|
| |
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení 6-gingerolu, kapsaicinu, 8-gingerolu, 6-shogaolu a 10 gingerolu ve vzorcích zázvorovníku lékařského
Urbanová, Martina ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Martina Urbanová Školitel: PharmDr. Lucie Havlíková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení 6-gingerolu, kapsaicinu, 8-gingerolu, 6-shogaolu a 10-gingerolu ve vzorcích zázvorovníku lékařského Diplomová práce byla zaměřena na vývoj HPLC metody pro stanovení 6-gingerolu, kapsaicinu, 8-gingerolu, 6-shogaolu a 10-gingerolu ve vzorcích zázvorovníku lékařského. Nejprve byly zvoleny vzorky z čerstvě připraveného oddenku zázvoru pravého. Dále byly hodnoceny hladiny analytů v modelových vzorcích sušeného Zázvoru mletého. Ve vzorcích oddenků zázvoru pravého i vzorcích sušeného Zázvoru mletého měl vždy nejvyšší odezvu 6-gingerol. Kapsaicin nebyl nalezen v žádném vzorku. 6-shogaol byl nalezen pouze ve vzorcích sušeného Zázvoru mletého. Extrakce ostatních látek závisely na způsobech přípravy jednotlivých vzorků. Během optimalizace metody bylo vyzkoušeno několik mobilních a stacionárních fází. Vhodnou mobilní fází byla mobilní fáze acetonitril - voda v poměru 50/50 (v/v). Zvolenou stacionární fází pro analýzu byla chromatografická kolona Ascentis® Express Phenyl-Hexyl (100 x 4,6 mm; 2,7 µm), která byla použita i pro částečnou validaci metody. Průtok mobilní fáze byl nastaven na 1 ml/min a...
|
|
|
Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení ketoprofenu v léčivých přípravcích
Bajcurová, Lucie ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Lucie Bajcurová Konzultant: PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Název rigorózní práce: Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení ketoprofenu v léčivých přípravcích Byla validována již vyvinutá metoda pro stanovení ketoprofenu v léčivém přípravku PRONTOFLEX 10% kožní sprej, roztok. Přesnost vyjádřená jako relativní směrodatná odchylka je 1,43 %. Správnost vyjádřená jako výtěžnost je 101,52 %. Korelační koeficient R je větší než 0,999. Bylo pokračováno ve vývoji metody pro stanovení ketoprofenu v léčivém přípravku Ketonal 5% krém. Vyvinutá metoda byla validována. Optimální chromatografické podmínky byly: kolona SUPELCO Discovery C18 (150 mm x 4,6 mm, 5 µm), mobilní fáze acetonitril : voda : fosforečnanový pufr 3,5 (39:59:2, v/v/v), rychlost průtoku mobilní fáze 1,5 ml/min, dávkovaný objem 5 µl, UV detekce při vlnové délce 233 nm. Celkový čas analýzy byl pod 10 minut. Jako vnitřní standard byl užit ethylparaben. Přesnost vyjádřená jako relativní směrodatná odchylka je 0,64 %. Správnost vyjádřená jako výtěžnost je 98,10 %. Korelační koeficient R je větší než 0,998.
|
|
|
Stanovení vitamínu C a dehydroaskorbové kyseliny s využitím metody UPLC-MS
Proroková, Zuzana ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Spojení ultra vysoko účinné kapalinové chromatografie s detekcí pomocí hmotnostního spektrometru (UHPLC-MS) poskytuje metodu, která je velice rychlá a citlivá. Tato diplomová práce byla zaměřena na využití UHPLC-MS ke stanovení kyseliny askorbové (AA) a dehydroaskorbové (DHA). AA je malá polární molekula, která působí jako antioxidant. Oxidací AA vzniká DHA. Poměr AA a DHA je ukazatelem redoxního stavu organismu. Pro stanovení AA a DHA již bylo vyvinuto několik metod, které však většinou neumožňují současné stanovení, ale vyžadují vícekrokový postup subtrakce. Optimalizace UHPLC-MS metody pro stanovení AA a DHA zahrnuje volbu mobilní a stacionární fáze a nastavení hmotnostního detektoru. Volba vhodných podmínek závisela především na retenčním čase a odezvě detektoru. Byl sledován vliv stacionární fáze a dále koncentrace, pH a složení mobilní fáze na retenci AA a DHA. Byl sledován i vliv mobilní fáze na stabilitu AA a DHA. Porovnávanými stacionárními fázemi byly kolona BEH Shield RP C18, BEH HILIC a BEH Amide kolona. Nejlepších výsledků bylo dosaženo na koloně BEH Shield RP C18. Pro zjištění vhodné mobilní fáze byla provedena měření s 0,1%, 0,05%, 0,01% kyselinou mravenčí, 0,1%, 0,05%, 0,01% kyselinou octovou, mravenčanem amonným o pH 3,5 a octanem amonným o pH 4,4 a 6,8 jako vodnou složkou. Nakonec...
