|
|
Využití superkritické fluidní chromatografie v analýze přírodních látek
Lacmanová, Tereza ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Pilařová, Veronika (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Tereza Lacmanová Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Využití superkritické fluidní chromatografie v analýze přírodních látek Cílem této diplomové práce je ověření vhodnosti UHPSFC metody s PDA a MS detekcí pro analýzu přírodních látek. Byly vybrány dva zástupci přírodních látek - alkaloidy čeledi Amaryllidaceae účinné v léčbě Alzheimerovy choroby a fenolické látky s antioxidační aktivitou - flavonoidy rutin, kvercetin a jejich metabolity. Analýzy proběhly na systému Acquity UPC2 s PDA a MS detektorem. Základní screening byl proveden na 10 stacionárních fázích: BEH 2-EP, HSS SB C18, BEH, Torus DIOL, Torus 2-PIC, Torus DEA, CSH PFP, Torus 1-AA, Cortecs HILIC a BEH Amide. Zkoušeny byly 4 mobilní fáze: 1. CO2 + MeOH, 2. CO2 + MeOH + 0,1 % NH4OH, 3. CO2 + MeOH + 10 mM mravenčan amonný a 4. CO2 + MeOH + 10 mM mravenčan amonný + 2 % H2O. Podmínky separace byly nastaveny následovně: průtok 1,5 ml/min, teplota 40 řC, tlak 140 bar, gradientová eluce od 2 % do 40 % do 4. minuty, se dvěma izokratickými kroky na začátku a na konci gradientu. Optimalizace chromatografických podmínek zahrnovala změnu složení mobilní fáze, změnu nastavení gradientové eluce i hodnot tlaku a teploty. Pro...
|
|
|
Studie faktoru teploty při HPLC gradientové a isokratické separaci
Habart, Miroslav ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
4 Abstrakt Tato diplomová práce byla zaměřena na studii vlivu teploty na analýzu fenolických kyselin a flurorochinolonových antibiotik při analáze vysoko účinnou kapalinovou chromatografií. Analýza probíhala na chromatografické koloně Zorbax SB C 18 (50 x 4,6 mm; 1,8 µm) za použití ultrafialové (UV) detekce. V rámci optimalizace metody byly zjišťovány vhodné podmínky pro separaci fenolických kyselin a fluorochinolonových antibiotik. Byl sledován vliv složení a koncentrace vodné složky mobilní fáze a především vliv teploty. Při analýze fenolických kyselin byla použita gradientová eluce. Mobilní fáze se skládala z 0,1% roztoku kyseliny mravenčí a metanolu. Analýza fluorochinolonových antibiotik probíhala isokraticky a mobilní fáze byla složena též z 0,1% roztoku kyseliny mravenčí a metanolu. Základním cílem této diplomové práce bylo s pomocí zvýšené teploty urychlit analýzu a tím ušetřit čas a zároveň i použitá rozpouštědla tvořící mobilní fázi. Při analýze fenolických kyselin byl tento předpoklad splněn a při vyšších teplotách došlo k výraznému urychlení analýzy při dobrém rozlišení jednotlivých píků. Naopak nižší teplota než laboratorní byla příznivá pro analýzu fluorochinolonů. U metod pro fenolické kyseliny i pro fluorochinolonová antibiotika byly provedeny testy způsobilosti systému nástřikem roztoku...
|
|
|
Optimalizace HPLC separace bazických látek ze skupiny betablokátorů - využití nových typů stacionárních fází
Svoboda, Antonín ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Antonín Svoboda Konzultant: PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název rigorózní práce: Optimalizace HPLC separace bazických látek ze skupiny betablokátorů - využití nových typů stacionárních fází Betablokátory jsou farmakologicky účinné látky, které působí na betaadrenergní systém v lidském těle. Jako léky jsou používané ve více indikacích, zejména na léčbu hypertenze a srdeční arytmie. Chemicky se jedná o bazické převážně nepolární molekuly. V této práci byla vyzkoušena separace 7 betablokátorů pomocí HPLC - vysokoúčinné kapalinové chromatografie na různých stacionárních fázích. Byly hledány optimální podmínky pro separaci zkoumaných látek změnami ve složení a pH mobilní fáze nebo v gradientové eluci. Různé separační podmínky byly srovnány v parametrech retence, rozlišení a symetrie píků. Nalezené podmínky byly hodnoceny testem způsobilosti systému. Výsledky byly vyhovující na analytických kolonách Zorbax Eclipse XDB s upravenou stacionární fází C18. Analytická kolona Zorbax Extend C18 s dvojitým endcappingem a bidentátovou vazbou poskytla uspokojivé výsledky při pH 7,4, ale při pH 10 již došlo k výraznému chvostování píků a analýza při vyšším pH nebyla proto vhodná. Hybridní stacionární...
