Original title: Oprava poškození DNA vyvolaného sirným yperinem a jeho vztah k cytotoxicitě
Translated title: The repair of DNA damage induced with suphur mustard and its relationship to the cytotoxicity
Authors: Jílková, Martina ; Vopršalová, Marie (advisor) ; Herink, Josef (referee)
Document type: Master’s theses
Year: 2008
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
SOUHRN Hlavním úkolem této práce bylo prostudovat indukci a následně mechanismus reparace poškození DNA sirným yperitem u specifických buněčných linií v dávkové závislosti a jejich vliv na cytotoxicitu yperitu. Yperit je zpuchýřující otravná látka, která může být zneužita v lokálních válečných konfliktech, při teroristických útocích nebo může dojít k náhodné expozici při likvidaci jeho zásob. Yperit vyvolává v interakci s buňkou závažné alkylační poškození DNA, které zahrnuje přímé zlomy vláken DNA, monoaddukty s adeninem a guaninem a vznik křížových vazeb interakcí s guaniny v obou komplementárních vláknech DNA.V této práci jsme se zaměřili na křížové vazby a k jejich detekci použili metodu buněčné gelové elektroforézy (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE).Tato metoda slouží k detekci zlomů DNA a její pomocí lze hodnotit poškození DNA jednotlivých buněk. V námi použité modifikaci metody jsme u analyzovaných buněk nejdříve indukovali standardní množství zlomů DNA styrenoxidem, neboť přítomné křížové vazby brání rozplétání DNA. Ke studiu mechanismů reparace specifického poškození DNA jsme s výhodou použili buněčné linie s jasně definovanými deficity v určitých fázích opravy DNA. Pro experimenty jsme použili linie ovariálních buněk křečíka čínského AA8 a jejich mutanty UV-5 deficitní v helikázové aktivitě a... The aim of this study was to investigate the induction and repair mechanisms of DNA damage caused by sulphur mustard in specific cell lines and their relationship to cytotoxicity of sulphur mustard. Sulphur mustard is a chemical warfare agent of the blistering agent category, which can be misused in local conflicts, terrorist attacks and during liquidation of its storage. Sulphur mustard is an alkylating agent, which interacts with a wide range of cellular macromolecules including DNA, RNA and proteins. Sulphur mustard forms single - strand breaks, monofunctional guanine and adenine adducts, as well as interstrand cross-links involving the two guanines in interaction with DNA. This study is aimed at cross-links. We used the Single Cell Gel Electrophoresis (SCGE, comet assay) for their detection. It is a method of evaluation of single cells ambeded in agarose. It is used for detection of DNA single strand breaks in a single cell. In our modification of the method we determined cross-links, which make the alkaline DNA unwinding impossible. That is why we had to induce a standard number of single strand breaks in DNA by styreneoxide (at a certain concentration and exposure time) before the comet assay. We studied DNA repair mechanisms of specific DNA lesions using specific cell lines with clearly...

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/16163

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-537322


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Master’s theses