|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Imunodetekce enzymů redukujících karbonylovou skupinu (Western blotting)
Černá, Libuše ; Boušová, Iva (oponent) ; Netopilová, Miloslava (vedoucí práce)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Libuše Černá Školitel: PharmDr. Miloslava Netopilová, Ph.D. Název diplomové práce: Imunodetekce enzymů redukujících karbonylovou skupinu (Western blotting) Enzymy redukující karbonylovou skupinu jsou důležité jak pro metabolizaci eobiotik, tak i xenobiotik. Tyto enzymy se dělí na tři nadrodiny : aldo-keto reduktasy (AKR), dehydrogenasy/reduktasy se středně dlouhým řetězcem (MDR) a dehydrogenasy/reduktasy s krátkým řetězcem (SDR). Součástí SDR nadrodiny je i 11β-hydroxysteroiddehydrogenasa typ 1 (11β-HSD1). Tento enzym je důležitý pro akvitaci steroidního hormonu kortisonu na jeho aktivní formu kostisol, ale podílí se i na přeměně některých xenobiotik, např. protinádorového léčiva oracinu. Redukce karbonylové skupiny oracinu se však kromě 11β-HSD1 účastní i další enzym lokalizovaný v mikrosomální membráně. Při purifikaci tohoto neznámého enzymu byla použita separace na Q Sepharose. Cílem práce bylo pomocí imunodetekce (Western blotting) zjistit, v kterých frakcích po separaci se vyskytuje 11β-HSD1. Pro Western blotting byla použita nitrocelulózová membrána, primární polyklonální králičí protilátky proti 11β-HSD1 v ředění 1:1000, sekundární polyklonální protilátka s navázanou křenovou peroxidasou v...
|
|
|
Oligosacharidy hyaluronanu a jejich biologická funkce
Kučerová, Barbora ; Netopilová, Miloslava (oponent) ; Lázníčková, Alice (vedoucí práce)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra fyziky a fyzikální chemie Kandidát: Bc. Barbora Kučerová Školitel: Doc. Ing. Alice Lázníčková, CSc. Název diplomové práce: Oligosacharidy hyaluronanu a jejich biologická funkce Ve své kompilační diplomové práci shromažďuji informace o oligosacharidech hyaluronanu. Přestože se hyaluronan v těle nachází většinou v dlouhých řetězcích, můžeme ho zde nalézt i ve formě malých fragmentů - oligosacharidů. Tyto oligosacharidy vykazují jiné vlastnosti než hyaluronanové polymery. Oligosacharidy hyaluronanu lze v laboratoři připravovat, separovat a analyzovat různými metodami. Velké molekuly lze rozbít na fragmenty chemickými, fyzikálními či enzymatickými způsoby. K následné separaci a purifikaci se využívají především chromatografické metody. Pro konečnou analýzu se jako nejvhodnější ukázaly elektroforetické metody či hmotnostní spektrometrie. V těle probíhá neustálý metabolizmus hyaluronanu. Syntézy se účastní hyaluronan syntáza a pro člověka důležitou biodegradaci obstarává několik druhů hyaluronidáz. Na interakci hyaluronanu s buňkami se podílí různé receptory. Specifický receptor pro hyaluronan je CD44, který váže jak velké polymery, tak oligosacharidy o více než čtyřech jednotkách. V těle jsou však přítomny i další receptory...
|
host ::
RSS.