|
|
|
Porovnání APCI a ESI ionizace při vývoji UPLC-MS/MS metodiky pro stanovení steroidních látek ze skupiny estrogenů a progestinů
Rabatinová, Martina ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Jáč, Pavel (oponent)
Sledovanými látkami v této diplomové práci jsou ženské pohlavní hormony, jejichž prob- lematika v environmentální analýze nabývá na významu. Vliv hormonálně aktivních látek na životní prostřední a člověka má rostoucí tendenci. Již v 80. letech 20. století byly pozorovány deformity na rybách vyskytujících se v řekách. Mezi sloučeniny vykazující tyto účinky patří kromě steroidních hormonů také pesticidy, tenzidy a plastifikátory. Estrogeny, jak přirozené tak syntetické, jsou sloučeniny s vysokou hormonální aktivi- tou. Tyto sloučeniny zapříčiňují rakovinu prsu, abnormality v oblasti pohlavních orgánů a snížení početu spermií. Jsou také příčinou feminizace, hermafroditizmu a klesající plod- nosti u zvířat. Stoupající riziko znečištění vod nutí analytické laboratoře vyvíjet nejdokon- alajší instrumentální metody ke stanovení steroidních látek. Vliv estrogenů na životní prostředí byl pozorován již při koncentracích v pg/ml. Tato práce se zabývá vývojem metody pro kvalitativní a kvantitativní analýzu deseti látek steroidní povahy ze skupiny ženských pohlavních hormonů pomocí ultravysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostním spektrometrem typu trojitého kva- drupólu s možností tandemové hmotnostní detekce (UHPLC-MS/MS). Separace byla provedena na koloně BEH Phenyl. Jako mobilní fáze byl...
|
|
|
Stability of Vitamins in Intralipid Emulsions and Degradation of Ascorbic Acid
Khýnová, Lucie ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Nováková, Lucie (oponent)
Podvýživa je stav, ve kterém nedostatek energie, proteinů a ostatních živin má znatelně nepříznivý dopad na tkáně, jejich funkci a složení1 . Parenterální výživa je alternativní metoda poskytování nutriční podpory pro pacienty prostřednictvím žilního systému3 . Směsi parenterální výživy se skládají z tuků, sacharidů, proteinů, vitamínů, stopových prvků, elektrolytů a tekutin. Vitamíny jsou považovány za nejméně stabilní složky v parenterálních směsích, a tudíž by měly být přidány bezprostředně před aplikací infuze. Cílem mé práce bylo získat informace o stabilitě vitamínů ve směsi Intralipid® v závislosti na různých skladovacích podmínkách a na době skladování. Vitamíny rozpustné ve vodě a v tucích byly testovány ve směsi Intralipid® emulze (Fresenius Kabi) se substancí Solvitio® N obsahující vitamíny rozpustné ve vodě a s emulzí obsahující vitamíny rozpustné v tucích-Vitlipid® N. Celkem bylo připraveno šest 50ml injekčních stříkaček. Každá z nich byla naplněna 47 ml Intralipidové směsi a uzavřena. Testování chemické a fyzikální stability bylo provedeno v čase nula, po 7, 14 a 29 dnech skladování v lednici následované 24 a 48 hodinovým skladováním těchto směsí při okolní teplotě. Provedené fyzikální testy zahrnovaly měření hodnot pH, osmolality, mikroskopii, a měření velikosti částic laserovou...
|
|
|
Identification of phenolic compounds in plant extracts using UHPLC-MS/MS
Kmeťová, Ivana ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Ivana Kmeťová Školiteľ: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Názov diplomovej práce: Identifikace fenolických látek v rostlinných extraktech s využitím UHPLC-MS/MS Cieľom tejto diplomovej práce bola identifikácia fenolických látok v suchom lyofilizovanom vodnom extrakte z listov jahody obyčajnej (Fragaria Vesca L.) s použitím ultra- vysoko účinnej kvapalinovej chromatografie spojenej s elektrosprejovou tandemovou hmotnostnou spektrometriou (UHPLC-ESI-MS/MS), ktorá poskytuje výhody pri identifikácii komplexných rastlinných vzoriek. Fenolické zlúčeniny reprezentujú skupinu vysoko komplexných prirodzene sa vyskytujúcich molekúl v rastlinách, ktoré majú širokú škálu biologických a fyziologických funkcií a slúžia ako chemotaxonomické markerove zlúčeniny. Táto práca bola zameraná na flavonoidy a im príbuzné látky. Pre separáciu bola použitá UHPLC miesto bežnejšej HPLC pre svoju oveľa vyššiu separačnú účinnosť, ktorá je kľúčová pri úspešnej separácii komplexných vzoriek. Navyše, UHPLC umožnila skrátiť dobu analýzy. Určenie štruktúry fenolických zlúčenín bolo založené na vyhodnotení a porovnaní MS a MS/MS spektier v pozitívnom i v negatívnom iónovom režime ESI. Využité boli základné skeny, skeny...
