Original title:
Zapojení polyhydroxyalkanoátů do stresové odpovědi termofilní bakterie Schlegelella thermodepolymerans
Translated title:
Involvement of polyhydroxyalkanoates in stress response of thermophilic bacterium Schlegelella thermodepolymerans
Authors:
Berger, Matyáš ; Nováčková, Ivana (referee) ; Slaninová, Eva (advisor) Document type: Bachelor's theses
Year:
2023
Language:
cze Publisher:
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická Abstract:
[cze][eng]
Tato bakalářská práce je zaměřena na zkoumání vlivu rozdílných stresových faktorů na bakterii Schlegelella thermodepolymerans, která je schopná produkce polyhydroxyalkanoátů. V tomto případě ve formě poly(3-hydroxybutyrátu). Vybranými stresovými faktory byly teplotní šok, opakované zmrazení a rozmrazení. Posledním stresovým faktorem byl osmotický stres, vyvolaný roztoky chloridu sodného o různé koncentraci. V teoretické části byly charakterizovány polyhydroxyalkanoáty, termofilní organismy, mechanismy jednotlivých stresů a metody analýzy polyhydroxyalkanoátů. V experimentální části byly porovnány dva kmeny termofilní bakterie Schlegelella thermodepolymerans, a to M 15344 a DSM 15344. Byla porovnána odolnost vůči stresu obou kmenů, měřením viability za pomocí metody průtokové cytometrie. Během měření byl sledován nárůst optické hustoty, a za pomocí GC-FID byl stanoven obsah P(3HB) v biomase. Morfologické změny způsobené stresy byly pozorovány pomocí metod elektronové mikroskopie Cryo-SEM a STEM. Kmen DSM 15344 vykazoval lepší růst a produkci P(3HB), než kmen M 15344, který naopak lépe odolával vystavenému stresu.
This bachelor's thesis is focused on investigating the effect of different stress factors on the bacteria Schlegelella thermodepolymerans, which is capable of producing polyhydroxyalkanoates. In this case, in the form of poly(3-hydroxybutyrate). The selected stress factors were temperature shock, repeated freezing and defrosting. The last stress factor was osmotic stress, caused by sodium chloride solutions of different concentrations. In the theoretical part, polyhydroxyalkanoates, thermophilic organisms, mechanisms of individual stresses and methods of analysis of polyhydroxyalkanoates were characterized. In the experimental part, two strains of the thermophilic bacteria Schlegelella thermodepolymerans were compared, namely M 15344 and DSM 15344. The stress resistance of both strains was compared by measuring viability using flow cytometry. During the measurement, the increase in optical density was monitored, and the content of P(3HB) in the biomass was determined using GC-FID. Morphological changes caused by stresses were observed using Cryo-SEM and STEM electron microscopy methods. The DSM 15344 strain showed better growth and P(3HB) production than the M 15344 strain, which, on the other hand, showed better stress resistance.
Keywords:
flow cytometry; Polyhydroxyalkanoates; Schlegelella thermodepolymerans; stress response of microorganisms; termophilic microorganism; Polyhydroxyalkanoáty; průtoková cytometrie; Schlegelella thermodepolymerans; stresová odpověď mikroorganismů; termofilní mikroorganismy
Institution: Brno University of Technology
(web)
Document availability information: Fulltext is available in the Brno University of Technology Digital Library. Original record: http://hdl.handle.net/11012/210787