|
|
Voltametrická detekce 27-hydroxycholesterolu na borem dopované diamantové elektrodě
Michnová, Kristýna ; Schwarzová, Karolina (vedoucí práce) ; Nesměrák, Karel (oponent)
Cílem této bakalářské práce bylo studium voltametrického chování 27-hydroxycholesterolu za využití borem dopované diamantové elektrody. Byl zkoumán vliv několika faktorů na proudovou odezvu 27-hydroxycholesterolu: vliv základního elektrolytu, koncentrace kyseliny chloristé, rychlosti polarizace, obsahu vody a vliv pH. Studium bylo prováděno metodou cyklické voltametrie v prostředí kyseliny chloristé nebo v prostředí chloristanu sodného v acetonitrilu. 27-hydroxycholesterol poskytuje v prostředí 0,1 mol l-1 kyseliny chloristé v acetonitrilu (obsah vody 0,43 %) a 0,1 mol l-1 chloristanu sodného v acetonitrilu proudovou odezvu v anodické oblasti s potenciálem okolo +1450 mV vs. Ag/0,01 mol l-1 AgNO3 v 1 mol l-1 NaClO4 v acetonitrilu. Dále byla naměřena koncentrační závislost metodou diferenční pulzní voltametrie s limitem detekce (LOD) stanoveným na 2,71 μmol l-1 a limitem stanovitelnosti (LOQ) stanoveným na 9,04 μmol l-1 . Bylo prokázáno, že metoda voltametrie s lineárním nárůstem potenciálů nedosahuje srovnatelných limitních hodnot. Klíčová slova 27-hydroxycholesterol, borem dopovaná diamantová elektroda, oxidace, oxysteroly, voltametrie
|
|
|
Voltametrie a kapalinová chromatografie cholesterolu, jeho prekurzorů a oxidačních produktů
Kubešová, Jana ; Schwarzová, Karolina (vedoucí práce) ; Baluchová, Simona (oponent)
Steroly patří mezi obtížně elektrochemicky detekovatelné látky. Diplomová práce se věnuje studiu voltametrického chování oxysterolů 25-hydroxycholesterolu a 7-ketocholesterolu na borem dopované diamantové elektrodě a vývoji separační HPLC metody pro směs sterolů se spektrofotometrickou a elektrochemickou detekcí. Studium voltametrického chování zmíněných látek bylo prováděno pomocí cyklické voltametrie a diferenční pulzní voltametrie. Jako nejvhodnější prostředí pro oxidaci obou oxysterolů byla po provedení měření v různých základních elektrolytech zvolena 0,1 mol l−1 kyselina chloristá v acetonitrilu (obsah vody 0,55 %), protože v tomto prostředí poskytují oba oxysteroly nejvyšší a stabilní proudové odezvy. Při potenciálu +1500 mV 25-hydroxycholesterol a při potenciálu +1900 mV 7-ketocholesterol. Tuto látku lze i elektrochemicky redukovat, ale odezva není v prostředí 0,1 mol l−1 kyseliny chloristé reprodukovatelná. Stabilita oxysterolů v tomto prostředí byla potvrzena pomocí UV−VIS spekter. Metodou diferenční pulsní voltametrie byl získán limit detekce 0,82 µmol l−1 pro 25-hydroxycholesterol a 0,66 µmol l−1 pro 7-ketocholesterol. Ve druhé části práce byla vyvinuta metoda pro dělení směsi sterolů na reverzní C18 fázi v mobilní fázi obsahující 50 mmol l−1 chloristan sodný v acetonitrilu s obsahem...
|
|
|
Voltametrické stanovení sulfathiazolu na borem dopované diamantové elektrodě
Zich, Mikuláš ; Fischer, Jan (vedoucí práce) ; Schwarzová, Karolina (oponent)
Tato bakalářská práce se zabývá studiem elektrochemicky aktivní látky sulfathiazolu. Sulfathiazol je látka s antibakteriálními účinky, která se přidává do potravy zvířatům. To vede k zamořování půdy, vody a potravin. Pro voltametrické stanovení byla jako pracovní elektroda vybrána borem dopovaná diamantová elektroda. Nejprve bylo stanoveno optimální pH pro studium sulfathiazolu technikou diferenciální pulsní voltametrie v rozsahu 2 až 12 a optimální předúprava elektrody před měřením. Následně byla proměřena kalibrační závislost. Sulfathiazol se podařilo rozpustit ve vodě při koncentrací c = 1·10-3 mol l-1 a jako elektrolyt byl použit Britton-Robinsonův pufr. Optimální pH pro měření bylo určeno pH 6,0. Při tomto pH bylo dosaženo relativní směrodatné odchylky sr = 5%. Této směrodatné odchylky bylo dosaženo, když byla pracovní elektroda leštěna před každým měřením. Za těchto podmínek byla provedena kalibrační měření v koncentračním rozsahu 0,1 - 100 μmol l-1 . Pro měření bylo dosaženo lineárního dynamického rozsahu v rozmezí: 0,1 - 20 μmol l-1 . Mez stanovitelnosti byla určena jako 97 nmol l-1 .
