|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení umělých barviv ve vzorcích zeleného piva
Stachová, Ivana ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Ivana Stachová Školitel: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph. D. Název diplomové práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení umělých barviv ve vzorcích zeleného piva. V této diplomové práci byla vyvinuta HPLC metoda pro stanovení syntetických, ve vodě rozpustných barviv E 102 - Tartrazine, E 104 - Quinoline yellow, E 110 - Sunset yellow, E 131 - Patent blue E 132 - Indigo carmine, E 142 - Green S, E 133 - Brilliant blue FCF a E 143 - Fast green FCF. Tato metoda byla aplikována na stanovení přítomnosti zmíněných barviv ve vzorcích zeleného piva Jarní pivo 11ř (Primátor, Náchod), Krasličák 14ř (Ježek, Jihlava), Zelený král Vratislav 12ř (Konrád, Vratislavice), Velikonoční speciál 14ř (Starobrno, Brno), Velikonoční ležák 12ř (Radniční pivovar, Jihlava), Rohozec 11ř (Rohozec, Malý Rohozec), Zelená nefiltrovaná 12ř (Žlebské Chvalovice), Velikonoční zelený ležák 12ř (Purkmistr, Plzeň), Velikonoční kopřivová 12ř (Modrá Hvězda, Dobřany), Valášek 12ř (Valášek, Vsetín), Podkováň 12ř (Podkováň, Dolní Cetno). Pro analýzu byla použita kolona Chromolith Performance CN 100 x 4,6 mm s předkolonkou Chromolith CN 5 x 4,6 mm Merck. Jako mobilní fáze byl zvolen 40% MeOH s 2% pufrem z kyseliny octové s přídavkem NH3,...
|
|
|
Vývoj a validace metody pro stanovení klotrimazolu v masti pomocí HPLC
Poláčková, Jitka ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Cílem této diplomové práce bylo optimalizovat a validovat metodu pro stanovení obsahu klotrimazolu, degradačního produktu (2-chlorofenyl) difenylmethanolu a konzervancií (methylparaben a propylparaben) v přípravku Clotrimazol mast. Mým úkolem bylo vyvinout metodu, za které by došlo k úplnému rozdělení jednotlivých stanovovaných látek ve vzorku v přijatelném čase, najít vnitřní standard, optimalizovat podmínky separace a metodu validovat. Optimální chromatografické podmínky byly nalezeny na koloně Zozbax SB - Phenyl, 3,5 μm, 4,6 x 75 mm při průtoku mobilní fáze 0,5 ml/min a to při vlnové délce 210 nm. Složení mobilní fáze bylo acetonitril - voda (55:45), pH vodné složky upraveno kyselinou fosforečnou 5 % na 3,2. Za vnitřní standard byl zvolen hydrokortizon acetát. Za těchto podmínek byla metoda validována. Sledovali se parametry jako je přesnost, správnost, linearita, selektivita, robustnost, detekční a kvantitativní limit.
|
|
|
Stanovení obsahu residuí kofeinu v povrchových vodách metodou HPLC s UV detekcí
Glosová, Ivana ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Životní prostředí je stále více zatěžováno residuii medikamentů a pravidelně konzumovaných látek. Cílem tohoto projektu bylo stanovit obsah kofeinu v povrchových vodách ( Mondego River, Coimbra, Portugaslko). Koncentrace kofeinu a jeho metabolitů v povrchových vodách mohou být ukazatelem nakolik se lidský faktor podílí na znečištění povrchových vod. Kofein je sloučenina obsažená v rostlinách, jídle, různých nápojích a také jako účinná látka v kombinovaných léčivých přípravních. Dobrá rozpustnost ve vodě (13,5 g/l), netěkavost a pravidelná konzumace propůjčuje kofeinu profil kvalitního a stabilního ukazatele lidského faktoru znečištění povrchových vod. Cíl této studie bylo získat data o jejich výskytu v povrchových vodách Portugalska ( řeka Mondego). SPE ( Solid Phase Extraction) extrakce přes polymerní Oasis HLB kolonu byla použita k extrahovaní kofeinu a kvantifikace a detekce byla provedena pomocí HPLC systému s UV detekcí ( vlnová délka 280 nm). Všechny vzorky byly negativní, neobsahovaly residua kofeinu.
