|
|
Imunochemické stanovení enzymů DHRS8 a DHRS12 v lidských tkáních
Svobodová, Markéta ; Novotná, Eva (vedoucí práce) ; Zemanová, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Markéta Svobodová Školitel: RNDr. Eva Novotná, Ph.D. Název diplomové práce: Imunochemické stanovení enzymů DHRS8 a DHRS12 v lidských tkáních Dehydrogenasa/reduktasa (SDR rodiny) člen 8 (DHRS8, SDR16C2) a dehydrogenasa/reduktasa (SDR rodiny) člen 12 (DHRS12, SDR40C1) jsou lidské mikrosomální enzymy, které patří do nadrodiny dehydrogenas/reduktas s krátkým řetězcem (SDR). Tato nadrodina představuje jednu z největších proteinových skupin. SDR enzymy se podílejí na metabolismu různých endogenních a cizorodých látek a jsou zapojeny do fyziologických i patologických procesů. Nicméně, stále existuje mnoho enzymů, které nejsou dostatečně charakterizovány. Doposud jsou k dispozici informace o DHRS8 jen na úrovni mRNA a o její katalytické aktivitě vůči 5α-androstan-3α-17β-diolu. Navíc neexistují dosud publikované informace (kromě predikce) ohledně DHRS12. Cílem této studie bylo prozkoumat expresi DHRS8 a DHRS12 v různých lidských tkáních na úrovni proteinu. Vzorky tkáně byly odebrány od čtyř mužů středního věku po náhlé smrti bez zjevného onemocnění. Detekce proteinů byla provedena pomocí Western blottingu a specifických protilátek. Rekombinantní forma hledaných proteinů (DHRS12, DHRS8) byla exprimována v...
|
|
|
Příprava savčích vektorů kódujících vybrané mikrosomální SDR enzymy
Slezák, Jan ; Hofman, Jakub (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických v d Kandidát: Jan Slezák kolitel: RNDr. Jakub Hofman, Ph.D. Název diplomové práce: P íprava sav ích vektor kódujících vybrané mikrosomální SDR enzymy Mikrosomální dehydrogenasy/reduktasy s krátkým et zcem DHRS1, DHRS7 a HSD11b1 (SDR19C1, SDR34C1, SDR26C1) jsou membránov vázané NAD(P)H-dependentní enzymy metabolizující iroké spektrum substrát nesoucích karbonylovou skupinu. Tyto enzymy z nadrodiny dehydrogenas/reduktas s krátkým et zcem zprost edkovávají metabolismus endogenních látek, jako jsou glukokortikoidy, retinoidy, sfingolipidy stejn jako r zná xenobiotika. Mimo jejich biologické role se podílejí na rozvoji záva ných onemocn ní (nap . nádorová onemocn ní, Alzheimerova choroba, obesita aj.). Znalost inhibi ní a substrátové specifity m e vést k lep ímu pochopení funkcí t chto enzym v organismu a k novým terapeutickým p ístup m. Cílem této práce bylo p ipravit sav í vektory kódující DHRS1, DHRS7 a HSD11b1. Prvním krokem byl návrh primer a amplifikace cDNA. Primery nesly sekvence rozeznávané restrik ními endonukleasami sou asn obsa ené v mnoho etném klonovacím míst pCI plasmidu, co umo nilo vytvo ení lepivých konc a následné spojení insertu s plasmidem pomocí ligace. Takto p ipravené vektory byly...
