Original title: Využití izoelektrické fokusace v rozbíhavém toku a kapilární reverzně-fázové kapalinové chromatografie při separaci modelové směsi peptidů
Translated title: Using of divergent flow isoelectric focusing and capillary liquid
Authors: Duša, Filip ; Moravcová, Dana ; Kahle, Vladislav ; Šlais, Karel
Document type: Papers
Conference/Event: Monitorování látek v životním prostředí /8./, Luka nad Jihlavou (CZ), 2011-09-20 / 2011-09-22
Year: 2011
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
Separace analytů z komplexních směsí dnes hraje významnou roli při jejich další identifikaci. V článku je navržena metoda dvoudimenzionální separace směsi tryptických peptidů hovězího sérového albuminu. V první dimenzi jsou peptidy rozděleny isoelektrickou fokusací v rozbíhavém toku a v druhé dimenzi následuje kapalinová chromatografie s reverzní fází. Díky charakteru vstupní směsi je možné u izoelektrické fokusace využít autofokusaci peptidů, tzn. fokusaci bez přídavku nosných amfolytů. Chromatogramy z druhé dimenze byly zpracovány do podoby vrstevnicové mapy. Získaná data ukázala dobrou separační účinnost izoelektrické fokusace a díky autofokusaci bylo možné rozdělit i peptidy s blízkými izoelektrickými body. Separation of analytes from complex matrices play important role in their further identification. In this article we propose two-dimensional separation method of bovine serum albumin tryptic peptides. At the first dimension peptides are separated by divergent flow isoelectric focusing followed by reverse-phase liquid chromatography as the second dimension. Due to composition of input mixture it is possible to use autofocusing mode in first dimension. In this mode peptides are focused without addition of carrier ampholytes. Chromatograms from the second dimension were processed into contour map. Acquired data showed good separation efficiency of isoelectric focusing. Autofocusing mode enabled better resolution of peptides with close isoelectric points.
Keywords: DF-IEF; peptides; RPLC
Project no.: CEZ:AV0Z40310501 (CEP), IAAX00310701 (CEP), LC06023 (CEP)
Funding provider: GA AV ČR, GA MŠk
Host item entry: Monitorování cizorodých látek v životním prostředí XIII, ISBN 978-80-7395-450-5

Institution: Institute of Analytical Chemistry AS ČR (web)
Document availability information: Fulltext is available at the institute of the Academy of Sciences.
Original record: http://hdl.handle.net/11104/0205932

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-81799


The record appears in these collections:
Research > Institutes ASCR > Institute of Analytical Chemistry
Conference materials > Papers