|
|
|
Vývoj a validace HPLC metody pro stanovení ketoprofenu v čípcích
Zahálka, Lukáš ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Lukáš Zahálka Školitel: PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj a validace HPLC metody pro stanovení ketoprofenu v čípcích Cílem diplomové práce byl vývoj a validace HPLC metody pro stanovení ketoprofenu v přípravku Ketonal® 100 mg čípky. Ketoprofen patří mezi NSAID a používá se k symptomatické léčbě zánětlivých, degenerativních a metabolických revmatických onemocnění a ke zmírnění některých akutních i chronických bolestivých syndromů. Při vývoji metody pro stanovení ketoprofenu v čípcích se vycházelo ze dvou metod vyvinutých na Farmaceutické fakultě v Hradci Králové. Metoda pro stanovení diklofenaku v čípcích byla výchozí pro přípravu vzorku a metoda pro stanovení obsahu ketoprofenu, methylparabenu a propylparabenu v gelu byla výchozí pro podmínky HPLC analýzy. Vývoj metody spočíval v modifikaci metody přípravy vzorku, podmínky vlastní HPLC analýzy byly použity nezměněné. Během experimentální práce bylo postupně zjištěno, jaký vliv na stanovení mají jednotlivé kroky přípravy vzorku a teplota při extrakci. Fáze extrakce a centrifugace byly zkráceny na minimum, fáze tavení čípků a homogenizace v ultrazvukové lázni byly z pracovního postupu úplně odstraněny. Z původních 50...
|
|
|
Sledování retenčních "U-profilů" vybraných látek na pentafluorofenylové stacionární fázi
Havlátová, Michaela ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Michaela Havlátová Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský PhD. Název rigorózní práce: Sledování retenčních "U" profilů vybraných látek na pentafluorofenylové stacionární fázi Byly sledovány retenční "U" profily na pentafluorofenylové stacionární fázi u vybraných látek. Jako testované látky byly vybrány látky ze skupiny tetracyklinových antibiotik (oxytetracyklin, minocyklin), neuroleptik (thioridazin, perphenazin), lokálních anestetik (lidokain, prilokain), derivátů methylxantinu (kofein, theofylin), ß-sympatolytik (acebutolol, bopindolol) a anilin. Při analýze byly sledovány retenční profily testovaných látek v závislosti na charakteru mobilní fáze s obsahem methanolu. U všech látek z vybraných skupin byly provedeny tři série analýz, kdy pro sérii analýz č. 1 byla použita mobilní fáze methanol - voda, pro sérii analýz č. 2 mobilní fáze methanol - kyselina fosforečná 0,085% a pro sérii analýz č. 3 mobilní fáze methanol - acetátový pufr pH 7. Při každé jednotlivé analýze bylo současně měněno procentuální zastoupení methanolu v mobilní fázi. Z testovaných látek vybraných skupin vykazovaly retenční profil ve tvaru "U" tetracyklinová antibiotika oxytetracyklin, minocyklin v sérii analýz č. 2 a...
|
|
|
Studium vlivu složení mobilní fáze na selektivitu a retenci analytů na HILIC stacionárních fázích
Štětková, Kateřina ; Vlčková, Hana (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Kateřina Štětková Školitel: RNDr. Hana Vlčková, Ph. D. Název diplomové práce: Studium vlivu složení mobilní fáze na selektivitu a retenci analytů na HILIC stacionárních fázích Tato diplomová práce se zabývá vlivem koncentrace ACN, pH a koncentrace pufru v mobilní fázi na retenci a selektivitu kolon Atlantis HILIC Silica (3 μm, 2,1 mm x 100 mm) a Luna NH2 (3 μm, 2,0 mm x 100 mm). Ke studii bylo vybráno celkem 35 analytů, které zahrnují látky neutrální, bazické a kyselé. Detekce byla provedena pomocí PDA detektoru při vlnové délce 245 nm. Všechna měření probíhala za podmínek izokratické eluce při průtoku 0,4 ml.min-1 s využitím směsi acetonitril/voda (pufr) jako mobilní fáze. Teplota na koloně byla nastavena na 30 řC, teplota autosampleru na 4 řC a použitý nastřikovaný objem byl 2 μl. Pro vyhodnocení výsledků byly z naměřených hodnot sestrojeny grafy a tabulky, které sloužily k hodnocení kolon z hlediska selektivity a retence jednotlivých skupin analytů. Kolona Atlantis HILIC Silica vykazovala chování typické pro HILIC chromatografii, tj. retence stoupala se zvyšující se koncentrací ACN v mobilní fázi a to především od >85% ACN. Kolona Luna NH2 kromě HILIC chování navíc vykazovala silnou retenci...