|
|
|
Voltametrická detekce 7α-hydroxycholesterolu na borem dopované diamantové elektrodě
Serbanová, Lucie ; Schwarzová, Karolina (vedoucí práce) ; Nesměrák, Karel (oponent)
Tato bakalářská práce se věnuje elektrochemickému stanovení 7α-hydroxycholesterolu (7α-OHC) za využití borem dopované diamantové elektrody (BDDE). Práce zahrnuje optimalizaci experimentálních podmínek a měření koncentrační závislosti 7α-OHC. Byl zkoumán vliv různých faktorů, jako je obsah vody v roztoku a rychlost skenu na elektrochemickou odezvu 7α-OHC. V rámci experimentů byly použity různé elektrochemické metody, včetně cyklické voltametrie a diferenciální pulzní voltametrie. Bylo analyzováno elektrochemické chování 7α-OHC v roztoku kyseliny chloristé a acetonitrilu. Důležité faktory, jako je pasivace elektrody a stabilita odezvy, byly pečlivě zhodnoceny. Měření koncentrační závislosti 7α-OHC prokázalo lineární odezvu v rozmezí koncentrací 2∙10−5 mol l−1 až 1∙10−4 mol l−1 . Byly určeny limity detekce (LOD) a stanovitelnosti (LOQ), jejichž hodnoty jsou 1,33 µmol l−1 a 4,43 µmol l−1 . Srovnání s jinými metodami ukázalo, že elektrochemické stanovení 7α-OHC na BDDE nedosahuje srovnatelné citlivosti. Výsledky této práce poskytují důležité informace o elektrochemickém chování 7α-OHC a zdůrazňují výhody BDDE pro citlivé a spolehlivé stanovení oxysterolů. Získané poznatky mohou být v budoucnu využity při dalším rozvoji a optimalizaci elektrochemických metod pro analýzu 7α-OHC a strukturně příbuzných látek.
|
|
|
Modifikace borem dopované diamantové elektrody elektrochemickou oxidací p˗aminonobenzoové kyseliny
Švárová, Eliška ; Fischer, Jan (vedoucí práce) ; Dejmková, Hana (oponent)
Tato bakalářská práce se zabývá modifikací borem dopované diamantové elektrody (BDDE) elektrochemickou oxidací kyseliny p-aminobenzoové. Následně byla zkoumána stabilita modifikované elektrody vlivem aplikace různých parametrů. Modifikace elektrody byla provedena metodou cyklické voltametrie (CV) v elektrolytu LiClO4. Úspěšnost modifikace a její následná stabilita byla zkoumána též metodou CV v elektrolytu KCl v přítomnosti redoxního systému [Fe(CN)6]4-/3- . Stabilita byla testována z hlediska čištění v isopropanolu ultrazvukem a anodického čištění v 0,5 mol l-1 H2SO4. Bylo zjištěno, že modifikace povrchu čištěním v isopropanolu ultrazvukem zcela odstranit nelze, naopak při anodickém čištění stačí pro úplně odstranění modifikace pouhý 2s pulz o vysokém kladném potenciálu. Byly stanoveny optimální podmínky pro stabilitu modifikace povrchu. Ideální počet cyklů při modifikaci povrchu byl stanoven na 5 cyklů. Použitím různých elektrolytů při modifikaci (KClO4 a LiClO4) bylo určeno, že v případě modifikace v elektrolytu KClO4 je možné měřit v rozsahu potenciálového okna od -400 do +1600 mV a v případě LiClO4 v rozsahu od -400 do +1500 mV bez porušení modifikované vrstvy. Z hlediska stárnutí elektrody se objevila větší stabilita u modifikace v přítomnosti LiClO4. Klíčová slova: Borem dopovaná diamantová...
