|
|
Rekombinantní exprese a studium receptoru dendritických buněk DCL-1
Pospíšilová, Eliška ; Bezouška, Karel (vedoucí práce) ; Novák, Petr (oponent)
Rekombinantní exprese a studium receptoru dendritických buněk DCL-1 Eliška Pospíšilová Univerzita Karlova v Praze, Přírodovědecká fakulta, Katedra biochemie ABSTRAKT Dendritické buňky, vyskytující se v hojném počtu téměř ve všech tkáních, na svém povrchu exprimují C-lektinový receptor DCL-1 (CD302). Tato molekula se řadí k transmembránovým receptorům první třídy, což znamená, že N-terminální část, na které se nachází signální sekvence a doména typu C-lektinů vázající sacharidové struktury (CTLD), je lokalizována extracelulárně, zatímco C-terminální část, která obsahuje potenciální fosforylační místa a signální sekvenci pro intracelulární transport, se nachází v cytosolu. Jelikož je sekvence tohoto proteinu v rámci všech savců vysoce konzervovaná, lze usuzovat na jeho důležitou fyziologickou úlohu. Přesto je tato molekula stále málo prozkoumaná. Tato práce se zabývá extracelulární částí receptoru DCL-1, především úsekem obsahujícím CTLD. Abychom se o této molekule více dozvěděli, byl na základě předchozích zkušeností laboratoře vybrán vhodný produkční systém, zahrnující bakteriální buňky E. coli BL21 (DE3) Gold, které produkují cílený protein ve formě inkluzních tělísek do cytoplasmy. Dále byly optimalizovány podmínky in vitro renaturace a analytickými metodami bylo zkontrolováno, zda je protein v dostatečně...
|
|
|
Rekombinantní exprese a studium receptoru dendritických buněk DCL-1
Pospíšilová, Eliška ; Bezouška, Karel (vedoucí práce) ; Novák, Petr (oponent)
Rekombinantní exprese a studium receptoru dendritických buněk DCL-1 Eliška Pospíšilová Univerzita Karlova v Praze, Přírodovědecká fakulta, Katedra biochemie ABSTRAKT Dendritické buňky, vyskytující se v hojném počtu téměř ve všech tkáních, na svém povrchu exprimují C-lektinový receptor DCL-1 (CD302). Tato molekula se řadí k transmembránovým receptorům první třídy, což znamená, že N-terminální část, na které se nachází signální sekvence a doména typu C-lektinů vázající sacharidové struktury (CTLD), je lokalizována extracelulárně, zatímco C-terminální část, která obsahuje potenciální fosforylační místa a signální sekvenci pro intracelulární transport, se nachází v cytosolu. Jelikož je sekvence tohoto proteinu v rámci všech savců vysoce konzervovaná, lze usuzovat na jeho důležitou fyziologickou úlohu. Přesto je tato molekula stále málo prozkoumaná. Tato práce se zabývá extracelulární částí receptoru DCL-1, především úsekem obsahujícím CTLD. Abychom se o této molekule více dozvěděli, byl na základě předchozích zkušeností laboratoře vybrán vhodný produkční systém, zahrnující bakteriální buňky E. coli BL21 (DE3) Gold, které produkují cílený protein ve formě inkluzních tělísek do cytoplasmy. Dále byly optimalizovány podmínky in vitro renaturace a analytickými metodami bylo zkontrolováno, zda je protein v dostatečně...
|
host ::
RSS.