|
|
Optimalizace chromatografických podmínek pro HPLC stanovení vybraných karotenoidů
Dvořáková, Petra ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Solich, Petr (oponent)
Tato diplomová práce se zabývá hledáním optimálních podmínek pro stanovení karotenoidů luteinu, betakarotenu a zeaxanthinu. Pro stanovení byla využívána vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC). V průběhu hledání optimálních podmínek bylo testováno velké množství kolon a různých mobilních fází. Vycházelo se přitom z poznatků publikovaných v odborné literatuře. Testována byla jak chromatografie na reverzních fázích, tak i chromatografie na normálních fázích. Nejčastěji testované byly C18 kolony od různých výrobců. Největším problémem pro HPLC stanovení a separaci těchto tří látek bylo to, že lutein a zeaxanthin jsou polohové izomery. Separace takovýchto látek je poměrně náročná a nepodařilo se ji zcela vyřešit. Přesto byla vyvinuta metoda, kterou je možno tyto tři látky separovat a stanovovat. Tato metoda využívá kolonu Zorbax SB C18 (50 x 4,6 mm, 2 μm), UV detekci při 450 nm, mobilní fázi methylenchlorid:hexan:acetonitril (2,5:2,5:95), dávkovaný objem vzorku 1 μl, rychlost průtoku mobilní fáze 1 ml/min při teplotě 30 řC, isokratický režim.
|
|
|
Vývoj a validace nových HPLC metod pro stanovení specifických analytů v biologickém materiálu.
Urbánek, Lubor ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Karlíček, Rolf (oponent) ; Nobilis, Milan (oponent)
1. SHRNUTÍ Předložená disertační práce představuje zajímavé spojení dvou na první pohled odlišných oborů, jakými jsou analytická chemie a medicína. Pohled druhý, podrobnější, však ukazuje, že oba obory si mohou být velmi blízké a při vzájemné spolupráci analytika a lékaře přináší užitek každému z nich. První část této práce se věnuje nejprve teoretickým základům HPLC a chromatografické instrumentaci. Jedná se o krátký přehled některých principů uplatňovaných v kapalinové chromatografii a stručné představení vybraných součástí HPLC. Vzhledem k tomu, že srdcem každého chromatografického systému je analytická kolona s určitým typem stacionární fáze, se další část práce zabývá různými typy kolon a sorbentů. Zvláštní kapitola je potom věnována monolitickým kolonám a materiálům, které představují jakýsi nový a netradiční směr v chromatografii. Výhody a nevýhody použití monolitních kolon jsou pak shrnuty v publikacích, které jsou součástí experimentální části (Příloha 1, 2 a 9). Závěr této technické části tvoří rešerše s přehledem nových trendů v oblasti kapalinové chromatografie jako jsou ultra účinná kapalinová chromatografie, kolony se sub-2-mikronovými částicemi či automatizace a miniaturizace celých systémů. Druhá část disertační práce se zabývá sběrem a úpravou biologického materiálu. Jsou zde diskutovány...
|
|
|
Obsah kovů v léčivých rostlinách - empirický a chemometrický přístup
Komínková, Michaela ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Solich, Petr (oponent)
Obsah kovů v léčivých rostlinách - empirický a chemometrický přístup Abstrakt Bylo provedeno stanovení obsahu kovů Cr (0,01 - 13,9 ppm), Zn (25 - 96 ppm), Fe (84 - 2240 ppm), Mn (20 - 91 ppm), Ni (0,2 -5,4 ppm), Cu (1,5 -10 ppm) a Mg (0,3 - 1,3%) v sušených rostlinných drogách folium Melissae, flos Matricariae, herba Urticae, folium Menthae piperitae, fructus Foeniculi amari, flos Tilie, herba Hyperici a herba Filipendulae ulmariae, pocházejících z České republiky, Polska a Francie. Vzorky drog byly rozloženy mikrovlnnou mineralizací a příslušné kovové ionty stanoveny atomovou absorpční spektrofotometrií. Výsledky byly podrobeny statistické analýze za účelem vytipování kovů, které by mohly sloužit jako indikátory země původu drogy.