|
|
| |
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení 6-gingerolu, kapsaicinu, 8-gingerolu, 6-shogaolu a 10 gingerolu ve vzorcích zázvorovníku lékařského
Urbanová, Martina ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Martina Urbanová Školitel: PharmDr. Lucie Havlíková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení 6-gingerolu, kapsaicinu, 8-gingerolu, 6-shogaolu a 10-gingerolu ve vzorcích zázvorovníku lékařského Diplomová práce byla zaměřena na vývoj HPLC metody pro stanovení 6-gingerolu, kapsaicinu, 8-gingerolu, 6-shogaolu a 10-gingerolu ve vzorcích zázvorovníku lékařského. Nejprve byly zvoleny vzorky z čerstvě připraveného oddenku zázvoru pravého. Dále byly hodnoceny hladiny analytů v modelových vzorcích sušeného Zázvoru mletého. Ve vzorcích oddenků zázvoru pravého i vzorcích sušeného Zázvoru mletého měl vždy nejvyšší odezvu 6-gingerol. Kapsaicin nebyl nalezen v žádném vzorku. 6-shogaol byl nalezen pouze ve vzorcích sušeného Zázvoru mletého. Extrakce ostatních látek závisely na způsobech přípravy jednotlivých vzorků. Během optimalizace metody bylo vyzkoušeno několik mobilních a stacionárních fází. Vhodnou mobilní fází byla mobilní fáze acetonitril - voda v poměru 50/50 (v/v). Zvolenou stacionární fází pro analýzu byla chromatografická kolona Ascentis® Express Phenyl-Hexyl (100 x 4,6 mm; 2,7 µm), která byla použita i pro částečnou validaci metody. Průtok mobilní fáze byl nastaven na 1 ml/min a...
|
|
|
Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení ketoprofenu v léčivých přípravcích
Bajcurová, Lucie ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Lucie Bajcurová Konzultant: PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Název rigorózní práce: Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení ketoprofenu v léčivých přípravcích Byla validována již vyvinutá metoda pro stanovení ketoprofenu v léčivém přípravku PRONTOFLEX 10% kožní sprej, roztok. Přesnost vyjádřená jako relativní směrodatná odchylka je 1,43 %. Správnost vyjádřená jako výtěžnost je 101,52 %. Korelační koeficient R je větší než 0,999. Bylo pokračováno ve vývoji metody pro stanovení ketoprofenu v léčivém přípravku Ketonal 5% krém. Vyvinutá metoda byla validována. Optimální chromatografické podmínky byly: kolona SUPELCO Discovery C18 (150 mm x 4,6 mm, 5 µm), mobilní fáze acetonitril : voda : fosforečnanový pufr 3,5 (39:59:2, v/v/v), rychlost průtoku mobilní fáze 1,5 ml/min, dávkovaný objem 5 µl, UV detekce při vlnové délce 233 nm. Celkový čas analýzy byl pod 10 minut. Jako vnitřní standard byl užit ethylparaben. Přesnost vyjádřená jako relativní směrodatná odchylka je 0,64 %. Správnost vyjádřená jako výtěžnost je 98,10 %. Korelační koeficient R je větší než 0,998.
|
|
|
Stanovení vitamínu C a dehydroaskorbové kyseliny s využitím metody UPLC-MS
Proroková, Zuzana ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Spojení ultra vysoko účinné kapalinové chromatografie s detekcí pomocí hmotnostního spektrometru (UHPLC-MS) poskytuje metodu, která je velice rychlá a citlivá. Tato diplomová práce byla zaměřena na využití UHPLC-MS ke stanovení kyseliny askorbové (AA) a dehydroaskorbové (DHA). AA je malá polární molekula, která působí jako antioxidant. Oxidací AA vzniká DHA. Poměr AA a DHA je ukazatelem redoxního stavu organismu. Pro stanovení AA a DHA již bylo vyvinuto několik metod, které však většinou neumožňují současné stanovení, ale vyžadují vícekrokový postup subtrakce. Optimalizace UHPLC-MS metody pro stanovení AA a DHA zahrnuje volbu mobilní a stacionární fáze a nastavení hmotnostního detektoru. Volba vhodných podmínek závisela především na retenčním čase a odezvě detektoru. Byl sledován vliv stacionární fáze a dále koncentrace, pH a složení mobilní fáze na retenci AA a DHA. Byl sledován i vliv mobilní fáze na stabilitu AA a DHA. Porovnávanými stacionárními fázemi byly kolona BEH Shield RP C18, BEH HILIC a BEH Amide kolona. Nejlepších výsledků bylo dosaženo na koloně BEH Shield RP C18. Pro zjištění vhodné mobilní fáze byla provedena měření s 0,1%, 0,05%, 0,01% kyselinou mravenčí, 0,1%, 0,05%, 0,01% kyselinou octovou, mravenčanem amonným o pH 3,5 a octanem amonným o pH 4,4 a 6,8 jako vodnou složkou. Nakonec...
|
host ::
RSS.