|
|
| |
|
|
Hodnocení vlastností nových HILIC stacionárních fází pro analyty ze skupiny pteridinů s využitím metodiky UHPLC-FD
Kaufmannová, Iva ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Iva Kaufmannová Školitel: PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Hodnocení vlastností nových HILIC stacionárních fází pro analyty ze skupiny pteridinů s využitím metodiky UHPLC-FD Předmětem této diplomové práce je hodnocení vlastností tří typů nových HILIC stacionárních fází určených k identifikaci a stanovení biologicky aktivních látek biopterinu, neopterinu, dihydrobiopterinu a dihydroneopterinu za použití metody UHPLC ve spojení s fluorescenční detekcí. Neopterin slouží jako ukazatel aktivace imunitního systému a zánětlivých onemocnění. Jeho včasná detekce v moči nebo plazmě může pomoci odhalit patologickou imunitní aktivitu. Se zvýšenou hladinou neopterinu se setkáváme u virových či bakteriálních onemocnění, u autoimunitních nemocí, při HIV infekci či u zhoubných nádorů. 7,8 - dihydroneopterin je schopen bránit proteiny a lipoproteiny před oxidačním poškozením. HILIC je chromatografickou metodou, kterou lze použít ke zvýšení retence velmi polárních sloučenin. Využívá polární stacionární fáze a mobilní fáze obsahující určité množství vody a polárního rozpouštědla. UHPLC je nejmodernější technologií umožňující vyvinout tlak okolo 100 MPa. Používá kolony s malými částicemi (< 2...
|
|
|
Využití nových typů stacionárních fází pro HPLC stanovení neopterinu a dalších metabolitů v moči
Prokopová, Veronika ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Nováková, Lucie (oponent)
Cílem této práce bylo porovnání separačních možností různých typů chromatografických kolon pro stanovení neopterinu, kynureninu, kreatininu a kyseliny močové ve vzorku moči s metodou, která je v současné době využívána v laboratoři Gerontologické a metabolické kliniky Fakultní nemocnice v Hradci Králové pro stanovení požadovaných analytů. Základní, již vyvinutou a validovanou metodou , byla metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s kolonou Gemini 5 um C18 110Ǻ, 150 x 3 mm, Phenomenex (Torrance, USA). Jako mobilní fáze byl použit fosforečnanový pufr o koncentraci 15 mmol/l a pH 6,4 s průtokem 0,8 ml/ min. Pro kreatinin, kynurenin a kyselinu močovou byla použita detekce při vlnových délkách 235 nm pro kreatinin, 230 nm pro kynurenin a 290 nm pro kyselinu močovou. Neopterin byl detekován fluorescenčně za použití 353 nm excitační vlnové délky a 438 nm emisní vlnové délky. Všechny chromatografické systémy byly porovnány na základě testu vhodnosti systému (SST - System Suitability Test), byla zhodnocena jejich separační účinnost, rozlišení píků, asymetrie a ostatní parametry. Kolony s nevhodnějšími parametry byly vybrány pro další optimalizaci a validaci, jejímž výsledkem by měla být nová moderní HPLC metoda pro klinické využití.
|
|
|
Osobnost Túpaca Amarua II. a jeho přínos pro další vývoj v Peru
Nováková, Lucie ; Opatrný, Josef (vedoucí práce) ; Binková, Simona (oponent)
Tato diplomová práce na úvod popisuje historické pozadí koloniálního období v místokrálovství Peru a následně se soustřeďuje na povstání Josého Gabriela Túpaca Amarua, které bylo vyústěním obecné nespokojenosti vládnoucí na daném území. Túpac Amaru se tímto povstáním zapsal do dějin nejen Peru, ale celé Latinské Ameriky, a ovlivnil následný vývoj v jihoamerických koloniích. Stal se tak inspirací a námětem k dalším studiím a pracím. Jednou z oblasti, ve které se často můžeme setkat jeho jmé-nem, je literatura. Objevuje se v dílech jak peruánských autorů, tak i u spisovatelů ji-ných národností. Ţánrově je zastoupen jak v poezii, próze, tak i v dramatu i ve filmu, jejichž analýze je věnována druhá část této diplomové práce.
|
host ::
RSS.