Original title:
Izolace plasmidové DNA z bakterií a její transfekce do buněčné linie HEK293
Translated title:
Plasmide DNA isolation from bacteria and transfection to HEK293 cell line
Authors:
Měsíčková, Klára ; Fohlerová, Zdenka (referee) ; Svoboda, Ondřej (advisor) Document type: Bachelor's theses
Year:
2016
Language:
cze Publisher:
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta elektrotechniky a komunikačních technologií Abstract:
[cze][eng]
Izolace plasmidové DNA je v mikrobiologii důležitou a často využívanou metodou. Samotné izolaci předchází příprava bakteriálních kompetentních buněk a amplifikace plasmidů. V této práci jsou plasmidy CHR2, ASAP1, ASAP-3, ASAP-5 a Kir2.1. nejprve amplifikovány v bakteriích E.Coli kmenu DH5 a poté metodou fenol-chloroformové extrakce izolovány. K určení správnosti izolace slouží gelová elektroforéza a transfekce do buněčné linie HEK293.
The isolation of plasmid DNA is an important and often used method in microbiology. The isolation itself is preceded by preparation of bacterial competent cells and by amplification of the plasmids. In this stage, plasmids CHR2, ASAP1, ASAP-3, ASAP-5 and Kir2.1. are first amplified in E.Coli bacteria of the DH5 strain and then isolated through the method of phenol-chloroform extraction. Gel electrophoresis and transfection to cellular line HEK293 are used for determining the correctness of the isolation.
Keywords:
DNA isolation; HEK293; Plasmid; transfection; HEK293; izolace DNA; Plasmid; transfekce
Institution: Brno University of Technology
(web)
Document availability information: Fulltext is available in the Brno University of Technology Digital Library. Original record: http://hdl.handle.net/11012/61711