|
|
|
Elektrochemická studie desorpce DNA z povrchu uhlíkových elektrod
Průcha, Jakub ; Dejmková, Hana (vedoucí práce) ; Schwarzová, Karolina (oponent)
Tato bakalářská práce se zabývá možností desorpce DNA z povrchu uhlíkových elektrod. Měření byla prováděna voltametrií s lineárním skenem ve tříelektrodovém zapojení, kdy jako vzorek sloužila ssDNA o délce 31 nukleotidů. Pracovními elektrodami byly borem dopovaná diamantová elektroda a elektroda z vysoce orientovaného pyrolytickeho grafitu. Účinnost desorpce byla posuzována porovnáváním výšek oxidačních signálů adsorbovaných nukleových bází, které byly měřeny před a po aplikaci desorpčního postupu. Prvním postupem byla desorpce za míchání, respektive odmývání v roztocích o různých vlastnostech, konkrétně v organických rozpouštědlech; methanolu, acetonu, toluenu a DMSO, v kyselinách, zásadách; HCl, HNO3, NaOH a následně v tenzidech a detergentech; Triton X - 100, TWEEN 80, CTAB a tergazym. Z vyjmenovaných testovaných látek se jako efektivní prokázaly 0,1 mol·l-1 roztok NaOH a 1 % roztok tergazymu. Následně byla zkoumána časová a teplotní závislost těchto dvou roztoků na desorpci ssDNA. Z provedených experimentů bylo stanoveno, že efektivita odmývání roztokem NaOH se s časem ani teplotou roztoku nezlepšuje. Pro odmývání 1% roztokem tergazymu byla stanovena jako nejefektivnější doba 5 minut za zahřívání roztoku na teplotu alespoň 40 řC. Posléze byla testována opakovatelnost měření, ze které vyplývá,...
|
|
|
Testování elektrochemických vlastností průtokového diamantového detektoru
Pecák, Jakub ; Dejmková, Hana (vedoucí práce) ; Vyskočil, Vlastimil (oponent)
V předložené bakalářské práci byla ověřena funkčnost průtokové multitubulární borem dopované diamantové elektrody (mtBDDE) na dvou vybraných neurotransmiterech, DA a NE, za použití techniky HPLC s isokratickou elucí. Jako mobilní fáze byl zvolen vodný roztok Britton-Robinsonova (B-R) pufru a jako stacionární fáze reverzní kolona Kinetex EVO C18 (150 x 4,6 mm). Průtoková rychlost mobilní fáze byla nastavena na 1 ml/min. K elektrochemické detekci byla využita mtBDDE a jako asistence hlavního detektoru byla uplatněna UV detekce při 280 nm. Byla prozkoumána elektrochemická odezva roztoku DA, resp. NE (cΘ = 1.10-4 mol/dm3 ) ve formě hydrodynamických voltamogramů v rozsahu potenciálu od 0,1 V do 1,3 V v různých oblastech pH mobilní fáze (2,5; 4,0; 6,0; 8,0 a 10,0). Bylo zjištěno, že se vzrůstajícím pH mobilní fáze se posouvá potenciálová vlna k nižším potenciálům, přičemž odezva jednotlivých analytů se v závislosti na pH výrazně nemění. Za optimálních podmínek, tj. mobilní fáze B-R pufr o pH = 6 a potenciál vložený na mtBDDE 0,6 V, byla ověřena opakovatelnost a reprodukovatelnost výsledků měření. Bylo prokázáno, že elektroda poskytuje v rámci série měření opakovatelné výsledky (RSD < 4 %) srovnatelné s použitým UV detektorem (RSD ≤ 4 %). Při měřené reprodukovatelnosti byl pozorován pokles výšek píků až o...