|
|
|
Klonování a příprava plasmidů pro reportérový esej lidské GPX7
Hanousková, Barbora ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Barbora Hanousková Školitel: Ing. Petra Matoušková, PhD. Název diplomové práce: Klonování a příprava plasmidů pro reportérový esej lidské GPx7 Glutathion peroxidázy (GPx), katalyzují redukci H2O2 a organických hydroperoxidů na vodu nebo odpovídající alkoholy. Odstraňují tak pro buňku nebezpečné sloučeniny a chrání ji před buněčným stresem. Zatím bylo objeveno v lidském genomu celkem 8 genů kódujících GPx. GPx7, které se práce věnuje, je monomerní enzym, který má antioxidační účinky a účastní se skládání proteinů. Snížená exprese GPx7 byla zaznamenána u karcinomu prsu, Barrettovy dysplázie jícnu nebo karcinomu jícnu. Spekuluje se proto o GPx7 jakožto klasickém nádorovém supresoru, jehož inaktivace může vést k rozvoji rakoviny. Diskutuje se působení mikroRNA (miRNA) v jehož důsledku dochází ke snížení exprese genu pro GPx7. MiRNA jsou malé jedno řetězcové nekódující molekuly RNA, které se významně podílejí na regulaci genové exprese. Jejich hlavní funkcí je inhibice genové exprese na post-transkripční úrovni, tedy zabraňují translaci mRNA do struktury proteinu. Děje se tak specifickou vazbou miRNA na vazebná místa hlavně ve 3'UTR oblasti mRNA. Cílem této práce je příprava plasmidů, které budou...
|
|
|
Příprava savčích vektorů kódujících vybrané aldo-ketoreduktasy
Herbolt, Daniel ; Hofman, Jakub (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
1 Abstrakt Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Daniel Herbolt Školitel: RNDr. Jakub Hofman, Ph.D. Název diplomové práce: Příprava savčích vektorů kódujících vybrané aldo-ketoreduktasy Aldo-ketoreduktasy 1B1, 1B10 a 1C1 (AKR1B1, AKR1B10, AKR1C1) jsou NADPH-dependentní enzymy metabolizující celou řadu substrátů obsahujících karbonylovou skupinu. Tyto enzymy z nadrodiny aldo-ketoreduktas zprostředkovávají redukci endogenních látek, jako např. steroidních hormonů a cukrů, stejně tak jako mnoha různých xenobiotik a léčiv. Mimo svých fyziologických rolí se významnou měrou podílí na genezi několika závažných onemocnění (např. rakovina, diabetes aj.). Inhibice AKR1B1, AKR1B10 a AKR1C1 je považována za slibný terapeutický přístup pro léčbu těchto onemocnění. Cílem předkládané práce bylo připravit savčí vektory kódující AKR1B1, AKR1B10 a AKR1C1. Prvními kroky bylo navržení primerů a amplifikace cDNA klonovaných enzymů. Primery nesly sekvenci rozpoznávanou restrikčními endonukleasami přítomnými v multiklonovacím místě pCI plasmidu, což umožnilo vytvoření lepivých konců pomocí restrikce a následné spojení insertu a plasmidu za využití ligace. Připravené vektory byly transformovány do bakterií Escherichia coli HB101. U vybraných kolonií byla ověřena...
|
|
| |
|
| |
|
|
Zrychlování komunikace a projevů každodennosti v informační společnosti. Paralela v přístupech Paula Virilia a Godfreye Reggia
Novotná, Eva ; Fišerová, Michaela (vedoucí práce) ; Sluková, Tereza (oponent)
Tato diplomová práce se zabývá zaváděním nových technologií v informační společnosti, které způsobují zrychlování aspektů každodennosti a důsledkem této situace je zvýšená míra odcizení a anonymity lidí ve městě. Práce porovnává pohled dvou autorů. První z nich je francouzský filozof a spisovatel Paul Virilio, druhý je americký režisér Godfrey Reggio. Oba autoři vnímají proměnu dnešní společnosti negativně a popisují důsledky, které vznikají zaváděním nových technologií. Každý z nich využívá jinou formu pro své vyjádření - Paul Virilio písmo a text, Godfrey Reggio dokumentární film. Přesto se shodují v názorech týkající se souvisejících témata a docházejí k podobným závěrům. Cílem této diplomové práce je porovnat oba autory a jejich myšlenky a navrhnout možná řešení, která by zabránila negativním důsledkům zrychlování aspektů každodennosti. Klíčová slova Virilio, Reggio, zrychlování, technologie, informační společnost, média, komunikace
