a výhodná cesta podání, která je ovšem limitována polárním charakterem sloučenin, zejména jejich fosfonátovou skupinou. Cílem práce bylo studovat možnosti transdermální i dermální aplikace látek ze série 2,6-diaminopurinu, konkrétně (R)-PMPDAP a (S)-PMPDAP, (S)-HPMPDAP, 8-aza-(S)- HPMPDAP, cyklického (S)-HPMPDAP a dále lipofilních proléčiv hexadecyloxypropyl (HDP) esterů (R)-HDP-PMPDAP a (S)-HDP-HPMPDAP. Schopnost ANP procházet samostatně kůží je však velmi nízká. Z tohoto důvodu jsme studovali také vliv permeačního akcelerantu dodecylesteru kyseliny 6-(dimethylamino)hexanové (DDAK) na prostup těchto látek přes i do kůže. Hodnocení bylo prováděno in vitro za použití Franzových difúzních cel a vzorků lidské kůže. Výsledky práce potvrdily, že ANP (60 mM v 60 % propylenglykolu) procházejí v malém množství kůží (flux 0,53-1,40 nmol/cm2 /h), kromě lipofilních proléčiv (R)-HDP- PMPDAP a (S)-HDP-HPMPDAP, které jsme v akceptorové fázi vůbec nedetekovali. Nepozorovali jsme žádný rozdíl mezi (R) a (S) enantiomery. 1 % DDAK...
|
|
|
Vliv koncentrace cholesterolu na permeabilitu a mikrostrukturu modelových lipidových membrán kožní bariéry
Červená, Martina ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Zbytovská, Jarmila (oponent)
Cholesterol je látka steroidní povahy, která plní v lidském organismu řadu funkcí. Jednou z nich je i nezastupitelná úloha ve správné funkci kožní bariéry. Cholesterol je spolu s ceramidy a volnými mastnými kyselinami v ekvimolárním poměru (1:1:1) a s 5 % cholesterol-sulfátu nedílnou součástí lipidové matrix, která vyplňuje mezibuněčný prostor mezi buňkami stratum corneum a zodpovídá tak za bariérové vlastnosti kůže. Cholesterol je tedy nezbytný pro epidermální homeostázu, avšak jeho úloha v permeabilitě SC není známa. Cílem této práce bylo studovat vliv koncentrace cholesterolu na permeabilitu a mikrostrukturu modelových lipidových membrán kožní bariéry. Bylo vytvořeno osm sad modelových membrán s klesajícími koncentracemi cholesterolu (100 %, 80 %, 70 %, 60 %, 40 %, 20 %, 0 %) a samotným cholesterolem, u kterých byla permeabilita a mikrostruktura sledována. Studium permeability membrán bylo provedeno ve Franzových difúzních celách a to prostřednictvím měření čtyř permeačních parametrů: ztráty vody, měřením elektrické impedance a kumulativního množství dvou modelových léčiv (theofylinu a indomethacinu). Mikrostruktura těchto modelových membrán byla ověřena práškovou rentgenovou difrakcí. Měření rentgenové práškové difrakce potvrdilo, že přibližně polovina z ekvimolárního množství cholesterolu ve...
|
|
|
Nanonosiče pro dermální a transdermální podání léčiv
Girgel, Josef ; Zbytovská, Jarmila (vedoucí práce) ; Holas, Ondřej (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické technologie Student: Josef Girgel Školitel: Doc. Dr. rer. nat. Mgr. Jarmila Zbytovská Název: Nanonosiče pro dermální a transdermální podání léčiv Cílem této práce bylo zmapovat literaturu a nejlogičtěji ji rozčlenit a objasnit mechanismy interakce nosičů s kůží, míru jejich schopnosti proniknout do kůže a vyhodnotit jejich potenciální přínos do dalších let. Kožní podání se zdá být výhodnější cestou oproti ostatním, hlavně díky vyšší compliance pacienta, vyhnutí se "first pass" efektu v játrech, zajištění stabilní koncentrace v krvi při transdermálním podání a snížení nežádoucích účinků léčiv. Nicméně kůže slouží jako účinná ochranná bariéra proti vnějšímu okolí, zejména její nejsvrchnější vrstva stratum corneum. V posledních letech se zájem mnoha výzkumných skupin zaměřil na nanonosiče, u kterých se předpokládá - díky jejich velikosti pohybujících se od desítek až po stovek nanometrů - efektivnější transport do i skrz kožní bariéru. Bylo potvrzeno, že některé nosiče jsou schopny permeovat kůží. U kovových nanočástic je jejich permeace spojena především s toxicitou a nacházejí zejména využití v medicíně a průmyslu. Lipidové a některé polymerní nosiče jsou zajímavými hlavně díky jejich biodegradabilitě a netoxicitě. V...