|
|
|
A new approach to the electroanalysis of primary bile acids and related steroids
Klouda, Jan ; Schwarzová, Karolina (vedoucí práce) ; Skopalová, Jana (oponent) ; Vyskočil, Vlastimil (oponent)
V této dizertační práci byla vyvinuta nová metoda pro stanovení primárních žlučových kyselin: cholové kyseliny a chenodeoxycholové kyseliny. V těle savců plní žlučové kyseliny rozmanité významné funkce. Jejich stanovení je rovněž důležitým nástrojem v diagnóze aléčbě onemocnění jater a žlučníku. Tyto nasycené organické sloučeniny postrádají ve své struktuře silné chromofory a fluorofory, což zásadně znesnadňuje jejich spektrometrickou detekci. Proto jsou pro účely detekce využívány instrumentálně pokročilé, ale nákladné metody, jako je hmotnostní spektrometrie, nebo méně spolehlivé enzymatické metody. Z těchto důvodů je neustálá silná poptávka po jednoduchých a spolehlivých metodách pro stanovení žlučových kyselin. Je rovněž známo, že žlučové kyseliny je prakticky nemožné přímo elektrochemicky oxidovat. V této dizertační práci byla vyvinuta a optimalizována metoda, která umožňuje chemickou aktivaci žlučových kyselin pro jejich elektrochemickou oxidaci na nemodifikovaných elektrodových materiálech a která byla aplikována pro stanovení cholové kyseliny a chenodeoxycholové kyseliny. Tato aktivace je založena na dehydratační reakci primární žlučové kyseliny s 0,1 mol l-1 HClO4 v acetonitrilu (obsah vody 0,55 %), která do původně plně nasyceného steroidního jádra zavede jednu nebo více dvojných vazeb....
|
|
|
Vývoj voltametrických metod pro detekci fytosterolů na elektrodách na bázi uhlíku
Zelenský, Michal ; Schwarzová, Karolina (vedoucí práce) ; Fischer, Jan (oponent)
Cílem této diplomové práce bylo vyvinout elektrochemickou metodu pro tři fytosteroly, a to stigmasterol, β-sitosterol a ergosterol za pomoci voltametrických technik na elektrodách ze skelného uhlíku a bórem dopovaného diamantu. Práce navazuje na bakalářskou práci [1], kde se ukázalo, že k elektrochemické oxidaci fytosterolů je potřeba kyseliny chloristé v acetonitrilu. Při použití této kyseliny dochází k dehydratační reakci a produkty této dehydratace jsou elektrochemicky oxidovány. Kalibrační závislosti byly naměřeny pro všechny fytosteroly v prostředí s obsahem vody 0,43 %. Stálost signálu byla sledována při zvyšujícím se obsahu deionizované vody. Poté byly změřeny kalibrační závislosti ve zvýšeném obsahu vody. Pokud budeme chtít použít separační techniky typu HPLC, musíme nejprve zjistit, jak se budou fytosteroly chovat v tomto prostředí, a proto se zkoumala stálost signálu na obsahu pufrů. Použitými pufry byly fosfátový a acetátový pufr. Posléze byla naměřena koncentrační závislost v prostředí s vyšším obsahem fosfátového pufru. Dále byla zkoumána možnost detekce dvou fytosterolů zároveň při jednom měření. Klíčová slova: dehydratace, elektroda ze skelného uhlíku, bórem dopovaná diamantová elektroda, fytosteroly, oxidace, voltametrie
|
|
|
Vývoj elektroanalytických metod pro detekci žlučových kyselin obsahujících 7α hydroxylovou skupinu
Jelšíková, Kristýna ; Schwarzová, Karolina (vedoucí práce) ; Dejmková, Hana (oponent)
Obsahem této diplomové práce je studium elektrochemických procesů vybraných žlučových kyselin, které obsahují 7 hydroxylovou skupinu (cholová, chenodeoxycholová a −muricholová). Měření probíhala na borem dopované diamantové elektrodě v prostředí acetonitrilu a kyseliny chloristé (obsah vody 0,55 %) metodou cyklické voltametrie. Je známo, že za pomoci dehydratační reakce mezi kyselinou chloristou a 7 žlučovou kyselinou dojde ke zvýšení elektrochemické aktivity 7 žlučové kyseliny. Předmětem studia byla stabilita voltametrické odezvy takto chemicky aktivovaných žlučových kyselin v oblasti záporných potenciálů. Bylo zjištěno, že pro získání katodického signálu 7 žlučových kyselin je důležitá přítomnost kyslíku v měřeném roztoku. Ten nejspíše plní regenerační funkci, v jeho přítomnosti dochází ke zpětné oxidaci produktu elektrochemické redukce, a tím ke zvýšení voltametrického signálu. Zároveň je důležité, aby sken v cyklické voltametrii nejprve směřoval do pozitivních hodnot, kdy musí být dosaženo potenciálu +2,0 V (vs. Ag/AgNO3 v acetonitrilu), kdy dochází k tvorbě HO● radikálů, právě jejichž působením nejspíše vzniká ten produkt(y) oxidace žlučových kyselin, které je následně možné redukovat. Poté je dosaženo katodické odezvy studovaných žlučových kyselin při ca −0,40 V (chenodeoxycholová kyselina),...
|
host ::
RSS.