Název:
Senzory pro ptačí chřipku
Autoři:
Krejčová, Ludmila Typ dokumentu: Disertační práce
Rok:
2014
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Rychlost mutací chřipkových virů je až stonásobně vyšší v porovnání s ostatními viry a právě díky rychlosti mutačních změn je chřipka považována za nejsilnějšího člena skupiny potencionálních původců pandemie. Abychom byli schopni předcházet vzniku a šíření pandemie, která by mohla ohrozit život sedmi miliard lidí, je nezbytné mít k dispozici metody pro rychlou a citlivou detekci jakéhokoliv subtypu chřipkového viru. Jedním z progresivních směrů detekce biomolekul jsou elektrochemické senzory a biosenzory. Cílem dizertační práce bylo navržení senzoru pro detekci chřipkových virů, především ptačí chřipky subtypu H5N1, založeného na izolaci částí virionu pomocí paramagnetických částic a následné elektrochemické detekci cílové molekuly. Byly navrženy a optimalizovány metody pro izolaci a detekci chřipkového antigenu (hemaglutininu) a nukleové kyseliny (DNA oligonukleotidu odvozeného od chřipkového genomu). V obou případech bylo použito kvantových teček (QDs) pro označení cílové molekuly. QDs, respektive jejich elektro-aktivní kovová část byla využita k nepřímé elektrochemické detekci cílové molekuly. Cílem práce bylo vyvinout rychlé, citlivé a levné metody pro izolaci a následnou elektrochemickou detekci chřipkových virů s možným využitím square-wave voltametrie a diferenční pulzní voltametrie.Mutation rate of influenza viruses is up to a hundred times higher, when compared to other viruses. Thanks to the speed of mutational changes, influenza is considered as the strongest member of the group of potential pandemics agents. In order to prevent the occurrence and spread of pandemic, which could have impact on worldwide population, we need methods for rapid detection of each subtype of influenza viruses. One of the most progressive way of detection of biomolecules are electrochemical sensors and biosensors. The aim of the thesis was to design sensors and biosensors for influenza virus detection, especially avian influenza H5N1, that are based on the isolation of two different parts of influenza virion using paramagnetic particles, coupled with subsequent electrochemical detection of isolated target molecules. We designed and optimized methods for isolation and detection of influenza antigen (hemagglutinin) and influenza nucleic acid (DNA oligonucleotide derived from genomic RNA of influenza). In both cases, quantum dots (QDs) were used as the label of target molecules for electrochemical detection. Two fast, sensitive and low-cost method for isolation and electrochemical detection by square-wave voltammetry and differential pulse voltammetry were applied.
Klíčová slova:
chřipkové viry; hemaglutinin; pandemie; ptačí chřipka