|
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení výbušniny diazodinitrofenolu
Ihnát, Lukáš ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatinský, PhD. Názov diplomovej práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení výbušniny diazodinitrofenolu Bola vyvinutá a optimalizovaná HPLC metóda pre stanovenie diazodinitrofenolu spolu s pikraminanom sodným. Použitá kolóna bola Ascentis® Express C18 10cm x3mm; 2,7µm častice. Látky boli detekované UV spektrofotometrom pri 220 nm. Izokratická elúcia prebiehala s mobilnou fázou o zložení 0,085% H3PO4 a acetonitrilom v pomere 70/30. Prietok mal rýchlosť 0,8 ml/min. Termostat bol nastavený na 50řC. Retenčné časy pri týchto podmienkach boli: tDDNP=1,324 min a tPikNa=4,012 min. Kľúčové slová: stanovenie, pikraminan sodný, diazodinitrofenol, HPLC, chromatografia, dinol, DDNP
|
|
|
Vývoj imunochromatografického stanovení pro testování reálných vzorků obsahujících TNT
Kosařová, Lucie ; Chocholouš, Petr (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Lucie Kosařová Školitel: PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj imunochromatografického stanovení pro testování reálných vzorků obsahujících TNT V dnešní době je stále více vyžadováno velice rychlé získání výsledků. Zejména to platí pro látky nebezpečné a potenciálně nebezpečné. Jednou z takových látek je 2,4,6-trinitrotoluen (TNT), látka která byla testována v průběhu této práce. TNT byl značně používán jako výbušnina pro vojenské účely a je stále jednou z nejpoužívanějších výbušnin. Jeho výhody, jako nízké výrobní náklady, bezpečná manipulace a dobrá výbušnost, může vést ke zneužití této sloučeniny teroristy. TNT je navíc známým polutantem kvůli jeho toxicitě a nízké biodegradabilit. Může kontaminovat povrchovou i spodní vodu, půdu a sedimenty, a tak způsobovat problémy jak v životním prostředí, tak zdravotní problémy. Proto je požadováno stanovit tuto nitroaromatickou sloučeninu v minimálních koncentracích, velmi rychle i mimo laboratoř. Tyto požadavky může splnit lateral flow test. V průběhu této práce byl vyvinut imunochromatografický test (LFIA) založený na značení koloidním zlatem pro detekci TNT v reálných vzorcích. Tyto vzorky byly získány kontrolovaným výbuchem TNT,...
|
|
| |
|
| |
|
|
Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení obsahu konzervačních látek v léčivých přípravcích
Harmáčková, Barbora ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
4 ABSTRAKT Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Barbora Harmáčková, DiS. Školitel: doc. PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení obsahu konzervačních látek v léčivých přípravcích Tato diplomová práce byla zaměřena na vývoj a validaci metod pro stanovení obsahu konzervačních látek v léčivých přípravcích, zejména thiomersalu a benzalkonium- chloridu. Při vývoji se vycházelo ze 2 HPLC metod, které pro benzalkonium-chlorid používají směs methanolu a 7,5 mM roztoku fosforečnanu draselného v poměru 68 : 32 a pro thiomersal směs methanolu a fosfátového pufru v poměru 65 : 35 : 0,9. Vývoj metod pro obě zmíněné látky spočíval hlavně v optimalizaci složení mobilní fáze a teplotních podmínek analýzy. Byla přitom sledována především délka analýzy a dále rozlišení a symetrie píků stanovovaných látek. V konečné verzi HPLC metody pro benzalkonium- chlorid byla zvolena izokratická eluce s mobilní fází MetOH : K3PO4 ( pH 3, 7,5 mM) v poměru 73 : 27 při teplotě 50řC. V konečné verzi pro thiomersal byla použita HPLC metoda se stejným složením mobilní fáze jako v předlohové studii, ale průtok byl zvýšen z 0,6 ml/min na 1 ml/min pro zrychlení analýzy a zlepšení symetrie píku. Validace prokázala, že metody poskytují...
|
|
|
Využití systému přepínání kolon v HPLC pro stanovení vybraných mykotoxinů ve vzorcích piva na českém trhu
Lhotská, Ivona ; Ramos, María Carolina Fernández (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Ivona Lhotská Školitel, konzultant: María Carolina Fernández Ramos, Ph.D, Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Využití systému přepínání kolon v HPLC pro stanovení vybraných mykotoxinů ve vzorcích piva na českém trhu Byla vytvořena nová, rychlá a citlivá metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie pro současné stanovení mykotoxinů ochratoxinu A a citrininu v pivu za použití přepínání kolon pro on-line úpravu vzorku. 100 µl piva bylo přímo dávkováno do systému. Izolace analytů z matrice piva proběhla na předkoloně Ascentis Express RP-C18 (5 x 4,6 mm, 2,7 µm) promýváním methanolem - 0,5% vodným roztokem kyseliny octové (30:70, v/v) o průtoku 2 ml/min po dobu 2 minut. Po přepnutí ventilu byly látky dále separované na chromatografické koloně Ascentis Express Phenyl-Hexyl (100 x 4,6 mm, 2,7 µm) mobilní fází o průtoku 1 ml/min ve složení acetonitril - 0,5% vodný roztok kyseliny octové (45:55, v/v). V čase 3 - 5,5 minuty lineárně narůstá gradient na 75:25. Chromatografická kolona byla temperována na 50řC. Fluorimetrická detekce byla nastavena na vlnové délky Ex 335 nm, Em 497 nm. Analýza jednoho vzorku včetně on-line úpravy trvá 6 minut. Limit kvantifikace této metody je 0,01 µg/l...
|
host ::
RSS.