|
|
| |
|
|
Derivatizační metoda pro stanovení cholesterolu v biologickém materiálu metodou plynové chromatografie
Krausová, Martina ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Název práce : Derivatizační metoda pro stanovení cholesterolu v biologickém materiálu metodou plynové chromatografie Diplomant : Martina Krausová Abstrakt Analysed matters mostly occur in complicated mixtures in biological material. It is necessary to separate individual analits. Gas chromatography can be used for this purpose. It is sensitive analytical method with great separative effect. This method is applied with substance which can be turned into vapour by heating them. Substance that dissolves when heated must be put through derivation reaction at the rise of volatile derivatives. One of these derivative methods is described in this diploma work. This reaction is acylation of cholesterol into acyl - cholesterol which can be determined thanks to it's volatility by gas chromatography. V biologickém materiálu se analyzované látky většinou vyskytují ve složitých směsích. Jednotlivé analyty je nutné oddělit. K tomuto účelu lze využít plynovou chromatografii. Je citlivá analytická metoda s velkou separační účinností. Uplatňuje se u látek, které lze zahřátím převést na páry. U látek, které se při zahřátí rozkládají, je nutné je před analýzou podrobit derivatizační reakci za vzniku těkavých derivátů. Jedna z těchto derivatizačních metod je popsána v této diplomové práci. Touto reakcí je acylace cholesterolu...
|
|
|
Stanovení obsahu residuí kofeinu v povrchových vodách metodou HPLC s UV detekcí
Glosová, Ivana ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Životní prostředí je stále více zatěžováno residuii medikamentů a pravidelně konzumovaných látek. Cílem tohoto projektu bylo stanovit obsah kofeinu v povrchových vodách ( Mondego River, Coimbra, Portugaslko). Koncentrace kofeinu a jeho metabolitů v povrchových vodách mohou být ukazatelem nakolik se lidský faktor podílí na znečištění povrchových vod. Kofein je sloučenina obsažená v rostlinách, jídle, různých nápojích a také jako účinná látka v kombinovaných léčivých přípravních. Dobrá rozpustnost ve vodě (13,5 g/l), netěkavost a pravidelná konzumace propůjčuje kofeinu profil kvalitního a stabilního ukazatele lidského faktoru znečištění povrchových vod. Cíl této studie bylo získat data o jejich výskytu v povrchových vodách Portugalska ( řeka Mondego). SPE ( Solid Phase Extraction) extrakce přes polymerní Oasis HLB kolonu byla použita k extrahovaní kofeinu a kvantifikace a detekce byla provedena pomocí HPLC systému s UV detekcí ( vlnová délka 280 nm). Všechny vzorky byly negativní, neobsahovaly residua kofeinu.
|
|
|
Využití metody sekvenční injekční chromatografie pro separaci a stanovení triamcinolon acetonidu a kyseliny salicylové v léčivém přípravku Triamcinolon-Ivax
Holík, Pavel ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Solich, Petr (oponent)
Využití metody sekvenční injekční chromatografie pro separaci a stanovení triamcinolon acetonidu a kyseliny salicylové v léčivém přípravku Triamcinolon-IVAX Pavel Holík Abstrakt Výsledky měření potvrdily, že sekvenční injekční chromatografii je možné použít pro simultánní stanovení účinných látek v léčivém přípravku Triamcinolon - IVAX. Zjištěné výsledky dokázaly, že je tato nová generace průtokových metod alternativou HPLC v analytických laboratořích při zachování správnosti dosažených výsledků. Optimální podmínky pro analýzu jsou: mobilní fáze acetonitril-voda v poměru 35:65 (v/v), pH 3,3 až 3,4 upraveno přidáním koncentrované kyseliny octové (99%). Množství MF potřebné pro jednu analýzu je 4 ml; množství vzorku k jedné analýze 10 μl; průtoková rychlost pumpy 15 µl.s-1 . Pro analýzu byla použita kolona Onyx™ monolithic C18 (50 x 4,6 mm) s monolitickou předkolonou (5 x 4,6 mm); detekční cela Z o délce optické dráhy 1 cm s podélným směrem paprsku vůči toku; UV-VIS spektrofotometr s nastavenou vlnovou délkou 240 nm; jako vnitřní standard byl použit propylparaben. Metoda vykazovala tyto hodnoty: limit detekce (3σ) pro kyselinu salicylovou 1,00 µg.ml-1 , pro triamcinolon acetonid 0,66 µg.ml-1 a pro propylparaben 0,33 µg.ml-1 ; limit kvantifikace pro kyselinu salicylovou 3,00 µg.ml-1 , pro triamcinolon acetonid...