|
|
|
Permeabilita a mikrostruktura modelových lipidových membrán stratum corneum: srovnání nehydroxylovaných a (R)- a (S)-α-hydroxylovaných ceramidů
Šilarová, Michaela ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Zbytovská, Jarmila (oponent)
Ceramidy jsou látky ze skupiny sfingolipidů, které jsou nezbytné pro správnou funkci kožní bariéry. Kožní bariéra se nachází v nejsvrchnější vrstvě kůže nazývané stratum corneum. Společně s cholesterolem a volnými mastnými kyselinami jsou zde ceramidy zastoupeny v ekvimolárním množství. Kožní ceramidy jsou acylované sfingoidní báze, kterými mohou být buď sfingosin, fytosfingosin, dihydrosfingosin nebo 6-hydroxysfingosin. Sfingoidní báze jsou N-acylovány nehydroxylovanou, α-hydroxylovanou nebo ω-hydroxylovanou mastnou kyselinou. Cílem této práce bylo studium permeability a mikrostruktury modelových membrán obsahující ceramidy s nesubstituovaným (nehydroxylovaným) a α-hydroxylovaným acylem. Dále byl u α-hydroxylovaných ceramidů zkoumán vliv stereochemie hydroxylové skupiny v poloze 2 acylové části. Byly připraveny modelové lipidové membrány obsahující příslušný ceramid, směs mastných kyselin (C16-24), cholesterol a 5% podíl cholesterol-sulfátu. Na takto připravených membránách byly studovány bariérové vlastnosti ceramidů pomocí vybraných permeačních parametrů: relativní ztráta vody přes membránu, elektrická impedance, flux theofylinu a flux indomethacinu. Mikrostruktura a mísitelnost ceramidů s ostatními lipidy byla hodnocena pomocí infračervené spektroskopie a rentgenové práškové difrakce. Výsledky...
|
|
|
Characterization of liposomal formulations for brain-targeting.
Labajová, Andrea ; Šklubalová, Zdeňka (vedoucí práce) ; Zbytovská, Jarmila (oponent)
Univerzita Karlova v Prahe, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra farmaceutickej technológie Konzultant: Doc. PharmDr. Zdeňka Šklubalová, Ph.D. Robin Tremmel, Ph.D student Študent: Andrea Labajová Názov diplomovej práce: Charakterizácia lipozomálnych formulácií pre cielenú mozgovú terapiu Táto práca sa zaoberá charakterizáciou lipozomálnych formulácii s enkapsulovaným triethylentetraamínom, ktorý sa používa ako selektívny CuII- chelátor k liečbe Wilsonovej choroby už po desaťročia. Liposomálne formulácie boli pripravené filmovou metódou s následnou duálnou asymetrickou centrifugáciou s prídavkom 2.5 mol/l triethylentetraamínu rozpusteného jednotlivo v pH3 alebo/a pH7. Bola prevedená gélová chromatografia za účelom separácie voľného triethylentetramínu od enkapsulovaného v deň 1, 2, 3, 4, 5 a 8. Boli použité dve metódy čistenia: jednokolonková a dvojkolonková. Veľkosť a distribúcia veľkosti častíc bola určená pomocou fotón korelačnej spektroskopie. Pomocou HPLC bola určená koncentrácia enkapsulovanej TETY, rovnako ako aj koncentrácie cholesterolu pred a po gélovej chromatografii za účelom vyjadrenia enkapsulačnej účinnosti. Nebol zistený vplyv hodnoty pH, ani metódy čistenia na stabilitu lipozómov (priemernú veľkosť). Avšak, vyššia polydisperzita bola pozorovaná pre TETA-lipozómy s...