|
|
|
Stanovení enzymů v klinickobiochemické laboratoři
Macounová, Eva ; Dršata, Jaroslav (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Smyslem této práce je vypracování přehledu nejpoužívanějších enzymů v laboratoři klinické biochemie. Začátek práce je věnován významu enzymů jako klinickobiochemických analytů. V druhé části jsem si vybrala osm enzymů a jeden izoenzym, které se nejčastěji stanovují v klinických laboratořích, konkrétně na mém pracovišti v soukromé laboratoři Prevedig v Praze. Jedná se o enzymy láktátdehydrogenáza (LD), alaninaminotransferáza (ALT), asparátaminotransferáza (AST), glutamyltransferáza(GMT), kreatinkináza (CK) myokardiální izoenzym kreatinkinázy (CK-MB), alkalická fosfatáza (ALP), amyláza (AMS) a lipáza (LPS). Zaměřuji se zde na jejich funkci v organismu, výskyt v jednotlivých tkáních a význam v diagnostice chorob. Dále zde uvádím fyziologické meze používané na mém pracovišti a různé používané metody stanovení s přesnějším důrazem na metodu používanou v laboratoři Prevedig. V poslední kapitole se přesněji zaměřuji na význam enzymů ve vztahu ke stanovení akutního infarktu myokardu. Popisuji zde podrobný vývoj biochemických markerů používaných k jeho stanovení od 50. let minulého století, kdy se začaly v laboratoři stanovovat enzymy, přes postupný objev přesnějších izoenzymů až po nejcitlivější markery využívané v současnosti. V závěru práce je porovnání všech popisovaných kardiomarkerů a určení výhod...
|
|
|
Panelová výstavba v Praze v 80. letech 20. století: srovnání sídliště Barrandov a Žižkov
Němcová, Alice ; Pech, Milan (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Tato diplomová práce se zabývá panelovou výstavbou v Praze v osmdesátých letech na příkladu sídliště Barrandov a Žižkov. U obou sídlišť popisuje okolnosti jejich vzniku, vývoj plánů a konečnou realizaci. Zohledněn je též výtvarný generel obou sídlišť v návaznosti na obecnou problematiku umění ve veřejném prostoru v období normalizace. Práce dokládá vliv Jiřího Ševčíka, Kevina Lynche a Christiana Norberga-Schulze na autory Barrandovského sídliště. Východiska těchto architektů jsou v kontrastu s problematičtějším přístupem projektantů přestavby Žižkova. V kapitole věnované Žižkovu jsou popsány nerealizované i realizované plány přestavby včetně jejich vývoje a přijetí veřejností. V závěru práce jsou srovnána obě sídliště a popsán jejich současný stav.
|
|
|
Výstavba panelových bytových domů v sedmdesátých letech 20. století s důrazem na výstavbu "Severního města" v Praze
Kokeš, Václav ; Biegel, Richard (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Ve své bakalářské práci Výstavba panelových bytových domů v sedmdesátých letech 20. století s důrazem na výstavbu Severního Města v Praze jsem se zabýval specifiky vzniku a realizace sídlišť na severním okraji Prahy. V úvodních kapitolách jsem nastínil politické a společenské pozadí doby, ve které sídliště vznikala. Také jsem popsal fungování architektonických ateliérů v sedmdesátých letech, jejich vztah s investory a stavebními firmami. V následujících kapitolách jsem se zaměřil na jednotlivá sídliště Severního Města - Prosek, Ďáblice a Bohnice. Nastínil jsem historický, geografický a urbanistický kontext místa, popsal architektonické a urbanistické soutěže na řešení sídlišť. V kapitole věnované realizaci a dnešnímu stavu sídliště jsem se také snažil jednotlivé čtvrti porovnat, uchopit je v širším kontextu a popsat jejich jedinečnost. V závěrečných kapitolách jsem popsal možné perspektivy kritiky výstavby sídlišť Severního Města a uvedl jsem některé české paralely, např. brněnská sídliště Juliánov a Lesná. # Praha, sídliště, panelový dům, Severní Město, Prosek, Ďáblice, Bohnice Abstrakt
|
host ::
RSS.