|
|
|
Vývoj elektrochemického glutamátového biosenzoru
Doležalová, Julie ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Polášek, Miroslav (oponent)
VÝVOJ ELEKTROCHEMICKÉHO GLUTAMÁTOVÉHO BIOSENZORU Julie Doležalová (Katedra analytické chemie, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Univerzita Karlova v Praze) Ve spolupráci s: Sofia A.L.P. Gomes, Alberto N. Araújo (Departamento de Química-Física, Faculdade de Farmácia, Universidade do Porto) Kyselina L-glutamová a L-glutamát sodný monohydrát se používají v potravinářském průmyslu jako přídatná látka pro zvýšení intenzity chuti pokrmů 1. Glutamát je přítomen v živých organismech a hraje klíčovou roli v mnoha metabolických procesech. Přesto se jeho užití v potravinách nyní sleduje s určitou obezřetností poté, co byl prokázán výskyt některých nežádoucích účinků, jako ztuhlost, napětí, bušení srdce ad., po jeho konzumaci. Některé studie upozorňovaly i na možnou souvislost s Parkinsonovou a Alzheimerovou nemocí. Jednoduchý způsob stanovení kyseliny L-glutamové a její sodné soli se proto v budoucnu může stát velmi potřebným. Tato práce představuje vývoj biosenzoru pro stanovení L-glutamátu za použití enzymu - L-glutamát dehydrogenázy. Tento redoxní enzym vyžaduje pro svou činnost přítomnost nikotinamidového koenzymu (NAD(P)+ /NAD(P)H), jehož redukovaná forma byla regenerována elektrochemicky s pomocí ve vodě rozpustného barviva - methylenové zeleně. Tenký film polymeru methylenové zeleně na povrchu...
|
|
|
Sekvenční injekční chromatografie
Chocholouš, Petr ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Polášek, Miroslav (oponent) ; Blešová, Marie (oponent)
Předložená práce přináší rozšíření aplikací sekvenční injekční analýzy v oblasti farmaceutické analýzy. Zabývá se možnostmi chromatografie pro úpravu vzorku před vlastním stanovením analytu. Soustředí se na zapojení monolitických kolon v systému SIA umožňujících provádět simultánní stanovení několika látek a analyzovat tak vzorky s matricí nebo jednoduchých směsí (farmaceutické přípravky). Nově vytvořená metoda je nazývána sekvenční injekční chromatografie (SIC) a představuje další generaci průtokových metod. Zapojením krátké monolitické kolony vyznačující se nízkým zpětným tlakem do SIC systému vyústilo v zavedení separačního prvku do dosud neseparační průtokové metody. Komerčně vyráběné monolitické kolony s reverzní fází se jeví jako vhodné pro stanovení léčiv ve směsných léčivých přípravcích. SIC umožňuje velmi rychlé stanovení směsných vzorků bez nebo jen s minimální předchozí off-line úpravou. Analýza vzorků s komplikovanější matricí (krémy, masti) byla provedena po provedení extrakce rozpouštědlem ze vzorku. Bylo také studováno využití různých délek monolitických kolon. První experimentální práce (příloha I) byla první prací na SIC systému jejíž cílem byla bezproblémová implementace monolitické kolony a následné otestování na léčivém přípravku (mast). Byly optimalizovány jednotlivé součásti...
|
|
|
Vývoj a validace HPLC metod pro analýzu léčivých přípravků
Matysová, Ludmila ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Karlíček, Rolf (oponent) ; Nobilis, Milan (oponent)
6. Shrnutí Tato disertační práce je věnována vývoji HPLC metod, které splňují všechny požadavky kladené na vhodnost, přesnost a správnost, pro analýzu farmaceutických přípravků. Doložení těchto vlastností metody je proces, který se nazývá validace. Předložená práce nejprve pojednává o teoretických základech chromatografie jako takové, s důrazem na chromatografii kapalinovou, včetně HPLC. Popisuje instrumentaci v HPLC, kde jsou zmíněny i nové trendy ve vývoji stacionárních fází, ať už se jedná o monolitické kolony, stacionární fáze na bázi oxidu zirkoničitého, HILIC stacionární fáze a sub-2-mikronové kolony. Je zde i část věnovaná UPLC, jednomu z dalších trendů ve vývoji kapalinové chromatografie. V další části je probírán vývoj HPLC metod pro analýzu farmaceutik a také kapitola, věnující se analýze léčivých přípravků, včetně přípravy vzorků k analýze, sledování stabilit léčivých přípravků a část, která se věnuje analýze nečistot. Poslední poměrně rozsáhlá kapitola teoretické části této práce se věnuje validacím analytických metod. Požadavky na validace se zabývá několik autorit, které vydávají závazné normy a/nebo doporučení, jimiž je třeba se během tohoto procesu řídit. V České republice je to Státní ústav pro kontrolu léčiv (SÚKL - Věstník SÚKL, ČL 2005). V Evropské unii jsou validace zmíněny v Evropském...
|
host ::
RSS.