|
|
|
Permeabilita a mikrostruktura modelových lipidových membrán stratum corneum: srovnání nehydroxylovaných a (R)- a (S)-α-hydroxylovaných ceramidů
Šilarová, Michaela ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Zbytovská, Jarmila (oponent)
Ceramidy jsou látky ze skupiny sfingolipidů, které jsou nezbytné pro správnou funkci kožní bariéry. Kožní bariéra se nachází v nejsvrchnější vrstvě kůže nazývané stratum corneum. Společně s cholesterolem a volnými mastnými kyselinami jsou zde ceramidy zastoupeny v ekvimolárním množství. Kožní ceramidy jsou acylované sfingoidní báze, kterými mohou být buď sfingosin, fytosfingosin, dihydrosfingosin nebo 6-hydroxysfingosin. Sfingoidní báze jsou N-acylovány nehydroxylovanou, α-hydroxylovanou nebo ω-hydroxylovanou mastnou kyselinou. Cílem této práce bylo studium permeability a mikrostruktury modelových membrán obsahující ceramidy s nesubstituovaným (nehydroxylovaným) a α-hydroxylovaným acylem. Dále byl u α-hydroxylovaných ceramidů zkoumán vliv stereochemie hydroxylové skupiny v poloze 2 acylové části. Byly připraveny modelové lipidové membrány obsahující příslušný ceramid, směs mastných kyselin (C16-24), cholesterol a 5% podíl cholesterol-sulfátu. Na takto připravených membránách byly studovány bariérové vlastnosti ceramidů pomocí vybraných permeačních parametrů: relativní ztráta vody přes membránu, elektrická impedance, flux theofylinu a flux indomethacinu. Mikrostruktura a mísitelnost ceramidů s ostatními lipidy byla hodnocena pomocí infračervené spektroskopie a rentgenové práškové difrakce. Výsledky...
|
|
|
Studium fázového chování vybraných směsi lipidů
Černochová, Klára ; Zbytovská, Jarmila (vedoucí práce) ; Matějka, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické technologie Školitel: Mgr. Jarmila Zbytovská, Dr. rer. nat. Posluchač: Klára Černochová Název diplomové práce: Studium fázového chování vybraných směsí lipidů Ceramidy, cholesterol a mastné kyseliny jsou hlavními složkami mezibuněčné lipidové matrix rohové vrstvy pokožky, stratum corneum (SC). Tyto lipidy hrají stěžejní roli pro udržení funkční kožní bariéry. Cílem této práce je studium interakcí směsí zmíněných kožních lipidů na molekulární úrovni, charakterizace jejich mísitelnosti a teplotního fázového chování. K tomuto účelu byly připraveny modelové systémy lipidů napodobující přirozené složení mezibuněčné matrix SC. Připravené membrány obsahovaly jeden nebo více ceramidů (CerAP, CerNP, CerNS), cholesterol, kyselinu stearovou a cholesterol sulfát. Směsi byly studovány pomocí infračervené spektroskopie s využitím zahřívaného ATR-krystalu. Z naměřených dat byla získána IČ spektra a teplotní závislosti polohy jednotlivých pásů, které byly detailně hodnoceny. Výsledky práce ukázaly přítomnost vodíkových můstků u jednotlivých ceramidů. Tyto vazby byly také pozorovatelné u jedné ekvimolární lipidické směsi, a to ve směsi s CerNP. Naopak směsi lipidů obsahujících CerAP vykazovaly velmi dobrou mísitelnost...
|
|
|
Studium lipidových membrán obsahujících prekuzory ceramidů jako modelů atopické dermatitidy
Staňková, Klára ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Zbytovská, Jarmila (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra anorganické a organické chemie Kandidát: Klára Staňková Školitel: doc. PharmDr. Kateřina Vávrová, Ph.D. Název diplomové práce: Studium lipidových membrán obsahujících prekurzory ceramidů jako modely atopické dermatitidy Důležitou složkou stratum corneum (SC) jsou ceramidy (Cer), které plní funkci kožní bariéry a brání nadměrným ztrátám vody. Jsou syntetizovány z jejich prekurzorů, sfingomyelinů (SM) a glukosylceramidů (GC), pomocí enzymů sfingomyelinázy a β-glukocerebrosidázy. Jejich snížené množství bylo nalezeno u řady kožních onemocnění, jako je atopická dermatitida, kdy jsou klíčovým faktorem pro suchou kůži a porušenou kožní bariéru. Cílem mé práce bylo studovat permeabilitu u modelů lipidové kožní bariéry obsahujících prekurzory Cer v porovnání s modely zdravé kůže. Modely lipidových membrán SC byly připraveny jako ekvimolární směs Cer nebo jejich prekurzorů (SM nebo GC), cholesterolu, mastných kyselin a z 5 % cholesterol-sulfátu. Permeabilitu modelových membrán jsme vyhodnotili pomocí prostupu theofylinu a indometacinu, transepidermální ztráty vody a elektrické impedance ve Franzových difúzních celách. Množství modelových léčiv, které prostoupilo přes membrány, jsme stanovili HPLC analýzou. Výsledky naší práce byly...
|
host ::
RSS.